光學(xué)顯微鏡從1590年發(fā)明以來,不斷發(fā)展,促進(jìn)生命科學(xué)日新月異的發(fā)現(xiàn),幫助人類逐層打開生命本質(zhì)的大門。同時(shí),生命科學(xué)的發(fā)展不斷給光學(xué)顯微鏡提出新的要求,促使成像理論和技術(shù)持續(xù)更新迭代??茖W(xué)進(jìn)入21世紀(jì),人們已經(jīng)不滿足于在體外研究細(xì)胞和組織,需要能夠更真實(shí)地探索生命,在體內(nèi)實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞的發(fā)生和變化。此時(shí),雙光子顯微鏡進(jìn)入了科學(xué)家的視野。在高光子密度的情況下,熒光分子可以同時(shí)吸收兩個(gè)長波長的光子,然后發(fā)射出一個(gè)波長較短的光子,其效果和使用一個(gè)波長為長波長一半的光子去激發(fā)熒光分子是相同的(圖1)。如煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH),在單光子激發(fā)時(shí),在波長為350nm光的激發(fā)下發(fā)出450nm熒光;而在雙光子激發(fā)時(shí),可采用700nm的激發(fā)光得到450nm熒光。上海雙光子顯微鏡就找因斯蔻浦。國內(nèi)熒光雙光子顯微鏡代理商
從雙光子的原理和特點(diǎn),我們可以清楚地得出雙光子的優(yōu)點(diǎn):☆光損傷小:由于雙光子顯微鏡采用可見光或近紅外光作為激發(fā)光源,因此該波段的光對細(xì)胞和組織的光損傷很小,適合長期研究;☆穿透能力強(qiáng):與紫外光相比,可見光和近紅外光的穿透能力更強(qiáng),因此受生物組織散射的影響更小,解決了生物組織深層物質(zhì)的層析成像問題;☆高分辨率:由于雙光子吸收的截面很小,只能在焦平面很小的區(qū)域激發(fā)熒光,雙光子吸收被限制在焦點(diǎn)處體積約為波長三次方的范圍內(nèi);☆漂白區(qū)域小:由于激發(fā)只存在于交點(diǎn)處,焦點(diǎn)外的區(qū)域不會發(fā)生光漂白;☆熒光收集率高:與共焦成像相比,雙光子成像不需要濾光片(共焦),提高了熒光收集率,直接導(dǎo)致圖像對比度的提高;☆圖像對比度高:由于熒光波長小于入射波長,瑞利散射產(chǎn)生的背景噪聲*為單光子激發(fā)產(chǎn)生的1/16,減少了散射的干擾;光子躍遷具有很強(qiáng)的選擇性激發(fā),因此可以用來對生物組織中的一些特殊物質(zhì)進(jìn)行成像;熒光激光雙光子顯微鏡多少錢雙光子顯微鏡供應(yīng)商找因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司。
通過對顯微光學(xué)系統(tǒng)的重新設(shè)計(jì),將FHIRM-TPM2.0的成像視場擴(kuò)展至420×420平方微米,顯微物鏡的工作距離擴(kuò)展至1mm,實(shí)現(xiàn)無創(chuàng)成像。嵌入可拆卸的快速軸向掃描模塊,實(shí)現(xiàn)深度180微米的三維體成像和多平面快速切換的實(shí)時(shí)成像。該模塊由一個(gè)快速電動變焦鏡頭和一對中繼鏡頭組成,在不同深度成像時(shí)保持放大率恒定。其中,變焦模塊重1.8克,科研人員可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求自由拆卸。此外,新型微型成像探頭可以瞬間插拔,極大簡化了實(shí)驗(yàn)操作,避免了長時(shí)間實(shí)驗(yàn)對動物的干擾。反復(fù)裝卸探針追蹤同批神經(jīng)元時(shí),視場旋轉(zhuǎn)角度小于0.07弧度,邊界偏差小于35微米。
