皮膚疾病動(dòng)物模型建模優(yōu)勢(shì)

PMID：15082495、7561688)①HE染色②關(guān)節(jié)側(cè)視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關(guān)動(dòng)物模型1.糖尿病***1）模型構(gòu)建（PMID：30826357）使用鏈佐星（STZ）注射ApoE-/-小鼠，建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型，同時(shí)與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng)18周2）模型檢測(cè)指標(biāo)（PMID：29107826、28345659）3）生化指標(biāo)檢測(cè)4）超聲檢測(cè)5）主動(dòng)脈染色檢測(cè)2.糖尿病心肌病1）誘發(fā)性DCM模型模型構(gòu)建（PMID：29732743）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：大鼠方法：各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1，pH，現(xiàn)配現(xiàn)用)，并給予高脂飼料進(jìn)行喂養(yǎng)。①模型檢測(cè)指標(biāo)血糖檢測(cè)②HE染色③超聲心電圖2）自發(fā)性1型DCM模型3）自發(fā)性2型DCM模型3.糖尿病視網(wǎng)膜病變1）模型構(gòu)建PMID：30862093實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠方法：糖尿病雄性db/db（+/+Leprdb/J）小鼠。喂養(yǎng)至21周2）模型檢測(cè)指標(biāo)①膠質(zhì)原纖維酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR組視網(wǎng)膜組織內(nèi)核層及外核層結(jié)構(gòu)松散，細(xì)胞排列紊亂GCL，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層;INL，內(nèi)核層;ONL，外核層三、動(dòng)物模型構(gòu)建總結(jié)1.臨床資料合理性在納入臨床資料時(shí)，需關(guān)注特定疾病患者的流行病學(xué)趨勢(shì)，即疾病易發(fā)年齡，男女比例等，同時(shí)需考慮是否與體重、基因表達(dá)等具有相關(guān)性。2.模型合理性選擇合適，簡(jiǎn)便。上海東寰在動(dòng)物建模方面已經(jīng)有了多年的技術(shù)經(jīng)驗(yàn)。皮膚疾病動(dòng)物模型建模優(yōu)勢(shì)

1、動(dòng)物模型名稱：膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：200~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法：用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，腹部皮膚消毒，無(wú)菌操作沿腹部正中線剪開(kāi)腹腔，分離出膽管，在膽管近端和遠(yuǎn)端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分：0分：無(wú)明顯病變；1分：呈局灶性分布，受累面積在30%以下者；2分：呈多灶性分布，受累面積在30%-70%之間者；3分：呈彌漫性分布，受累面積在70%以上者。統(tǒng)計(jì)分析：每份標(biāo)本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個(gè)視野（共1.5mm2）進(jìn)行觀察，測(cè)定并計(jì)算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。閔行區(qū)阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模可根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。

    來(lái)源：ZSCI基礎(chǔ)研究中如果加入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分則使得研究更加趨于完善，投稿時(shí)中稿率也相應(yīng)會(huì)增加。但將動(dòng)物實(shí)驗(yàn)做好卻不是一件容易的事情。這篇文章主要講動(dòng)物模型的構(gòu)建技術(shù)，把骨科、糖尿病相關(guān)的動(dòng)物模型構(gòu)建做了一個(gè)***的技術(shù)匯總，建議先碼后讀，文章內(nèi)容有部分做了簡(jiǎn)化，想看詳細(xì)講解可以在文末獲取課件！一、骨科相關(guān)動(dòng)物模型1.骨關(guān)節(jié)炎1）骨關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建方法（誘發(fā)性）-關(guān)節(jié)腔內(nèi)手術(shù)法、關(guān)節(jié)腔注射法。2）模型評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)①SafraninO染色與OARSI評(píng)分（PMID：31046827、30942801）②HE染色與OARSI評(píng)分（PMID：30609097）③SafraninO染色與Mankin評(píng)分（PMID：30609097）2.骨質(zhì)疏松癥1）骨關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建方法去趨法模型PMID：31037128實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠方法：在戊巴比妥麻醉下進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除術(shù)以誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松癥，同時(shí)對(duì)照組小鼠*進(jìn)行卵巢外置但未切除。2）模型檢測(cè)指標(biāo)(PMID：31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)3.類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）是一種慢性自身免疫性疾病狀態(tài)，其特征是滑膜增生，軟骨退化和脊椎關(guān)節(jié)的骨侵蝕4.強(qiáng)直性脊柱炎1）強(qiáng)直性脊柱炎模型構(gòu)建方法2）模型檢測(cè)指標(biāo)。

1、動(dòng)物模型名稱：高脂飼料致高脂血癥大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：180~220g1、實(shí)驗(yàn)方法：大鼠給予高脂飼料喂養(yǎng)20天。分別于造模前和造模20天 ，測(cè)定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：造模20天后模型組大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC均增加，與對(duì)照組比較具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過(guò)程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料.開(kāi)展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結(jié)果與生物學(xué)信息資料等相關(guān)知識(shí)間的差距！

pcrmix：反應(yīng)條件：pcr擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳鑒定結(jié)果如圖3所示，從圖3中可以看出，6、8、9號(hào)為pirb基因敲入小鼠在、，wt小鼠pcr產(chǎn)物沒(méi)有這兩個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應(yīng)，引物如下：primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴(kuò)增出344bp的產(chǎn)物，而野生型沒(méi)有。pcr體系：反應(yīng)條件：(2)f1代小鼠測(cè)序：通過(guò)pcr擴(kuò)增后測(cè)序鑒定小鼠基因型，如圖4所示，為6號(hào)pirb基因敲入小鼠測(cè)序峰圖，pcr所用引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1：5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測(cè)f1代小鼠基因型：采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割dna分子，切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測(cè)過(guò)程如下：步驟a、提取f1代小鼠尾部dna；步驟b、制備探針，通過(guò)pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現(xiàn)與驗(yàn)證。Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模廠家

收集研究疾病的生物學(xué)信息資料。皮膚疾病動(dòng)物模型建模優(yōu)勢(shì)

pirb在軸突生長(zhǎng)錐表達(dá)，位于富含肌動(dòng)蛋白的前緣和synapsin免疫陽(yáng)性的囊泡中，在神經(jīng)元突起的表達(dá)呈點(diǎn)狀分布。文獻(xiàn)表明，pirb表達(dá)隨年齡增加，特別是在老齡認(rèn)知損傷的小鼠海馬中，pirb能夠抑制軸突再生和突觸可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚體對(duì)海馬長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)的破壞作用需要pirb的參與，在ad轉(zhuǎn)基因模型中，pirb不僅參與成年小鼠記憶缺失，而且介導(dǎo)幼年小鼠視皮層突觸可塑性的丟失。這些研究提示我們，pirb參與突觸可塑性，抑制pirb可能對(duì)ad起到***效應(yīng)。但是在cns，pirb的功能和下游抑制性信號(hào)通路仍然未被闡明，因此迫切需要pirb的細(xì)胞和動(dòng)物模型。目前對(duì)于pirb基因功能的研究，多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide，pep)和抑制劑，或者采用慢病毒轉(zhuǎn)染。前者受到是否能夠透過(guò)血腦屏障和抑制劑效率的影響，后者慢病毒轉(zhuǎn)染在原代細(xì)胞和在體的轉(zhuǎn)染效率比較低，使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問(wèn)題，我們通過(guò)crispr/cas9技術(shù)建立了pirb基因敲入小鼠，將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點(diǎn)，為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機(jī)制提供了很好的工具。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型。皮膚疾病動(dòng)物模型建模優(yōu)勢(shì)

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