江蘇DMEM高糖培養(yǎng)基哪家便宜

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-08-21

    從而提高菌株增殖速率,但是濃度過(guò)大會(huì)導(dǎo)致抑菌現(xiàn)象,后期菌株增殖放緩,以產(chǎn)酸為主,2-羥基乙胺還能夠作為陽(yáng)離子表面活性劑,使得細(xì)胞壁疏松,提高細(xì)胞通透性,促進(jìn)谷氨酸釋放到發(fā)酵液,從而提高了谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率。三、通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)確定cecl3添加量為10mg/l、2-羥基乙胺的添加量40mg/l,在此基礎(chǔ)上,研究發(fā)酵培養(yǎng)基b對(duì)菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。對(duì)照組1采用發(fā)酵培養(yǎng)基a進(jìn)行發(fā)酵,不采用發(fā)酵培養(yǎng)基b,100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基a;發(fā)酵工藝參照實(shí)施例1。對(duì)照組2:發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加琥珀酸,其余同實(shí)施例1。對(duì)照組3:發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加殼聚糖,其余同實(shí)施例1。對(duì)照組4:發(fā)酵培養(yǎng)基a中添加5g/l的琥珀酸,其余同對(duì)照組1。實(shí)驗(yàn)組為實(shí)施例1。具體結(jié)果見(jiàn)表1。表1組別菌濃度od600nm谷氨酸產(chǎn)量g/l糖酸轉(zhuǎn)化率%對(duì)照組:對(duì)照組1采用單一發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵,谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率明顯低于實(shí)驗(yàn)組,各組別菌體濃度差異并不大;對(duì)照組4在對(duì)照組1的基礎(chǔ)上添加了琥珀酸,對(duì)菌體濃度并沒(méi)有影響,谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率也沒(méi)有明顯差異,可能原因是,發(fā)酵前期以菌體增殖為主,產(chǎn)酸較少,琥珀酸對(duì)菌體增殖并沒(méi)有明顯的刺激作用。無(wú)血清培養(yǎng)基提供了純凈的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境。江蘇DMEM高糖培養(yǎng)基哪家便宜

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    C)大腸埃希菌++--產(chǎn)氣腸桿菌--++志賀菌屬-+--沙門(mén)菌屬-+-+表硫化氫和尿素酶試驗(yàn)對(duì)腸桿菌屬的鑒別試驗(yàn)傷寒沙門(mén)菌甲型副傷寒沙門(mén)菌變形桿菌志賀菌屬大腸埃希菌克雷伯菌屬硫化氫試驗(yàn)-/+++++++---尿素酶試驗(yàn)--+--+乳糖發(fā)酵試驗(yàn)----++在培養(yǎng)基中加入指示劑或某種化學(xué)物質(zhì)**不需要的**生長(zhǎng),利于需要的**分離,這種培養(yǎng)基稱為選擇性培養(yǎng)基。常用的抑菌劑有膽鹽、煌綠、玫瑰紅鈉、亞硒酸鈉等。常用的指示荊有溴甲酚紫、溴麝香草酚藍(lán)等。美藍(lán)是氧化還原指示劑。例如,在培養(yǎng)基內(nèi)加入青霉素可**革蘭陽(yáng)性**,而利于革蘭陰性**的生長(zhǎng);如果加入鏈霉素,則可獲得與加青霉素相反的選擇效果;加入制霉素可*****,有利于**的分離。又如亞**鉍瓊脂,既能**革蘭陽(yáng)性**生長(zhǎng),又能**許多革蘭陰性**生長(zhǎng),但傷寒沙門(mén)菌卻能在這個(gè)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)出具有棕色環(huán)的菌落。SS瓊脂是臨床**檢驗(yàn)中一種常用的選擇性培養(yǎng)基。大腸埃希菌在SS培養(yǎng)基上,因發(fā)酵乳糖而產(chǎn)酸,使指示劑中性紅變深,并使膽鹽沉淀,所以菌落紅色而不透明。沙門(mén)菌分解含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫,硫化氫與枸櫞酸鐵形成硫化鐵,所以菌落中心呈黑色。痢疾志賀菌,既不發(fā)酵乳糖也不產(chǎn)生硫化氧。廣東基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)口無(wú)血清培養(yǎng)基適用于需要無(wú)血清環(huán)境的細(xì)胞。

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    **早開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimalessentialmedium,MEM),其本質(zhì)為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營(yíng)養(yǎng)物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎(chǔ)上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細(xì)胞培養(yǎng)基被不斷開(kāi)發(fā)出來(lái)。常用合成培養(yǎng)基的配方此處不詳細(xì)介紹,其特性及應(yīng)用的范圍見(jiàn)表1-2。表1-2常用合成培養(yǎng)基的特性及應(yīng)用的范圍培養(yǎng)基名稱特性及應(yīng)用范圍199細(xì)胞培養(yǎng)基添加適量的血清后,可***用于多種細(xì)胞培養(yǎng),并用于**學(xué)、*苗生產(chǎn)等。MEM細(xì)胞培養(yǎng)基MEM(MinimalEssentialMedium)培養(yǎng)基有含Earle's平衡鹽的類型,也有含Hanks'平衡鹽的類型;有高壓**型的,也有過(guò)濾**型的;還有含非必需氨基酸的類型。是**基本、適用范圍**廣的細(xì)胞培養(yǎng)基。DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種類型。細(xì)胞生長(zhǎng)快。附著稍差的腫*細(xì)胞、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好,常用于雜交*的骨髓*細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)。IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基礎(chǔ)上改良,增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等??捎糜陔s交*細(xì)胞培養(yǎng)。

