慢病毒（LV）包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝性?xún)r(jià)比超高

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年，依托于集團(tuán)公司泉心泉意深厚的資源和超過(guò)400家國(guó)內(nèi)客戶群體，生命科學(xué)領(lǐng)域一站式供應(yīng)鏈體系，以及高風(fēng)險(xiǎn)生物危險(xiǎn)材料進(jìn)出口平臺(tái)的優(yōu)勢(shì)，曼博生物嚴(yán)格篩選國(guó)際創(chuàng)新且經(jīng)過(guò)同行驗(yàn)證過(guò)的產(chǎn)品和技術(shù)，引入中國(guó)市場(chǎng)，開(kāi)發(fā)、孵育和推廣，致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術(shù)帶入中國(guó)，集中在為細(xì)胞/基因領(lǐng)域、/免疫，抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品，包括從Researchgrade到cGMP等級(jí)的無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基質(zhì)，轉(zhuǎn)染試劑、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù)，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無(wú)縫轉(zhuǎn)化。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-Bio。??如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！?如何優(yōu)化PEI轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染時(shí)的比例？慢病毒（LV）包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝性?xún)r(jià)比超高

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫(yī)藥科技服務(wù)，以創(chuàng)新和為價(jià)值理念，通過(guò)自身研發(fā)團(tuán)隊(duì)，以及與國(guó)內(nèi)外專(zhuān)業(yè)科研團(tuán)隊(duì)強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合，不斷創(chuàng)新，為生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)提供產(chǎn)品和服務(wù)。生物醫(yī)學(xué)工程是綜合應(yīng)用生命科學(xué)與工程科學(xué)的原理和方法，從工程學(xué)角度在分子、細(xì)胞、組織、乃至整個(gè)人體系統(tǒng)多層次認(rèn)識(shí)人體的結(jié)構(gòu)、功能和其他生命現(xiàn)象，研究用于防病、治病、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料、制品、裝置和系統(tǒng)技術(shù)的總稱(chēng)。如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！?液體PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝能夠提供多少PEI轉(zhuǎn)染試劑可以轉(zhuǎn)染哪些細(xì)胞？

準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí)，請(qǐng)用圓底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL離心管。轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí)，去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基，替換成無(wú)血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！?

材料：質(zhì)粒DNA指數(shù)生長(zhǎng)的真核細(xì)胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲(chǔ)存液（100μM）：稱(chēng)取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm濾膜過(guò)濾，儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES，調(diào)pH值到7.4，定容至1L，過(guò)濾（0.2μm濾膜）后儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩７椒ǎ?．細(xì)胞分盤(pán)：通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞，用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿，使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)基。如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！?用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)，一般和DNA的比例是多少？

對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞，可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-Bio?????。如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！?PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種穩(wěn)定的具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子?？芍С諭ND申報(bào)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝可高效轉(zhuǎn)染多種類(lèi)型細(xì)胞

PEI轉(zhuǎn)染試劑使用的時(shí)候有什么注意事項(xiàng)？慢病毒（LV）包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝性?xún)r(jià)比超高

1.對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞，可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物。?如想申請(qǐng)PEI試用裝，請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”，即可參加！慢病毒（LV）包裝PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝性?xún)r(jià)比超高