Recombinant Human MIG/CXCL9

來源: 發(fā)布時間:2024-09-21

EndoH糖苷內(nèi)切酶H在實驗中的特異性和效率通常通過以下幾個方面來確定:1.**特異性識別**:EndoH能夠特異性地識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈,這些糖鏈通常存在于未成熟的糖蛋白中。2.**切割位點**:EndoH識別并切割殼二糖結(jié)構(gòu)中的β-1,4-糖苷鍵連接的甘露糖型結(jié)構(gòu)糖鏈,但不能切割復雜型糖鏈糖蛋白。3.**酶活性測試**:通過使用標準糖蛋白底物進行酶活性測試,可以確定EndoH的活性和效率。4.**純化效果**:EndoH的純度可大于95%,這有助于確保實驗中酶的高效性。5.**比較分析**:與其他去糖基化酶(如PNGaseF)進行比較分析,可以評估EndoH的特異性和效率。6.**應(yīng)用效果**:EndoH用于基于DNA測序的熒光輔助糖電泳(DSA-FACE)分析核糖核酸酶B(ribonucleaseB,RNaseB)的糖基結(jié)構(gòu),可以比較不同酶的糖基切割功能。7.**酶切時間**:EndoH的酶切時間通常為1-3小時,這有助于評估酶的效率。8.**產(chǎn)品信息**:通過查看產(chǎn)品信息,包括產(chǎn)品編號、規(guī)格和目錄價,可以了解EndoH的商業(yè)可用性和應(yīng)用范圍。通過這些方法,研究人員可以確保EndoH在糖鏈分析中的特異性和效率,從而獲得準確的糖鏈結(jié)構(gòu)信息。激發(fā)的泛素被轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶E2的活性位點半胱氨酸殘基上,形成E2-泛素硫酯中間體。Recombinant Human MIG/CXCL9

Recombinant Human MIG/CXCL9,標準物質(zhì)

使用PreScissionProtease進行蛋白質(zhì)切割時,為保證高純度和高活性,需要考慮以下關(guān)鍵因素:1.**特異性切割位點**:確保融合蛋白中包含PreScissionProtease特異性識別的序列,以實現(xiàn)精確切割。2.**酶與底物的比例**:適當比例的酶量對于高效切割至關(guān)重要,過多或過少的酶都可能影響切割效率和純度。3.**反應(yīng)條件**:包括溫度、pH和反應(yīng)時間等,這些條件需要優(yōu)化以確保酶的活性和選擇性。通常,PreScissionProtease在4°C下進行酶切。4.**緩沖液兼容性**:使用與PreScissionProtease兼容的緩沖液,避免使用可能抑制酶活性的離子或化學物質(zhì)。5.**蛋白濃度**:確保融合蛋白有足夠的濃度,以提高切割效率和減少樣品損失。6.**酶切后的分離**:切割后,需要有效分離目的蛋白和切割下來的標簽,通常利用親和層析等方法。7.**避免蛋白降解**:在實驗過程中添加蛋白酶抑制劑,以防止蛋白降解酶對目的蛋白的降解。8.**避免蛋白質(zhì)聚集**:在切割過程中,應(yīng)避免條件導致蛋白質(zhì)聚集或沉淀,這可能會影響純度和活性。9.**避免氧化**:在蛋白質(zhì)處理過程中,添加抗氧化劑如DTT或TCEP,以防止半胱氨酸殘基的氧化。10.**清潔的實驗環(huán)境**:確保實驗器材和環(huán)境的清潔,避免微生物污染和核酸污染。Recombinant Human BD-5通過SDS-PAGE、Western blot、質(zhì)譜等方法驗證蛋白的純度和分子量。通過活性測試評估蛋白的生物活性。

Recombinant Human MIG/CXCL9,標準物質(zhì)

重組Exendin-4是一種基于Exendin-4的重組蛋白,Exendin-4是一種從墨西哥蜥蜴(Gilamonster)的毒液中分離出來的39個氨基酸的多肽。它與胰高的血糖素樣肽-1(GLP-1)具有53%的序列同源性,并與相同的膜受體相互作用。重組Exendin-4在體內(nèi)增強依賴葡萄糖的胰島素分泌,抑制不適當?shù)母咭雀叩难撬胤置?,并減慢胃排空。它還在體外和動物模型中促進β細胞增殖和新生。重組Exendin-4是通過大腸桿菌表達的合成DNA序列編碼的39個氨基酸的Exendin-4。重組Exendin-4的特點包括:-分子量約為4.2kDa,是一個非糖基化的單一多肽鏈,包含39個氨基酸。-具有調(diào)節(jié)血糖水平、減少胰島素抵抗、降低胰高的血糖素、降低糖化血紅蛋白(HbA1c)和刺激β細胞生長以促進胰島素產(chǎn)生等多種生物活性。-通常以凍干粉的形式提供,需要在無菌條件下用無菌蒸餾水或含有0.1%BSA的水溶液復溶。-純度高于96%,通過SDS-PAGE和HPLC分析確定。-內(nèi)毒的素含量低于10EU/mg,通過LAL方法測定。在實驗中,可以通過以下方法來優(yōu)化重組Exendin-4的熒光特性:1.選擇合適的激發(fā)和發(fā)射波長。2.優(yōu)化激發(fā)和發(fā)射濾光片。3.評估熒光量子產(chǎn)率。4.調(diào)整緩沖液條件,包括pH值和離子強度。5.控制溫度和氧濃度。

