Merck血小板裂解液作用原理

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-03-07

Sexton的血小板裂解液的血小板來源于美國(guó)FDA注冊(cè)、AABB認(rèn)證的美國(guó)血庫。單位必須在過期前接受異體輸血。血小板捐獻(xiàn)者接受捐贈(zèng)前進(jìn)行徹底篩查和檢測(cè),以降低輸血傳播ganran的風(fēng)險(xiǎn),根據(jù)21CFR610和AABB血庫和輸血服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。這個(gè)篩查首先是對(duì)捐贈(zèng)者的總體健康狀況進(jìn)行評(píng)估,包括對(duì)捐贈(zèng)者的身體狀況進(jìn)行評(píng)估體溫和高危行為指標(biāo)(如腸外用藥證據(jù))。那么捐贈(zèng)者是誰呢?詢問了一系列問題以確定輸血傳播ganran的風(fēng)險(xiǎn),如旅行史,先前或當(dāng)前疾病,以及描述家庭、同居者和性關(guān)系的病史合伙人。相關(guān)的輸血傳播ganran由美國(guó)FDA鑒定,包括人類ganran免疫缺陷病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV),(變異型)克雅茨費(fèi)爾特-雅各布?。╲CJD/CJD)等。GMP級(jí)人血小板裂解液, 富含各類生長(zhǎng)因子, 是很好的胎牛血清替代物。Merck血小板裂解液作用原理

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在已有的上百篇文獻(xiàn)中,報(bào)道了Sexton公司的Stemulate和nliven已經(jīng)被確定為間充質(zhì)干細(xì)胞MSC的良好生長(zhǎng)補(bǔ)充劑,并且支持各種組織來源包括脂肪、骨髓、軟骨、牙髓和臍帶中的MSCs的擴(kuò)增培養(yǎng)。Sexton公司標(biāo)準(zhǔn)型和PR處理的血小板裂解液始終優(yōu)于輻照胎牛血清,幫助用戶優(yōu)化MSCs的生產(chǎn),用戶通過使用Sexton公司的血小板裂解液培養(yǎng)基生長(zhǎng)劑,降低時(shí)間和花費(fèi)的成本,可帶來更快的倍增時(shí)間。既可以減少潔凈室生產(chǎn)時(shí)間,也可以減少試劑的使用量,實(shí)現(xiàn)總成本的降低。Elitecell血小板裂解液保存溫度血小板裂解液和胎牛血清相比有什么優(yōu)勢(shì)?

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細(xì)胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時(shí)。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補(bǔ)充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細(xì)胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細(xì)胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號(hào)PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號(hào)PL-SUP-500-XF).4.完整細(xì)胞培養(yǎng)基可在4°C下儲(chǔ)存,并穩(wěn)定約4周儲(chǔ)存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標(biāo)簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進(jìn)行長(zhǎng)期儲(chǔ)存)冷凍儲(chǔ)存時(shí)穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREMPrime的重復(fù)凍融循環(huán),因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時(shí),只需預(yù)熱一份完整的細(xì)胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。

為了排除肝素對(duì)于細(xì)胞增長(zhǎng)的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關(guān)。我們對(duì)不添加防腐劑的肝素進(jìn)行了相同實(shí)驗(yàn),結(jié)果對(duì)AT-MSC和BM-MSC細(xì)胞增殖抑制趨勢(shì)相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對(duì)MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時(shí)累積細(xì)胞群體倍增指數(shù)(cPD)較高。CFU-F的塑料粘附生長(zhǎng)性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結(jié)合泊松統(tǒng)計(jì)進(jìn)行CFU-F試驗(yàn),顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時(shí)中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時(shí)明顯降低。這些結(jié)果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報(bào)道的其他研究結(jié)論一致。血小板裂解液的有效成分是什么?

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間充質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞(MSCs)體外擴(kuò)增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn),監(jiān)管機(jī)構(gòu)并不鼓勵(lì)使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應(yīng)或牛病原體ganran的風(fēng)險(xiǎn),有助于增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的擴(kuò)增,也相對(duì)容易地根據(jù)良好的生產(chǎn)規(guī)范程序生產(chǎn),并已用于臨床應(yīng)用,因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴(kuò)增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻(xiàn)1)。血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對(duì)于一般細(xì)胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來說通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來防止凝膠形成,其中肝素很為常用。血小板裂解液不能反復(fù)凍融。進(jìn)口血小板裂解液中國(guó)代理權(quán)

血小板裂解物是由富含血小板的血漿純化萃取而成,其中包含很多不同的細(xì)胞生長(zhǎng)因子。Merck血小板裂解液作用原理

血小板裂解液解凍后請(qǐng)立即進(jìn)行培養(yǎng)基的配制,配置好的培養(yǎng)基在2-8°C環(huán)境下保存并盡快使用,不建議超過21天。如解凍后的原瓶無法全部使用,建議按需分裝成合適的小瓶中進(jìn)行-20°C保存一旦產(chǎn)品瓶或袋經(jīng)過初始解凍過程,建議盡快將產(chǎn)品置于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。盡管對(duì)于儲(chǔ)存在2-8°C的準(zhǔn)備好的含有hPL的培養(yǎng)基,Sexton的內(nèi)部測(cè)試有效期為21天,但建議客戶進(jìn)行內(nèi)部驗(yàn)證研究,以確定其基于血小板裂解液的完整培養(yǎng)基的有效期。使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加劑等變量可能會(huì)縮短或延長(zhǎng)完整培養(yǎng)基產(chǎn)品的有效期。Merck血小板裂解液作用原理

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