對于雙光子(2P)成像而言,離焦和近表面熒光激發(fā)是兩個比較大的深度限制因素,而對于三光子(3P)成像這兩個問題大大減小,但是三光子成像由于熒光團的吸收截面比2P要小得多,所以需要更高數(shù)量級的脈沖能量才能獲得與2P激發(fā)的相同強度的熒光信號。功能性3P顯微鏡比結構性3P顯微鏡的要求更高,它需要更快速的掃描,以便及時采樣神經(jīng)元活動;需要更高的脈沖能量,以便在每個像素停留時間內(nèi)收集足夠的信號。復雜的行為通常涉及到大型的大腦神經(jīng)網(wǎng)絡,該網(wǎng)絡既具有局部的連接又具有遠程的連接。要想將神經(jīng)元活動與行為聯(lián)系起來,需要同時監(jiān)控非常龐大且分布普遍的神經(jīng)元的活動,大腦中的神經(jīng)網(wǎng)絡會在幾十毫秒內(nèi)處理傳入的刺激,要想了解這種快速的神經(jīng)元動力學,就需要MPM具備對神經(jīng)元進行快速成像的能力??焖費PM方法可分為單束掃描技術和多束掃描技術。多光子顯微鏡在基礎科學和臨床診斷領域的應用范圍正在持續(xù)增長。熒光多光子顯微鏡設備
有許多方法可以實現(xiàn)快速光柵掃描,例如使用振鏡進行快速2D掃描,以及將振鏡與可調(diào)電動透鏡相結合進行快速3D掃描。而可調(diào)電動式鏡頭由于機械慣性的限制,無法在軸向快速切換焦點,影響成像速度。現(xiàn)在它可以被空間光調(diào)制器(SLM)取代。遠程對焦也是實現(xiàn)3D成像的一種手段,如圖2所示。LSU模塊中,掃描振鏡水平掃描,ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M,通過調(diào)整M的位置實現(xiàn)軸向掃描該技術不僅可以校正主物鏡L2引入的光學像差,還可以進行快速軸向掃描。為了獲得更多的神經(jīng)元成像,可以通過調(diào)整顯微鏡的物鏡設計來放大FOV。然而,大NA和大FOV的物鏡通常很重,不能快速移動以進行快速軸向掃描,因此大FOV系統(tǒng)依賴于遠程聚焦、SLM和可調(diào)電動透鏡。美國進口多光子顯微鏡多光子激發(fā)國內(nèi)市場多光子顯微鏡銷售渠道。
快速光柵掃描有多種實現(xiàn)方式,使用振鏡進行快速2D掃描,將振鏡和可調(diào)電動透鏡結合在一起進行快速3D掃描,但可調(diào)電動透鏡由于機械慣性的限制在軸向無法快速進行焦點切換,影響成像速度,現(xiàn)可使用空間光調(diào)制器(SLM)代替。遠程聚焦也是一種實現(xiàn)3D成像的手段,如圖2所示。在LSU模塊中,掃描振鏡進行橫向掃描,ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M,通過調(diào)控M的位置實現(xiàn)軸向掃描。該技術不僅可以校正主物鏡L2引入的光學像差,還可以進行快速的軸向掃描。想要獲得更多神經(jīng)元成像,可以通過調(diào)整顯微鏡的物鏡設計來擴大FOV,但是具有大NA和大FOV的物鏡通常重量較大,無法快速移動以進行快速軸向掃描,因此大型FOV系統(tǒng)需要依賴于遠程聚焦、SLM和可調(diào)電動透鏡。
Ca2+是一種重要的第二信使,在調(diào)節(jié)細胞生理反應中起著重要作用。發(fā)展和利用雙光子熒光顯微成像技術觀測Ca2+熒光信號,可以從某些方面分析生物體或細胞的變化機制,具有重要意義。利用雙光子熒光顯微成像技術,我們可以觀察到細胞內(nèi)熒光探針標記的Ca2*的時間和空間熒光圖像的變化,也可以觀察到一定水平或部分細胞內(nèi)(Ca2+)的熒光圖像和變化。通過對單個細胞的研究發(fā)現(xiàn),Ca2+的分布不僅在細胞的局部區(qū)域之間是不均勻的,而且在細胞內(nèi)不同深度或層次的局部區(qū)域之間也存在不同程度的Ca2+梯度,稱為空間Ca2+梯度。雙光子熒光顯微鏡是結合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發(fā)技術的一種新技術。
