余姚巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

來源: 發(fā)布時間:2023-08-21

再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。Elisa試劑盒的優(yōu)點包括敏感性高、特異性強、結(jié)果可靠等。余姚巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

余姚巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法),Elisa試劑盒

小鼠酸脫氫酶α(PDHa)Elisa試劑盒:用抗小鼠PDHa抗體包被于酶標板上,實驗時標本或標準品中的PDHa會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠PDHa抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素??剐∈驪DHa抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠酸脫氫酶α(PDHa)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒小鼠酸脫氫酶α(PDHa)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色的底物,TMB在辣根過氧化物酶的催化下現(xiàn)藍色,加終止液后變黃。余姚巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Elisa試劑盒的優(yōu)化需要根據(jù)實際情況和需求進行調(diào)整,以適應(yīng)不同的檢測需求。

余姚巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法),Elisa試劑盒

小鼠蛋白激酶操作步驟:1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。6.每個孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

關(guān)于elisa試劑盒溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時間。一般來說,加完樣本和/或反應(yīng)試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,其孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達到37℃,從而適當(dāng)延長板條在溫箱中的放置時間。Elisa試劑盒的優(yōu)化操作需要根據(jù)實際就行技術(shù)表現(xiàn),例如加樣量、孵育時間、溫度等。

余姚巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法),Elisa試劑盒

ELISA檢測試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性的話。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。完整的ELISA試劑盒包含酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物)。臺州纖連蛋白(FN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Elisa試劑盒通常分為直接Elisa、間接Elisa、競爭性Elisa等不同類型。余姚巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。余姚巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

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