藥物研發(fā)安全性評(píng)價(jià)

我們將受測(cè)試斑馬魚分成二組，分別是正常對(duì)照和服用供試品組（供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)），加入相應(yīng)的胰脂肪酶和胰蛋白酶特異性檢測(cè)試劑。服用供試品后，我們使用酶標(biāo)儀對(duì)斑馬魚進(jìn)行OD值的檢測(cè)。可以看到，服用供試品組的胰脂肪酶和胰蛋白酶的OD值與正常對(duì)照組比較，有明顯性提高。1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用供試品組與正常對(duì)照組比較胰脂肪酶和胰蛋白酶含量均有明顯的升高。2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了供試品具有促進(jìn)腸道消化功能的作用，主要表現(xiàn)為增加胰脂肪酶和胰蛋白酶的含量。藥物如何進(jìn)行正確分類？藥物研發(fā)安全性評(píng)價(jià)

我們將受測(cè)試斑馬魚分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用肝保護(hù)劑組。其中正常對(duì)照組未攝入乙醇，模型對(duì)照組與服用肝保護(hù)劑組都攝入了等量的乙醇（乙醇通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。肝保護(hù)劑組在攝入對(duì)乙醇的同時(shí)攝入美他多辛之類的肝保護(hù)劑。服用一段時(shí)間肝保護(hù)劑后，我們?cè)陲@微鏡下觀察斑馬魚肝臟及卵黃囊表型，同時(shí)制作成病理切片觀察肝臟的病理結(jié)構(gòu)變化。從病理切片中也能看出來，正常對(duì)照組肝細(xì)胞核規(guī)則清晰，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常，邊緣清晰。乙醇處理后，斑馬魚肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊、肝細(xì)胞核腫大，肝組織出現(xiàn)脂肪空泡樣變性，而肝保護(hù)劑組細(xì)胞和正常斑馬魚中形態(tài)相似。北京藥物安全性評(píng)價(jià)公司利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)抗癲癇作用。

利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)保護(hù)腎臟功效。腎臟是人體的重要組成部分,,發(fā)揮著從血液中濾過代謝廢物并維持體內(nèi)正常酸堿和滲透壓平衡的重要作用。斑馬魚的腎臟與哺乳動(dòng)物腎臟的發(fā)育及疾病的發(fā)生、發(fā)展存在很多相似之處，涉及的許多基因具有高度保守性。因此，斑馬魚適合用于評(píng)價(jià)保護(hù)腎臟功效。馬兜鈴酸主要損傷腎小管上皮細(xì)胞，導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化及腎萎縮，并出現(xiàn)低分子蛋白尿、嚴(yán)重貧血癥狀，被稱為“馬兜鈴酸腎病”。在人體和斑馬魚上，馬兜鈴酸均可誘發(fā)腎性水腫和腎臟形態(tài)功能異常，引起不可逆性腎損傷并至死亡。評(píng)價(jià)保護(hù)腎臟功效有兩個(gè)指標(biāo)：1.腎性水腫發(fā)生率。由于斑馬魚通體透明，腎性水腫可以明顯的被觀察到。2.腎小球?yàn)V過率。通過注射熒光物質(zhì)，正常斑馬魚可將熒光物質(zhì)排出體外，腎小球?yàn)V過功能損傷的斑馬魚不能將熒光物質(zhì)排出體外。觀察斑馬魚全身熒光強(qiáng)度可分析腎小球?yàn)V過率。

藥物的臨床療效一般通過療效觀測(cè)指標(biāo)來記錄，而療效評(píng)價(jià)可以是某一療效觀測(cè)指標(biāo)的直接測(cè)量結(jié)果，更多的是在直接測(cè)量結(jié)果基礎(chǔ)上轉(zhuǎn)化而來的、特定的評(píng)價(jià)指標(biāo)來評(píng)價(jià)。同一療效觀測(cè)指標(biāo)，可以轉(zhuǎn)化出多種療效評(píng)價(jià)指標(biāo)，不同的療效評(píng)價(jià)指標(biāo)在藥物有效性確證中的作用不同和地位不同，有的可以作為主要療效指標(biāo)，有的則作為次要療效指標(biāo)。如某一適應(yīng)證的評(píng)價(jià)量表，以前后的減分值為主要療效指標(biāo)，而以50%的減分率的患者比例為次要療效指標(biāo)。而另一適應(yīng)證的評(píng)價(jià)量表，以積分變化到某一積分值以下患者的比例為主要療效指標(biāo)，而前后的減分值比較為次要療效指標(biāo)。斑馬魚模型評(píng)價(jià)促進(jìn)組織再生傷口愈合功效。

斑馬魚的基因與人類基因的相似度達(dá)到87％，斑馬魚肝臟中有許多與哺乳動(dòng)物同源的脂質(zhì)代謝酶，與哺乳動(dòng)物對(duì)外源化學(xué)物質(zhì)的防御機(jī)制相當(dāng)，包括酶的誘導(dǎo)和氧化應(yīng)激。而且斑馬魚幼魚通體透明，容易觀察到毒性表型。酒精性肝損傷是全世界發(fā)病率和死亡率的主要原因，酒精性肝損傷是過量飲酒的結(jié)果。當(dāng)患者繼續(xù)飲酒時(shí)，會(huì)誘發(fā)嚴(yán)重的肝損傷形式，如脂肪性肝炎，纖維化，肝硬化和肝細(xì)胞。用乙醇可以誘發(fā)斑馬魚肝臟損傷，模擬人的肝臟疾病。我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚肝臟毒性有4個(gè)指標(biāo)：1.肝臟面積；2.肝臟變性程度；3.卵黃囊吸收延遲的發(fā)生率（卵黃囊是脂肪，卵黃囊吸收與肝功能密切相關(guān)）；4.肝臟病理切片。利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)抗焦慮功效。藥物活性成分評(píng)估

斑馬魚模型評(píng)價(jià)胃腸道毒***物研發(fā)安全性評(píng)價(jià)

由于硬骨魚和人類在骨骼發(fā)育過程中的基因、信號(hào)通路有高度同源性，而且與其他的動(dòng)物模型相比，斑馬魚具有個(gè)體小適合高通量化學(xué)篩選、幼魚身體透明易于觀察骨骼發(fā)育的特點(diǎn)，所以近年來以斑馬魚為模型的骨骼研究逐漸成為這一領(lǐng)域的熱點(diǎn)。斑馬魚從前向后的脊椎發(fā)育過程是非連續(xù)的，而是分成兩個(gè)不同的區(qū)域：前域（包括第3塊椎骨）和后域（包括第4-31塊椎骨）。將斑馬魚脊椎骨鈣化過程分成兩個(gè)不同區(qū)域是基于第2和第3椎骨的出現(xiàn)晚于第4椎骨。我們利用斑馬魚骨骼發(fā)育的規(guī)律，攝入生長(zhǎng)發(fā)育促進(jìn)劑的斑馬魚脊椎骨發(fā)育會(huì)加快。脊椎骨染色應(yīng)用與鈣特異性結(jié)合的熒光染料（呈綠色），經(jīng)熒光顯微鏡觀察脊椎骨的數(shù)量。藥物研發(fā)安全性評(píng)價(jià)

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