四川流式細(xì)胞高通量篩選

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-11-15

高通量篩選的實(shí)驗(yàn)方法分子水平和細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)方法(或稱篩選模型)是實(shí)現(xiàn)藥物高通量篩選的技術(shù)基礎(chǔ)。由于藥物高通量篩選要求同時(shí)處理大量樣品,實(shí)驗(yàn)體系必須微量化,而這些微量化的實(shí)驗(yàn)方法應(yīng)根據(jù)新的科研成果來建立。第四軍醫(yī)大學(xué)周四元研究認(rèn)為,藥物高通量篩選模型的實(shí)驗(yàn)方法,根據(jù)其生物學(xué)特點(diǎn),可分為以下幾類:受體結(jié)合分析法;酶活性測(cè)定法;細(xì)胞分子測(cè)定法;細(xì)胞活性測(cè)定法;代謝物質(zhì)測(cè)定法;基因產(chǎn)物測(cè)定法。這些實(shí)驗(yàn)方法,均已用于藥物高通量篩選中。充分利用藥用資源 由于高通量篩選依賴數(shù)量龐大的樣品庫,實(shí)現(xiàn)了藥物篩選的規(guī)?;?,較大限度地利用了藥用物質(zhì)資源,提高了藥物發(fā)現(xiàn)的幾率,同時(shí)提高了發(fā)現(xiàn)新藥的質(zhì)量。離子液體高通量篩選。四川流式細(xì)胞高通量篩選

四川流式細(xì)胞高通量篩選,高通量篩選

藥物研發(fā)與開發(fā)是一個(gè)復(fù)雜與漫長(zhǎng)的過程,特別是小分子藥物的研發(fā),其難點(diǎn)和關(guān)鍵在于如何快速高效的找到先導(dǎo)化合物(LeadCompound)。采用高通量藥物篩選(High-throughputscreening,HTS)來發(fā)現(xiàn)新的先導(dǎo)化合物仍然是小分子藥物研發(fā)的優(yōu)先。傳統(tǒng)藥物篩選是一個(gè)耗時(shí)長(zhǎng)且昂貴的過程,一般需要消耗大量的樣品和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,對(duì)技術(shù)人員的操作技能有較高要求,難以在短時(shí)間內(nèi)對(duì)一定數(shù)量的樣品開展有效和經(jīng)濟(jì)的篩選。隨著各類化合物樣品庫儲(chǔ)量的不斷增加以及組合化學(xué)技術(shù)的應(yīng)用,采用傳統(tǒng)手段篩選海量樣品不僅不可能而且極大地限制了新藥研究之進(jìn)程。四川流式細(xì)胞高通量篩選高通量篩選的原理是什么。

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為了避免頻繁命中化合物對(duì)實(shí)驗(yàn)干擾,許多實(shí)驗(yàn)方法,例如采用qHTS、ADP-Glo等更先進(jìn)高通量篩選方法,或者采用交互實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證等用于增強(qiáng)篩選結(jié)果可行度。此外,隨著更多晶體結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)分享和生物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)庫整理,頻繁命中化合物的探索變得更加可行。為人熟知且使用的就是PAINS(Pan-assay interference compounds)篩選規(guī)則。這是Baell等人在2010年基于六個(gè)不同靶點(diǎn)高通量篩選實(shí)驗(yàn)結(jié)果,并將其中頻繁出現(xiàn)(≥4次)的化合物和相關(guān)結(jié)構(gòu)總結(jié)為包含480個(gè)子結(jié)構(gòu)的篩選規(guī)則。但這類規(guī)則主要針對(duì)的是化學(xué)易反應(yīng)化合物,且PAINS規(guī)則本身也有很大局限性,因此,頻繁命中化合物相關(guān)篩選預(yù)測(cè)工具的開發(fā)仍然是現(xiàn)今研究熱點(diǎn)。在2017年,一篇由九名美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)雜志主編聯(lián)名發(fā)表的文章“The Ecstasy and Agony of Assay Interference Compounds”中強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)干擾引起的假陽性化合物的危害,告誡研究人員對(duì)篩選得出的陽性結(jié)果真實(shí)性需要反復(fù)確認(rèn),對(duì)潛在的假陽性結(jié)果需要提高警惕。為了更深入的了解頻繁命中化合物和相關(guān)機(jī)制。

熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)是指在兩個(gè)不同的熒光基團(tuán)中,如果一個(gè)熒光基團(tuán)(供體Donor)的發(fā)射光譜與另一個(gè)基團(tuán)(受體Acceptor)的吸收光譜有一定的重疊,當(dāng)這兩個(gè)熒光基團(tuán)間的距離合適時(shí),就可觀察到熒光能量由供體向受體轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象,即以前一種基團(tuán)的激發(fā)波長(zhǎng)激發(fā)時(shí),可觀察到后一個(gè)基團(tuán)發(fā)射的熒光。常見的供體-受體對(duì)之間的有效距離通常為2-6nm,適用于許多蛋白質(zhì)相互作用。染料通常是有機(jī)分子,如與蛋白質(zhì)偶聯(lián)的熒光素和羅丹明,或與感興趣的蛋白質(zhì)融合的熒光蛋白。高通量篩選催化劑技術(shù)。

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高通量篩選的實(shí)驗(yàn)方法分子水平和細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)方法(或稱篩選模型)是實(shí)現(xiàn)藥物高通量篩選的技術(shù)基礎(chǔ)。由于藥物高通量篩選要求同時(shí)處理大量樣品,實(shí)驗(yàn)體系必須微量化,而這些微量化的實(shí)驗(yàn)方法應(yīng)根據(jù)新的科研成果來建立。第四軍醫(yī)大學(xué)周四元研究認(rèn)為,藥物高通量篩選模型的實(shí)驗(yàn)方法,根據(jù)其生物學(xué)特點(diǎn),可分為以下幾類:受體結(jié)合分析法;酶活性測(cè)定法;細(xì)胞分子測(cè)定法;細(xì)胞活性測(cè)定法;代謝物質(zhì)測(cè)定法;基因產(chǎn)物測(cè)定法。這些實(shí)驗(yàn)方法,均已用于藥物高通量篩選中。高通量篩選樣品用量。四川流式細(xì)胞高通量篩選

高內(nèi)涵高通量篩選系統(tǒng)。四川流式細(xì)胞高通量篩選

環(huán)特生物是一家以斑馬魚生物技術(shù)應(yīng)用為的國(guó)家高新生物科技企業(yè)。作為行業(yè)獨(dú)一家同時(shí)獲得國(guó)家CNAS認(rèn)可、CMA資質(zhì)認(rèn)定、AAALAC國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物認(rèn)證的斑馬魚科技公司,多項(xiàng)技術(shù)成果先后榮獲德國(guó)紐倫堡國(guó)際發(fā)明金獎(jiǎng)、英國(guó)國(guó)際發(fā)明展金獎(jiǎng)及杰出創(chuàng)新獎(jiǎng)和中國(guó)發(fā)明協(xié)會(huì)發(fā)明創(chuàng)業(yè)獎(jiǎng)項(xiàng)目獎(jiǎng)金獎(jiǎng)等多項(xiàng)發(fā)明類國(guó)內(nèi)外大獎(jiǎng)。高通量篩選(High throughput screening,HTS)技術(shù)是指以分子水平和細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)方法為基礎(chǔ),以微板形式作為實(shí)驗(yàn)工具載體,以自動(dòng)化操作系統(tǒng)執(zhí)行試驗(yàn)過程,以靈敏快速的檢測(cè)儀器采集實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù),以計(jì)算機(jī)分析處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),在同一時(shí)間檢測(cè)數(shù)以千萬的樣品,并以得到的相應(yīng)數(shù)據(jù)庫支持運(yùn)轉(zhuǎn)的技術(shù)體系,它具有微量、快速、靈敏和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。簡(jiǎn)言之就是可以通過一次實(shí)驗(yàn)獲得大量的信息,并從中找到有價(jià)值的信息。四川流式細(xì)胞高通量篩選

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