北京Ham's F12培養(yǎng)基價(jià)格

    本發(fā)明涉及植物**培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種植物**培養(yǎng)基。背景技術(shù)：ms培養(yǎng)基于1962年由murashige和skoog設(shè)計(jì)，是目前植物**培養(yǎng)中應(yīng)用**為***的培養(yǎng)基。據(jù)《危險(xiǎn)化學(xué)品安全管理?xiàng)l例》(***令第591號(hào))、《民用物品安全管理?xiàng)l例》及《易制爆危險(xiǎn)化學(xué)品名錄》(2017年版)可知，ms培養(yǎng)基的主要成分硝酸鉀、硝酸銨均為易制爆管制試劑，隨著**監(jiān)管越發(fā)嚴(yán)格，所有易制爆試劑的購(gòu)買(mǎi)、儲(chǔ)存及使用變得越來(lái)越困難，尤其是兼有硝態(tài)氮和銨態(tài)氮的硝酸銨，其純品被禁止市場(chǎng)流通，為植物**培養(yǎng)帶來(lái)很大難度。b5培養(yǎng)基于1968年由gamborg等為培養(yǎng)大豆根細(xì)胞而設(shè)計(jì)，n6培養(yǎng)基于1974年由朱至清等為水稻等禾谷類(lèi)作物花*培養(yǎng)而設(shè)計(jì)，兩者均由ms培養(yǎng)基衍生而來(lái)，在有些植物**培養(yǎng)研究中***應(yīng)用，雖然b5和n6培養(yǎng)基除了硝酸鉀外不含其他易制爆成分，但兩者中的鈣離子和鎂離子含量均大幅降低，且b5培養(yǎng)基中銨離子大幅減少、n6培養(yǎng)基中鉀離子大幅增加，這些離子濃度的大幅波動(dòng)對(duì)一些植物的**培養(yǎng)是不利的。cna草莓增殖培養(yǎng)基公開(kāi)了一種無(wú)硝酸銨培養(yǎng)基，但其硝酸鉀及**銨含量過(guò)高，*適用于草莓**培養(yǎng)；cna一種草莓**培養(yǎng)基及其配制方法公開(kāi)了一種無(wú)硝酸銨培養(yǎng)基，在草莓**培養(yǎng)中取得很好的效果。DMEM培養(yǎng)基適用于多種類(lèi)型的哺乳動(dòng)物細(xì)胞。北京Ham's F12培養(yǎng)基價(jià)格

    培養(yǎng)實(shí)例2：蘭茲貝格型擬南芥無(wú)菌植株培養(yǎng)培養(yǎng)實(shí)例2與培養(yǎng)實(shí)例1不同的地方在于：步驟(1)所用種子為蘭茲貝格(ler,landsbergerecta)型擬南芥種子，蘭茲貝格擬南芥較哥倫比亞擬南芥具有更早的花期，在適宜條件下培養(yǎng)，可以獲得處于各發(fā)育時(shí)期的擬南芥無(wú)菌***，包括根、胚軸、葉柄、子葉、蓮座葉、莖、花、角果等，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例1。1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)28d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為，蓮座葉發(fā)達(dá)、平均**大蓮座葉長(zhǎng)為，葉色濃綠，根系粗壯、平均主根長(zhǎng)為，花序含有較多花朵，花粉形態(tài)和活力均正常、平均有活力的花粉為％。如圖2所示。對(duì)比培養(yǎng)例2：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例2，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)28d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為，蓮座葉發(fā)達(dá)、平均**大蓮座葉長(zhǎng)為，葉色濃綠，根系粗壯、平均主根長(zhǎng)為，花序發(fā)育良好，花粉形態(tài)和活力均正常、平均有活力的花粉為％。如圖2所示。寧夏減血清培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)F12培養(yǎng)基在細(xì)胞分化研究中表現(xiàn)優(yōu)越。

    所描述的實(shí)施例**是本申請(qǐng)一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本申請(qǐng)中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加，然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，2-羥基乙胺40mg/l，cecl310mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a；所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸5g/l，尿素2g/l，殼聚糖80mg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b；采用常規(guī)發(fā)酵工藝：將黃色短桿菌gdk-9按8％接種量將種子液（od600nm為）接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)24h，然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h，收集發(fā)酵液；整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，控制發(fā)酵溫度35℃，通風(fēng)比1∶，攪拌轉(zhuǎn)速300r/min，溶氧維持在20％。