2020年12月22日,臨研所、病理科和科研處邀請北京大學(xué)王愛民副教授做了題目為“新一代微型雙光子顯微成像系統(tǒng)介紹及其在臨床醫(yī)療診斷”的學(xué)術(shù)報(bào)告。學(xué)術(shù)報(bào)告由臨研所醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究平臺潘琳老師主持。王愛民,北京大學(xué)信息科學(xué)技術(shù)學(xué)院副教授,畢業(yè)于北京大學(xué)物理系,獲學(xué)士、碩士學(xué)位,后于英國巴斯大學(xué)物理系獲博士學(xué)位。該研究組研發(fā)的微型雙光子顯微鏡,第1次在國際上獲得了小鼠大腦神經(jīng)元和神經(jīng)突觸清晰穩(wěn)定的動態(tài)信號,該成果獲得了2017年度“中國光學(xué)進(jìn)展”和“中國科學(xué)進(jìn)展”,并被NatureMethods評為2018年度“年度方法--無限制行為動物成像”。目前,該研究組正在研究新一代雙光子顯微成像技術(shù)在臨床診斷中的應(yīng)用,為未來即時(shí)病理、離體組織檢測、術(shù)中診斷等提供新的影像手段和分析方法。雙光子顯微鏡在生物醫(yī)學(xué)研究中有廣泛的應(yīng)用,可以觀察細(xì)胞內(nèi)的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)分布、細(xì)胞活動等。
光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡本質(zhì)的區(qū)別在于,光學(xué)顯微鏡:用的是可見光電子顯微鏡:用的是高頻電子射波有什么區(qū)別,在于一個(gè)基本的原理,光的衍射。。。光波是一個(gè)有趣的東西,其中有一項(xiàng),如果物體的體積小于光的波長,光一般可以繞過去,不發(fā)生明顯變化。也就是說,有這個(gè)物體和沒這個(gè)物體,在這種情況下,光是不會發(fā)生明顯改變的??梢姽獾牟ㄩL(肉眼):380~780納米,也就是,如果比380納米還要小的東西,用光學(xué)顯微鏡,無論你放大多少倍,也是看不見的。因?yàn)楣饫@過去了。。。光的衍射為了克服這個(gè)問題,科學(xué)家用波長更短的光去照射物體,也是就被觀測物。比如10納米級的光,這樣,就能看到我們用肉眼無論如何都看不見的東西。這就是電子顯微鏡多說一句,光速是不變的。光速=頻率×波長。波長越短,頻率越大。。頻率越大,光波的能量越大。這就是為什么電子顯微鏡的功率越大,能看到的東西越小。顏色取決于物體能反射光的波長的長短當(dāng)你看到的物體小于較小可見光的波長,那它就是沒有顏色的。。。因?yàn)轭伾侨庋蹖τ诳梢姽忸l率在大腦中的投影。。。。所以只能把他們統(tǒng)一變?yōu)楹诎?。。。沒有顏色不是透明的意思,它們不是肉眼可見顏色的定義中包含的。雙光子顯微鏡型號有哪些?美國熒光雙光子顯微鏡成像視野
雙光子顯微鏡成像技術(shù)及不同轉(zhuǎn)基因小鼠開展對多種臟器的成像研究。國內(nèi)熒光雙光子顯微鏡代理商
Itrytoexplainwhytwo-photonmicroscopyhasadeeperimagingdepththanone-photonmicroscopy,intheareaofbiomedicalimaging.Manyofthebiomedicalimagingmodalities,nomatterone-photon(confocal)ormulti-photon(two-photon),uselasersaslightsourceandrequirecompatiblefluorescentdyes.Fluorescentdyeshavetheirownexcitationwavelength,andtheycaneitherbeexcitedbyasinglephotonwiththephotonenergyofthatexcitationwavelength(E=hv=h*c/λ);orbytwophotons,arrivingalmostatthesametime,buteachwithapproximatelyhalfoftheenergy,henceofdoublewavelengththanone-photon(0.5E->2λ).Theformeristheprincipleofone-photonmicroscopyandthelatteristheprincipleoftwo-photonmicroscopy.Whenimagingthesamefluorescentdye,sincetwo-photoncoulduseapproximatelydoubledwavelengthcomparedwithsingle-photon,two-photoncanobviouslypenetrateddeeperintothetissueduetolessscattering(longerwavelength,lessscattering).國內(nèi)熒光雙光子顯微鏡代理商