NLS-Cas9-EGFPNuclease是一種融合蛋白,由Cas9核酸酶、核定位信號(NLS)和EGFP(綠色熒光蛋白)組成。這種融合蛋白的特點和科研應(yīng)用如下:**特點:**1.**無DNA污染**:系統(tǒng)不添加外部DNA,降低了外源DNA污染的風險。2.**高切割效率**:NLS確保Cas9蛋白能夠高效地進入細胞核,從而提高DNA切割效率。3.**低脫靶效應(yīng)**:由于Cas9核酸酶的瞬時表達,減少了在非目標位點切割的可能性。4.**節(jié)省時間**:與需要轉(zhuǎn)錄和翻譯的mRNA或質(zhì)粒系統(tǒng)相比,NLS-Cas9-EGFPNuclease可以直接進入細胞核,無需等待轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。5.**EGFP標簽**:EGFP作為報告基因,可用于追蹤或分選轉(zhuǎn)染細胞,便于通過熒光激起細胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細胞群,減少單細胞克隆和基因分型的勞動和成本。**科研應(yīng)用:**1.**體外DNA切割篩選**:可以用于篩選高效和特異性靶向的gRNA,通過體外DNA切割實驗來驗證gRNA的效率和特異性。2.**體內(nèi)基因編輯**:與特定的gRNA結(jié)合后,可以通過電穿孔或注射的方式進行體內(nèi)基因編輯。3.**細胞追蹤和分選**:利用EGFP熒光標記,可以追蹤轉(zhuǎn)染細胞并進行分選,這對于研究基因編輯后的細胞群體特別有用。

多泛素化的靶蛋白被26S蛋白酶體識別。26S蛋白酶體由一個20S顆粒和兩個19S調(diào)節(jié)顆粒組成。

Recombinant Human MIG/CXCL9,標準物質(zhì)

大腸桿菌表達的重組抑肽酶(Aprotinin)是一種通過基因工程技術(shù)在大腸桿菌中生產(chǎn)的蛋白酶抑制劑,具有以下特性和應(yīng)用:1.**來源**:重組抑肽酶是通過大腸桿菌(E.coli)表達系統(tǒng)生產(chǎn)的,確保了無動物源性成分,減少了病毒污染的風險。2.**結(jié)構(gòu)**:它是一種單體球狀蛋白,由58個氨基酸組成,具有三個交聯(lián)二硫鍵的單個多肽鏈。3.**功能**:作為一種競爭性、可逆的絲氨酸蛋白酶抑制劑,重組抑肽酶能夠抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、激肽釋放酶和血纖維蛋白溶酶等的活性。4.**應(yīng)用**:在生物技術(shù)過程中,重組抑肽酶可以替代動物源性抑肽酶,用于重組蛋白生產(chǎn)中抑制絲氨酸蛋白酶的活性,以及在細胞培養(yǎng)等過程中。5.**產(chǎn)品信息**:通常以粉末形式提供,具有明確的貨號和規(guī)格,如1mg或10mg的包裝。6.**產(chǎn)品性質(zhì)**:包括外觀、溶解度、純度、蛋白含量、酶濃度和活性定義等詳細參數(shù)。7.**儲存條件**:凍干粉在2~8℃保存,有效期為2年。8.**使用方法**:推薦的結(jié)合pH>6.0,在pH<3.0的條件下不結(jié)合,可直接使用0.9%NaCl溶解,溶解后可-20℃儲存。9.**注意事項**:產(chǎn)品作科研用途,操作時需穿著實驗服并佩戴一次性手套。在基因編輯中,Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或編輯工具的克隆,減少克隆過程中的非目標突變。Recombinant Mouse BID Protein,His Tag

Phusion DNA Polymerase 應(yīng)在后面加入反應(yīng)體系中,以避免其3'-5'外切酶活性降解引物。Recombinant Human MIG/CXCL9

在蛋白質(zhì)糖基化分析中,除了N-糖苷酶F(PNGaseF),還有其他幾種酶也發(fā)揮著重要作用,具有各自的優(yōu)勢:1.**EndoH糖苷內(nèi)切酶H**:這種酶可以水解高甘露糖型N-連接糖鏈,通常用于區(qū)分高甘露糖型和復雜型糖鏈。2.**EndoS糖苷內(nèi)切酶S**:EndoS能夠從IgG重鏈的殼二糖結(jié)構(gòu)之間切除N-連接糖,有助于分析抗體的糖基化模式。3.**FastPNGaseF**:這是一種經(jīng)過優(yōu)化的PNGaseF,能在數(shù)分鐘內(nèi)對抗體、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白進行徹底和快速的去糖基化,簡化了實驗流程,同時保持了靈敏度和重復性。4.**O-糖苷酶O-glycosidase**:用于去除O-連接的糖鏈,這對于O-糖基化蛋白質(zhì)的分析至關(guān)重要。5.**三氟甲基磺酸(TFMS)法**:這是一種化學去糖基化方法,可以用于釋放糖鏈,尤其在某些難以使用酶法去除糖鏈的情況下。6.**質(zhì)譜法**:雖然不是酶,但質(zhì)譜法是分析糖鏈結(jié)構(gòu)的強大工具,可以結(jié)合酶法或化學法釋放的糖鏈進行詳細分析。7.**核磁共振法(NMR)**:NMR技術(shù)可以確定糖鏈的構(gòu)型、連接位置、分支和微觀多樣性,是糖鏈立體化學結(jié)構(gòu)分析的重要方法。這些酶和方法各有優(yōu)勢,可以根據(jù)實驗的具體需求和糖基化類型的不同進行選擇,以獲得比較好的分析結(jié)果。

Recombinant Human MIG/CXCL9