    在s3中，將s2中消毒的外植體接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為ms+，誘導(dǎo)培養(yǎng)基的ph值為，在s4中，將s3中的無(wú)菌外植體轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)基的配方為ms+～～，增殖培養(yǎng)基的ph值為，在s5中，將s4中的繡球組培苗放入生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)基的配方為1/2ms+～～，生根培養(yǎng)基ph值為。通過(guò)采用上述技術(shù)方案，通過(guò)液體**培養(yǎng)技術(shù)，以芽為原材料，獲取方便，增殖倍率高達(dá)8～10倍，生根率達(dá)到95％以上，苗木規(guī)格整齊，性狀保持穩(wěn)定，同時(shí)節(jié)省成本，適合工廠(chǎng)化大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)量繡球種苗。誘導(dǎo)培養(yǎng)基萌芽率能達(dá)到90％，可以成功建立無(wú)菌再生體系。使用本增殖培養(yǎng)基，繡球組培苗增殖倍率能夠達(dá)到8～10倍，組培苗高度一致，生長(zhǎng)健壯。使用本生根培養(yǎng)基，繡球組培苗生根率能夠達(dá)到95％，根系發(fā)達(dá)，健壯，可以成功用于移栽大棚。本發(fā)明在一較佳示例中可以進(jìn)一步配置為：在s3中，將s2中消毒的外植體接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中后的培養(yǎng)環(huán)境為在光照強(qiáng)度1500lux條件下，溫度25℃，光照時(shí)間16h；黑暗條件下，溫度23℃，光照時(shí)間8h，培養(yǎng)6～8周。通過(guò)采用上述技術(shù)方案，在該培養(yǎng)條件下能夠有效避免誘導(dǎo)培養(yǎng)階段植物材料出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)，植物材料能夠快速適應(yīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基。F12培養(yǎng)基在細(xì)胞分化和基因表達(dá)研究中有重要應(yīng)用。

    培養(yǎng)實(shí)例7和對(duì)比培養(yǎng)例7的誘導(dǎo)結(jié)果比較：：用上述方法進(jìn)行水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)時(shí)，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的愈傷**形態(tài)大小均相近，出愈率均為100％。如圖7所示。培養(yǎng)實(shí)例8：液體培養(yǎng)基在植物水培中的應(yīng)用(1)用不同ph的超純水配制的液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較：a、用不同ph的超純水配制液體培養(yǎng)基：通常多種因素會(huì)導(dǎo)致相同超純水制水機(jī)產(chǎn)出的超純水ph變動(dòng)較大，ph通常為。分別選取ph為、、、、、，分別配制ms液體培養(yǎng)基、cs液體培養(yǎng)基、1/2ms液體培養(yǎng)基、1/2cs液體培養(yǎng)基，制作方法為：ms液體培養(yǎng)基為取ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l；cs液體培養(yǎng)基為取cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l；1/2ms液體培養(yǎng)基為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l；1/2cs液體培養(yǎng)基為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l。b、結(jié)果為：用ph為，ms液體培養(yǎng)基ph為，cs液體培養(yǎng)基ph為，1/2ms液體培養(yǎng)基ph為，1/2cs液體培養(yǎng)基ph為。植物**適宜生長(zhǎng)的ph一般為，觀(guān)察可知，ms液體培養(yǎng)基及1/2ms液體培養(yǎng)基的ph偏酸性且波動(dòng)較大，其應(yīng)用于液體培養(yǎng)基時(shí)通常需要調(diào)節(jié)ph，過(guò)程繁瑣，相比之下。無(wú)酚紅培養(yǎng)基適用于對(duì)酚紅敏感的實(shí)驗(yàn)設(shè)置。湖南DMEM/F12培養(yǎng)基聯(lián)系方式

F12培養(yǎng)基在生物醫(yī)學(xué)研究中表現(xiàn)出優(yōu)越的性能。北京Ham's F12培養(yǎng)基價(jià)格

    因?yàn)榻鈨鰰r(shí)可能會(huì)有營(yíng)養(yǎng)成份析出，影響培養(yǎng)效果。正常情況下于2~8℃避光保存，使用前從冰箱取出，放入室溫進(jìn)行平衡。通常的液體培養(yǎng)基有效期是6個(gè)月到12個(gè)月。液體細(xì)胞培養(yǎng)基盡量避免長(zhǎng)期貯存，其中的谷氨酰胺會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)而慢慢分解，如果細(xì)胞生長(zhǎng)不良，可考慮檢測(cè)培養(yǎng)基中的谷氨酰胺含量確定是否再補(bǔ)加谷氨酰胺。市售商業(yè)化液體細(xì)胞培養(yǎng)基有具體的有效期，對(duì)于使用干粉細(xì)胞培養(yǎng)基自行配制成液體以后，也應(yīng)低溫（2~8℃）貯存。除培養(yǎng)基中如谷氨酰胺易降解之外，培養(yǎng)基中的其他成份隨著溫度的升高也可能會(huì)發(fā)生降解或是析出。5.細(xì)胞培養(yǎng)基使用過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題分析由于大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH為，偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不完全相同，原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受力差，無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。因此，原代培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中的緩沖系統(tǒng)就顯得較為重要。一般的細(xì)胞培養(yǎng)基采用的都是平衡鹽系統(tǒng)，但不同的培養(yǎng)基或是同一系列的培養(yǎng)基所用平衡鹽系統(tǒng)不同，如199系列、MEM系列均有Hanks’系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle’s系統(tǒng)的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基不是上述常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng)，例如RPMI1640培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基。北京Ham's F12培養(yǎng)基價(jià)格