體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)

利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)生殖毒性。斑馬魚(yú)成魚(yú)體長(zhǎng)5cm左右，其胚胎透明，在受精72h后完成孵化，并在孵出后3個(gè)月內(nèi)性成熟。成年斑馬魚(yú)的繁殖周期短(一般7d左右)，若條件適宜，成年雌性斑馬魚(yú)可定期產(chǎn)卵(每次200～300個(gè))。在斑馬魚(yú)的早期胚胎及幼體的發(fā)育過(guò)程中，尚無(wú)性別分化，原始性腺都是相同的且具有雙向發(fā)育的潛能，易受環(huán)境(溫度、光照、pH值等)因素的影響而改變其遺傳性別。對(duì)于雌性斑馬魚(yú)而言，產(chǎn)卵量是評(píng)價(jià)其繁殖力的常用生物指標(biāo)，它與魚(yú)類繁殖過(guò)程中的多個(gè)環(huán)節(jié)（卵子發(fā)育、雌雄交配行為等）相關(guān)，并對(duì)環(huán)境化學(xué)物質(zhì)具有高敏感性，能直接反應(yīng)魚(yú)類繁殖力變化。環(huán)境化學(xué)物質(zhì)除了直接對(duì)親代斑馬魚(yú)的生殖系統(tǒng)造成損害，還可能對(duì)其子代的正常生長(zhǎng)發(fā)育斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)急性毒性。體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)

我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用心肌保護(hù)劑組。其中正常對(duì)照組未經(jīng)任何處理，模型對(duì)照組與服用心肌保護(hù)劑組都攝入了等量的鹽酸異丙腎上腺素（鹽酸異丙腎上腺素通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi)）。服用心肌損傷保護(hù)劑組在攝入鹽酸異丙腎上腺素的同時(shí)攝入N-乙酰半胱氨酸之類的心肌保護(hù)劑。服用一段時(shí)間心肌保護(hù)劑后，我們對(duì)斑馬魚(yú)整體進(jìn)行特異性熒光染色，觀察心肌細(xì)胞的凋亡情況?？梢钥吹剑眯募”Ｗo(hù)劑組的心臟情況與正常對(duì)照組比較相似，細(xì)胞凋亡明顯比模型對(duì)照組減少。外用藥物的安全性評(píng)價(jià)藥物臨床前研究實(shí)驗(yàn)-藥物功效與安全性評(píng)價(jià)。

在一項(xiàng)臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)中，無(wú)論是主要療效指標(biāo)還是次要療效指標(biāo)的確定，除了需要確定療效觀測(cè)指標(biāo)外，更重要的是根據(jù)臨床試驗(yàn)?zāi)康模辕熜в^測(cè)指標(biāo)為基礎(chǔ)確定療效評(píng)價(jià)指標(biāo)。一個(gè)完整的療效指標(biāo)的確定既包括療效觀測(cè)指標(biāo)，也包括以療效觀測(cè)指標(biāo)為基礎(chǔ)療效評(píng)價(jià)指標(biāo)。由此可見(jiàn)，在臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)中，在明確藥物的觀測(cè)指標(biāo)后，還需要根據(jù)藥物臨床試驗(yàn)?zāi)康暮拖嚓P(guān)指標(biāo)的重要性確定藥物療效評(píng)價(jià)指標(biāo)。梳理現(xiàn)有的藥物臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則和臨床試驗(yàn)療效指標(biāo)的設(shè)計(jì)的現(xiàn)狀。

我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成三組，分別是底物對(duì)照組、正常對(duì)照和服用供試品組（供試品通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi)），并加入ROS特異性熒光檢測(cè)試劑。服用供試品一段時(shí)間后，我們使用酶標(biāo)儀對(duì)斑馬魚(yú)體內(nèi)ROS進(jìn)行熒光定量。可以看到，服用供試品組斑馬魚(yú)體內(nèi)熒光值比正常對(duì)照組有明顯升高。1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用供試品組的斑馬魚(yú)ROS水平明顯高于正常對(duì)照組，與正常對(duì)照組存在明顯性差異。2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品誘發(fā)斑馬魚(yú)氧化應(yīng)激。評(píng)價(jià)疏肝解酒酒精性脂肪肝防治功效。

利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)保護(hù)心肌作用。心肌損傷多數(shù)是由于炎癥、缺血、冠狀動(dòng)脈狹窄等因素引發(fā)的心肌損傷，常表現(xiàn)為胸悶、胸痛、氣短、四肢乏力、心慌、惡心嘔吐等癥狀。斑馬魚(yú)心臟包含心房、心室和靜脈竇，心電圖譜也與哺乳動(dòng)物類似。而且斑馬魚(yú)生長(zhǎng)發(fā)育周期短，胚胎透明易觀察，心臟在受精后48小時(shí)就發(fā)育完全，有利于開(kāi)展心肌損傷保護(hù)劑的研究。鹽酸異丙腎上腺素可以誘導(dǎo)斑馬魚(yú)心率加快，心肌持續(xù)收縮，心肌耗氧量持續(xù)增加，心臟由代償性收縮轉(zhuǎn)化為失代償，終將導(dǎo)致心肌損傷，使心肌細(xì)胞凋亡。經(jīng)過(guò)特異性熒光染色（凋亡細(xì)胞呈綠色），心肌損傷的斑馬魚(yú)在心臟部位會(huì)布滿凋亡細(xì)胞，可以明顯被觀察到。斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?藥物、化妝品功效評(píng)價(jià)。藥物藥效評(píng)價(jià)平臺(tái)

斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)多發(fā)性硬化療愈藥物篩選功效。體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)

利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)保護(hù)腎臟功效。腎臟是人體的重要組成部分,,發(fā)揮著從血液中濾過(guò)代謝廢物并維持體內(nèi)正常酸堿和滲透壓平衡的重要作用。斑馬魚(yú)的腎臟與哺乳動(dòng)物腎臟的發(fā)育及疾病的發(fā)生、發(fā)展存在很多相似之處，涉及的許多基因具有高度保守性。因此，斑馬魚(yú)適合用于評(píng)價(jià)保護(hù)腎臟功效。馬兜鈴酸主要損傷腎小管上皮細(xì)胞，導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化及腎萎縮，并出現(xiàn)低分子蛋白尿、嚴(yán)重貧血癥狀，被稱為“馬兜鈴酸腎病”。在人體和斑馬魚(yú)上，馬兜鈴酸均可誘發(fā)腎性水腫和腎臟形態(tài)功能異常，引起不可逆性腎損傷并至死亡。評(píng)價(jià)保護(hù)腎臟功效有兩個(gè)指標(biāo)：1.腎性水腫發(fā)生率。由于斑馬魚(yú)通體透明，腎性水腫可以明顯的被觀察到。2.腎小球?yàn)V過(guò)率。通過(guò)注射熒光物質(zhì)，正常斑馬魚(yú)可將熒光物質(zhì)排出體外，腎小球?yàn)V過(guò)功能損傷的斑馬魚(yú)不能將熒光物質(zhì)排出體外。觀察斑馬魚(yú)全身熒光強(qiáng)度可分析腎小球?yàn)V過(guò)率。體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)