黃浦區(qū)皮膚疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2021-10-19

    具體實施方式下面結合附圖和具體實施方式對發(fā)明作進一步闡述。本發(fā)明構建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內含子1內。具體來說,構建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進入rosa26基因的內含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構建方法,具體按照以下步驟具體實施:步驟1、根據小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內含子設計grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據庫基因,采用crispr脫靶效應軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點:**終選取兩個grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結構;步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序對打靶質粒載體進行驗證,圖1為構建好的pirb基因打靶載體的示意圖。明確研究疾病的獨特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。黃浦區(qū)皮膚疾病動物模型建模

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    空白組卵巢內細胞形態(tài)完整,可見各級卵泡生長活躍,并大多數(shù)為原始卵泡,卵泡顆粒層較多,黃體發(fā)育好。4mg、6mg組(***、八天給藥)有炎性細胞浸潤,各級卵泡減少,閉鎖卵泡增加。2mg組(連續(xù)給藥7天)可見很少次各級卵泡,及成熟卵泡,大多數(shù)為閉鎖卵泡,卵泡顆粒層變薄,黃體明顯減少。結論:使用%氯化鈉溶液及10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥)配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天,造模效果比較好。根據實驗結果得出:本發(fā)明可對比不同劑量順鉑、不同給藥時間的卵巢早衰造模方法,從而有效的確定大鼠卵巢模型建立方案。給本領域技術人員提供上述實施例,以完全公開和描述如何實施和使用所主張的實施方案,而不是用于限制本文公開的范圍。對于本領域技術人員而言顯而易見的修飾將在所附權利要求的范圍內。長寧區(qū)口碑好的疾病動物模型建模動物模型作為人類疾病的縮影。

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    其中可以看出手術側后爪的縮足閾值較手術前及對側后爪有***降低,且標準誤區(qū)間非常小。圖4是表1的數(shù)據通過曲線圖的方式展現(xiàn)。結果顯示:大鼠在術后***天即出現(xiàn)手術側后爪敏感,施加輕微的重量(4g左右)都會引起縮足表現(xiàn),這說明其痛閾明顯降低,對輕微的刺激均呈現(xiàn)抬腳,舔舐后足等痛覺過敏表現(xiàn)。這種表現(xiàn)維持至術后至少28天。而對側后爪在術前和術后縮足閾值變化不大,基本保持在20-25g。實施例3、模型的應用采用實施例1中描述的方法對兩組大鼠均進行了造模,l型棒的材料選擇的是h62黃銅或聚乳酸等不受磁場干擾、置入體內不會對神經造成化學刺激以及具有一定可塑性的材料。在造模后第七天應用重復經顱磁刺激(rtms)***大鼠,其中一組接受了真的磁刺激,為磁刺激組;另一組接受了假的磁刺激,為假刺激組。結果顯示,磁刺激組的大鼠縮足閾值較假刺激組明顯提高,如圖5所示。這表明磁刺激緩解了神經壓迫造成的疼痛,該模型可以用于磁刺激***的研究。以上詳細描述了本發(fā)明的較佳具體實施例。應當理解,本領域的普通技術無需創(chuàng)造性勞動就可以根據本發(fā)明的構思作出諸多修改和變化。因此。

1、動物模型名稱:膽管結扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:200~220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:用膽管結扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠端2處結扎膽管。手術后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準:肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫性分布,受累面積在70%以上者。統(tǒng)計分析:每份標本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個視野(共1.5mm2)進行觀察,測定并計算視野內小膽管伴纖維組織增生總面積。便于研究者按實驗目的需要隨時采取各種樣品。

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    新華社上海4月9日電(記者張建松)利用先進的基因編輯技術,我國科學家在***神經性疾病的基礎研究方面,取得重要進展。***在小鼠模型上,成功恢復長久性視力損傷小鼠的視力,同時還基本消除了帕金森模型小鼠的疾病癥狀。在科技部、國家自然科學基金委、中國科學院、上海市的相關項目資助下,由中國科學院腦科學與智能技術***創(chuàng)新中心(神經科學研究所)、上海腦科學與類腦研究中心、神經科學國家重點實驗室楊輝研究組完成的這項研究,通過基因編輯技術,成功誘導膠質細胞“變身”為神經元。這為阿爾茲海默癥、帕金森癥、青光眼等眾多神經退行性疾病的***,探索了一個新的途徑。國際**學術期刊《細胞》8日在線發(fā)表了相關研究論文。人類的神經系統(tǒng)包含成百上千種不同類型的神經元。在成熟的神經系統(tǒng)中,神經元一般不會再生,一旦死亡,就是長久性的。而神經元的死亡,則會導致不同的神經退行性疾病。在常見的神經性疾病中,視神經節(jié)細胞死亡導致的長久性失明和多巴胺神經元死亡導致的帕金森癥尤為特殊,它們都是由于特殊類型的神經元死亡所導致的。如何在成體中讓視神經節(jié)細胞和多巴胺神經元獲得再生?研究人員對小鼠模型的膠質細胞進行了基因編輯。構建人源移植瘤模型需要合適的免疫缺陷小鼠想知道如何選擇?鎮(zhèn)江疾病動物模型建模

動物模型的意義和優(yōu)越性!黃浦區(qū)皮膚疾病動物模型建模

    引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰。技術實現(xiàn)要素:針對上述現(xiàn)有技術,本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據“順鉑可誘導卵巢細胞凋亡,引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間,為篩選順鉑導致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結果可靠的實驗方法。本發(fā)明是通過以下技術方案實現(xiàn)的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型?;颍簩┝繛榘大w重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規(guī)購買得到,比如齊魯制藥公司生產的順鉑。進一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。黃浦區(qū)皮膚疾病動物模型建模

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