    三)、試驗(yàn)結(jié)果:初代培養(yǎng):使用本發(fā)明的消毒方法,消毒成功率能達(dá)到80%,誘導(dǎo)培養(yǎng)基萌芽率能達(dá)到90%,可以成功建立無(wú)菌再生體系。繼代培養(yǎng):使用本發(fā)明的增殖培養(yǎng)基,繡球組培苗增殖倍率能夠達(dá)到8~10倍,組培苗高度一致,生長(zhǎng)健壯。生根培養(yǎng):使用本發(fā)明的生根培養(yǎng)基,繡球組培苗生根率能夠達(dá)到95%,根系發(fā)達(dá),健壯,可以成功用于移栽大棚。本發(fā)明所指ms培養(yǎng)基是murashige和skoog研制的培養(yǎng)基,其成分配方表見(jiàn)表1。1/2ms培養(yǎng)基是指大量元素含量為ms培養(yǎng)基的一半,其他成分用量相同。表1、ms培養(yǎng)基成分表本發(fā)明涉及的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑有:6-ba—6-芐氨基嘌呤;ga3—赤霉素;iba—吲哚丁酸,naa—萘乙酸。本發(fā)明中的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基均為液體培養(yǎng)基。本具體實(shí)施方式的實(shí)施例均為本發(fā)明的較佳實(shí)施例,并非依此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍,故:凡依本發(fā)明的結(jié)構(gòu)、形狀、原理所做的等效變化,均應(yīng)涵蓋于本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。減血清培養(yǎng)基減少了實(shí)驗(yàn)中血清帶來(lái)的變異性。

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    1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:中雙11號(hào)油菜種子在1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100%,培養(yǎng)9d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為,葉色濃綠,莖稈粗壯、平均莖中粗為,根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為(>)、平均主根長(zhǎng)為。如圖3所示。培養(yǎng)實(shí)例3和對(duì)比培養(yǎng)例3的培養(yǎng)結(jié)果比較:中雙11號(hào)油菜種子在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基和1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100%;在相同條件下培養(yǎng)9d時(shí),與1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基相比,1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基中的幼苗長(zhǎng)勢(shì)更佳,其株高、根的數(shù)目?jī)?yōu)于1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基,莖粗及平均主根長(zhǎng)度與1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基相近。如圖3所示。培養(yǎng)實(shí)例4:馬鈴薯無(wú)菌苗培養(yǎng)生長(zhǎng)培養(yǎng)基配制:1/2cs基本培養(yǎng)基+蔗糖30g/l+植物凝膠8g/l,用超純水溶解,。1/2cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。培養(yǎng)方法:以克新18號(hào)馬鈴薯為例,將配制好的1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基分裝于長(zhǎng)、寬、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中,選擇生長(zhǎng)旺盛的馬鈴薯脫毒苗,于無(wú)菌環(huán)境下,根據(jù)實(shí)際需要,用手術(shù)剪刀剪取約1cm長(zhǎng)的至少帶有1個(gè)葉芽的莖端或莖段,用彎頭鑷子將其1/3-1/2長(zhǎng)度垂直插入培養(yǎng)基中;于溫度22-23℃、濕度50-70%、光照強(qiáng)度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時(shí)間14h、黑暗時(shí)間10h)條件下培養(yǎng)。MEM培養(yǎng)基適合多種類型的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。重慶減血清培養(yǎng)基價(jià)格查詢

MEM培養(yǎng)基提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)成分,支持細(xì)胞的快速增殖。江蘇DMEM高糖培養(yǎng)基哪家便宜

    1)、初代培養(yǎng):繡球外植體,將葉片剪去,自來(lái)水沖洗干凈。在超凈工作臺(tái)上把已經(jīng)沖洗干凈的外植體浸入75%酒精中消毒30s,用無(wú)菌水沖洗3~4次。使用白貓漂白水和無(wú)菌水按1:4的體積比配制消毒液,將外植體放入消毒液浸泡40min,其中白貓漂白水為上海白貓(集團(tuán))有限公司生產(chǎn)的“白貓”牌家用漂白水。消毒完成,將外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng),建立無(wú)菌再生系統(tǒng),誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,溫度25℃,光照時(shí)間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時(shí)間8h,培養(yǎng)6~8周。其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基為ms+~~,誘導(dǎo)培養(yǎng)基的ph值為。(2)、繼代培養(yǎng):以建立的無(wú)菌再生系統(tǒng)為對(duì)象,將無(wú)菌外植體轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基,其中增殖培養(yǎng)基為ms+~~,培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,溫度25℃,光照時(shí)間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時(shí)間8h,培養(yǎng)8~12周。每隔8~12周轉(zhuǎn)接入新的增殖培養(yǎng)基,增殖培養(yǎng)基的ph值為。(3)、生根培養(yǎng):經(jīng)過(guò)繼代培養(yǎng)的繡球組培苗,取2~3cm的頂芽,放入生根培養(yǎng)基,其中生根培養(yǎng)基為1/2ms+~~,生根培養(yǎng)基的ph值為。誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,溫度25℃,光照時(shí)間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時(shí)間8h,培養(yǎng)8~12周。。江蘇DMEM高糖培養(yǎng)基哪家便宜