化藥藥物評價

細(xì)胞色素P450酶是許多同工酶組成的超大家族，主要位于肝臟微粒體中，參與生物體許多內(nèi)源性和外源性物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化。許多臨床相關(guān)藥物間的相互作用與抑制和/或誘導(dǎo)CYP酶有關(guān)，改變CYP酶的活性對藥效有重要影響，有時甚至?xí){生命。在眾多肝臟細(xì)胞色素P450酶家族中，CYP3A4和CYP2D6與70%以上的藥物代謝有關(guān)，其中CYP3A4占50%以上，而CYP2D6占20%左右，因此目前藥物代謝研究集中于評價藥物對CYP3A4和CYP2D6的影響。我們評價斑馬魚對細(xì)胞色素P450的影響作用有2個指標(biāo)：1.對CYP3A4的影響作用；2.對CYP2D6的影響作用。斑馬魚模型評價聽毒性?；幩幬镌u價

貧血是指人體外周血紅細(xì)胞容量減少，低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。溶血性貧血是由于紅細(xì)胞的破壞增速、增多，超過造血補(bǔ)償能力范圍時所發(fā)生的一種貧血。斑馬魚造血系統(tǒng)的形成，包括紅系、髓系、淋系及巨核系為主的造血系統(tǒng)，其相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路同人類有高度的同源性，這些特點使斑馬魚在人類造血系統(tǒng)和血液疾病的研究中有著更加大量的應(yīng)用。研究表明，苯肼是一種溶血劑。苯肼作用于紅細(xì)胞膜，加速膜表面亮氨酸、賴氨酸及組氨酸的水解，使大量紅細(xì)胞迅速遭到破壞；同時可選擇性地氧化膜骨架和α珠蛋白，并將磷脂酰絲氨酸易位至紅細(xì)胞表面，導(dǎo)致紅細(xì)胞變形性降低，增強(qiáng)紅細(xì)胞黏附到細(xì)胞外基質(zhì)的能力從而破壞循環(huán)血中的成熟紅細(xì)胞，使血紅蛋白變性聚集、形成Heinz小體，使得紅細(xì)胞的破壞速度遠(yuǎn)大于機(jī)體紅細(xì)胞再造的能力，導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生溶血性貧血。用鄰聯(lián)茴香胺染色法對紅細(xì)胞進(jìn)行特異性染色（呈紅色），貧血斑馬魚心臟部位的紅細(xì)胞較正常斑馬魚明顯減少。由于斑馬魚早期出現(xiàn)血液循環(huán)時胚胎透明，在解剖顯微鏡下可以觀察到。眼科藥物藥效評價藥物臨床前研究實驗。

藥物的臨床療效一般通過療效觀測指標(biāo)來記錄，而療效評價可以是某一療效觀測指標(biāo)的直接測量結(jié)果，更多的是在直接測量結(jié)果基礎(chǔ)上轉(zhuǎn)化而來的、特定的評價指標(biāo)來評價。同一療效觀測指標(biāo)，可以轉(zhuǎn)化出多種療效評價指標(biāo)，不同的療效評價指標(biāo)在藥物有效性確證中的作用不同和地位不同，有的可以作為主要療效指標(biāo)，有的則作為次要療效指標(biāo)。如某一適應(yīng)證的評價量表，以前后的減分值為主要療效指標(biāo)，而以50%的減分率的患者比例為次要療效指標(biāo)。而另一適應(yīng)證的評價量表，以積分變化到某一積分值以下患者的比例為主要療效指標(biāo)，而前后的減分值比較為次要療效指標(biāo)。

斑馬魚消化道的解剖結(jié)構(gòu)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)與人類消化道相似，具有同心圓層的內(nèi)上皮、結(jié)締組織、環(huán)狀肌肉和外縱肌層。三硝基苯磺酸（TNBS）的乙醇溶液造模法屬于正常免疫系統(tǒng)下的半抗原誘導(dǎo)性模型，當(dāng)TNBS的乙醇溶液灌腸時，乙醇作為有機(jī)溶劑溶解腸粘膜表面的黏液，暫時性破壞腸粘膜屏障，使TNBS和腸組織蛋白結(jié)合形成完全抗原，導(dǎo)致腸黏膜免疫系統(tǒng)針對該抗原的遲發(fā)性變化反應(yīng)，并造成腸黏膜的損傷。杯狀細(xì)胞是黏蛋白的主要來源，其數(shù)量和形態(tài)反應(yīng)腸粘膜的健康狀況，是腸粘膜異常的敏感指標(biāo)。由于斑馬魚通體透明的特點，有兩種方法檢測結(jié)腸炎的防治作用。1.觀察腸腔面積的變化，2.通過特異性染料（呈藍(lán)色）對腸道的杯狀細(xì)胞染色，通過觀察杯狀細(xì)胞數(shù)量來判斷腸粘膜的損傷情況。斑馬魚模型評價胚胎毒性。

利用斑馬魚模型評價生殖毒性。斑馬魚成魚體長5cm左右，其胚胎透明，在受精72h后完成孵化，并在孵出后3個月內(nèi)性成熟。成年斑馬魚的繁殖周期短(一般7d左右)，若條件適宜，成年雌性斑馬魚可定期產(chǎn)卵(每次200～300個)。在斑馬魚的早期胚胎及幼體的發(fā)育過程中，尚無性別分化，原始性腺都是相同的且具有雙向發(fā)育的潛能，易受環(huán)境(溫度、光照、pH值等)因素的影響而改變其遺傳性別。對于雌性斑馬魚而言，產(chǎn)卵量是評價其繁殖力的常用生物指標(biāo)，它與魚類繁殖過程中的多個環(huán)節(jié)（卵子發(fā)育、雌雄交配行為等）相關(guān)，并對環(huán)境化學(xué)物質(zhì)具有高敏感性，能直接反應(yīng)魚類繁殖力變化。環(huán)境化學(xué)物質(zhì)除了直接對親代斑馬魚的生殖系統(tǒng)造成損害，還可能對其子代的正常生長發(fā)育斑馬魚實驗?zāi)Ｐ?藥物、化妝品功效評價。藥效學(xué)評價實驗室

利用斑馬魚模型評價抗PM2.5功效?；幩幬镌u價

靜脈注射給予長春瑞濱造模斑馬魚抵抗力低下模型。大劑量長春瑞濱骨髓抑制明顯，導(dǎo)致血小板、紅細(xì)胞及白細(xì)胞數(shù)目（中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞等）減少和貧血，導(dǎo)致抵抗力低下。人類與斑馬魚在免疫系統(tǒng)的細(xì)胞組成上極為相似，而且斑馬魚是目前所有同時具有特異性免疫和非特異性免疫動物個體中體積較小的，適合高通量評價調(diào)節(jié)免疫功效。斑馬魚靜脈注射大劑量長春瑞濱后可造成免疫低下。采用轉(zhuǎn)基因T細(xì)胞紅色熒光斑馬魚，可在熒光顯微鏡在觀察到抵抗力低下的斑馬魚體內(nèi)的T細(xì)胞熒光強(qiáng)度明顯減弱化藥藥物評價