細胞在受到外界刺激時,隨著刺激時間的增長,即使刺激繼續(xù)存在,Ca2+熒光信號不但不會繼續(xù)增強,反而會減弱,直至恢復到未加刺激物時的水平。對于細胞受精過程中Ca2+熒光信號的變化情況,研究發(fā)現(xiàn),配了在粘著過程中,Ca2+熒光信號未發(fā)生任何變化,而配子之間發(fā)生融合作用時,Ca2+熒光信號強度卻會出現(xiàn)一個不穩(wěn)定的峰值,并可持續(xù)幾分鐘。這些現(xiàn)象,對研究受精發(fā)育的早期信號及Ca2+在卵細胞和受精卵的發(fā)育過程中的作用具有重要的意義。在其它一些生理過程如細胞分裂、胞吐作用等等,Ca2+熒光信號強度也會發(fā)生很強的變化。多光子顯微鏡使用高能量鎖模脈沖激光器。美國離體多光子顯微鏡實驗操作
多光子顯微鏡市場集中,由于投產(chǎn)生產(chǎn)的成本較高,技術難度大,目前涌現(xiàn)的新企業(yè)不多。熒光多光子顯微鏡設備
對于雙光子(2P)成像而言,離焦和近表面熒光激發(fā)是兩個比較大的深度限制因素,而對于三光子(3P)成像這兩個問題大大減小,但是三光子成像由于熒光團的吸收截面比2P要小得多,所以需要更高數(shù)量級的脈沖能量才能獲得與2P激發(fā)的相同強度的熒光信號。功能性3P顯微鏡比結構性3P顯微鏡的要求更高,它需要更快速的掃描,以便及時采樣神經(jīng)元活動;需要更高的脈沖能量,以便在每個像素停留時間內(nèi)收集足夠的信號。復雜的行為通常涉及到大型的大腦神經(jīng)網(wǎng)絡,該網(wǎng)絡既具有局部的連接又具有遠程的連接。要想將神經(jīng)元活動與行為聯(lián)系起來,需要同時監(jiān)控非常龐大且分布普遍的神經(jīng)元的活動,大腦中的神經(jīng)網(wǎng)絡會在幾十毫秒內(nèi)處理傳入的刺激,要想了解這種快速的神經(jīng)元動力學,就需要MPM具備對神經(jīng)元進行快速成像的能力??焖費PM方法可分為單束掃描技術和多束掃描技術。 熒光多光子顯微鏡設備
因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司位于中山北路1759號浦發(fā)廣場D座803,擁有一支專業(yè)的技術團隊。專業(yè)的團隊大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗,熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,致力于發(fā)展Inscopix,envisionTEC,rokit,piezosleep,stoeltingco,unipick,neuronexus,scientifica,alphaomega,divescope,invivo的品牌。公司不僅*提供專業(yè)的生物科技,醫(yī)藥科技領域內(nèi)的技術開發(fā)、技術咨詢、技術服務、技術轉讓,實驗室設備、儀器儀表、醫(yī)療器械、計算機、軟件及輔助設備銷售,計算機數(shù)據(jù)處理,貨物及技術進出口業(yè)務。 成像平臺: 1. Inscopix自由活動超微顯微成像系統(tǒng) 2. DiveScope多通道內(nèi)窺鏡系統(tǒng) 3. 雙光子顯微鏡 動物行為學平臺: 1. PiezoSleep無創(chuàng)睡眠檢測系統(tǒng) 2. 自身給藥、條件恐懼、斯金納、睡眠剝奪、跑步機、各類經(jīng)典迷宮等 神經(jīng)電生理: 1.NeuroNexus神經(jīng)電極 2.多通道電生理信號采集系統(tǒng) 3.膜片鉗系統(tǒng) 4.AO功能神經(jīng)外科臨床電生理平臺 顯微細胞: 1. UnipicK單細胞挑選及顯微切割系統(tǒng) 科研/臨床級3D打印 1. 德國envisionTEC 3D Bioplotter生物打印機 2. 韓國Invivo醫(yī)療級生物打印機等。,同時還建立了完善的售后服務體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務。因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司主營業(yè)務涵蓋nVista,nVoke,3D bioplotte,invivo,堅持“質量保證、良好服務、顧客滿意”的質量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。