蘇州寵物PCR技術在動物疫病檢測的應用

PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復制核酸片段并提高DNA產(chǎn)量的技術，即所謂的聚合酶鏈式反應，這種技術可以在數(shù)小時內大量復制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特異性的特點，PCR技術被應用在寵物疾病分子的診斷上，將從疑似患病寵物（血液、眼鼻分泌物、糞便，尿液或腹水）中采樣的極微量病原(細菌、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本，透過PCR的方式大量被復制，再以核酸電泳的方式判讀結果，從而獲得早期、快速、穩(wěn)定和準確的診斷結果.在寵物醫(yī)療中，目前病毒檢測主要包括膠體金檢測（試紙）和PCR檢測。蘇州寵物PCR技術在動物疫病檢測的應用

巧亦捷核酸檢測一體機有以下幾點優(yōu)勢：1：全自動核酸提取:＜1分鐘的手工操作時間：巧亦捷核酸一體機內部可自動進行封閉式核酸提取，使得整體手工操作時間小于1分鐘，較為小化人為干預帶來的操作誤差，是市面上自動化程度比較高的多重病原體解決方案。2、準確、靈敏的創(chuàng)新核酸檢測針對不同的樣本，可以準確地實現(xiàn)從樣本到結果的判讀，可以處理全血、血清、血漿、糞便、體液、分泌物等各種樣本，實現(xiàn)醫(yī)學界公認的高特異性、高敏感性核酸檢測3、一份樣本多重檢測基于實時熒光定量PCR技術的多種綜合癥檢測系統(tǒng)，一份樣本較為多可以同時檢測多種病原體，這一特性賦予該系統(tǒng)優(yōu)越多樣性的檢測和應用，也便于快速進行多種疾病的同時檢測和管理蘇州便攜式PCR檢測方法巧亦捷核酸檢測一體機的靈敏性和特異性上的優(yōu)勢，像犬貓的呼吸道、消化道和貧血等疾病的診斷和鑒別診斷。

目前市面上有很多PCR儀器，一時間讓獸醫(yī)師無從選擇，但大多數(shù)都是PCR擴增儀，即需要人工進行核酸提取和純化。他們都有以下痛點：1、核酸提取和純化的操作麻煩并且需要專業(yè)的技術人員和場地，有些還需要配置高速離心機，人工核酸提取需要30~40分鐘并容易導致污染。2、人工反復開蓋加入或倒出試劑，容易導致人為和氣溶膠污染，導致結果不準確。因此針對寵物醫(yī)院來說，需要一臺集核酸提取、純化和擴增為一體的全自動核酸檢測儀。能更好的控制人工成本及試劑成本。

巧亦捷（ingeNova）是翊新診斷技術（蘇州）有限公司旗下專注于動物體外診斷檢測的產(chǎn)品品牌，以翊新診斷全資子公司——蘇州翊創(chuàng)生物科技有限公司為主體。巧亦捷系列產(chǎn)品覆蓋了貓呼吸道疫病檢測、貓消化道疫病檢測、犬消化道疫病檢測、寄生蟲等寵物核酸檢測，非洲豬瘟、藍耳等豬病核酸檢測，牛逼支、牛腹瀉等牛羊類食品動物的核酸檢測，人畜共患病核酸檢測，以及魚蝦等水生動物的核酸檢測。全自動薄膜微流控核酸檢測一體機是巧亦捷系列產(chǎn)品的主打檢測平臺，巧亦捷基于此平臺技術致力于為客戶提供快速、精確的動物疫病診斷整體解決方案。翊新診斷技術（蘇州）有限公司由微流控技術領域國際**周朋博士創(chuàng)立。公司依托先進的薄膜微流控技術開發(fā)一體化、智能化的快速、便捷的POCT體外分子診斷解決方案。針對動物疫病的早期診斷，公司以市場需求為出發(fā)點，開發(fā)出了低成本、無污染、能夠實現(xiàn)真正意義上“全自動，全封閉，樣本進，結果出”的薄膜微流控芯片技術和可以用于動物疫病現(xiàn)場快速診斷的分子檢測系統(tǒng)，從而為動物疫病的現(xiàn)場診斷提供更加便利的檢測手段。目前已開發(fā)非洲豬瘟檢測、寵物呼吸道多聯(lián)檢測、寵物消化道多聯(lián)檢測等多種試劑及檢測方案。許多寵物醫(yī)生表示自己在工作中已經(jīng)離不開PCR儀的幫助了。

巧亦捷核酸一體機采用的TaqMan探針法介紹：TaqMan探針法是具有高度特異性的定量PCR技術。它的工作原理是在PCR反應體系中存在一對PCR引物和一條探針，探針的5′端標記有報告基團，3′端標記有熒光淬滅基團，探針只與模板特異結合，其結合位點在兩條引物之間。當探針完整的時候，報告基團的熒光能量被淬滅基團吸收，所以儀器搜集不到信號，隨著反應的進展，Taq酶遇到探針，利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷，導致報告基團的熒光能量不能被淬滅基團吸收，產(chǎn)生了熒光信號，因此信號的強度就代、表了模板DNA的拷貝數(shù)。巧亦捷核酸一體機配套檢測試劑覆蓋動物診療中常見的犬、貓、豬、牛、水產(chǎn)等病原體核酸檢測。蘇州便攜式PCR檢測方法

巧亦捷是翊新診斷全力打造的、服務于動物體外診斷的產(chǎn)品品牌。蘇州寵物PCR技術在動物疫病檢測的應用

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）的作用下，由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應，三個不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術。在反應體系內，以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物，第一步，模板DNA變性，以構成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物，目的基因作為模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性，使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步，模板DNA與引物退火（復性），模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃，引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物結合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP為反應原料半保留復制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環(huán)，2-4分鐘即可完成一個循環(huán)，2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復制到幾百萬倍，從而實現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復制，因此PCR反應具有高度特異性。蘇州寵物PCR技術在動物疫病檢測的應用

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