斑馬魚,作為一種新的科研工具,其特色優(yōu)勢:可靠、快速、高效、高通量、高性價比,且創(chuàng)新性強(qiáng),易于從眾多課題項(xiàng)目中脫穎而出,能針對性地提供快速、準(zhǔn)確、可靠的科研數(shù)據(jù),協(xié)助科研人員發(fā)表論文專著、申報,實(shí)現(xiàn)項(xiàng)目順利結(jié)題。在科研合作前期,會針對性地對每個項(xiàng)目進(jìn)行的可行性評估,后期對該項(xiàng)目提供實(shí)驗(yàn)執(zhí)行和技術(shù)支持等的科研服務(wù),實(shí)現(xiàn)雙方的學(xué)術(shù)共贏。借助本單位的資源優(yōu)勢,環(huán)特生物可助您:快速畢業(yè)、職稱晉升階段的技術(shù)障礙。即使面臨繁忙工作的困擾,也一樣能獲得快速成長,高效實(shí)現(xiàn)科研目標(biāo)。斑馬魚發(fā)育生物學(xué)研究和模式動物建立。湖南斑馬魚實(shí)驗(yàn)研究價值
斑馬魚模型發(fā)展歷史和應(yīng)用現(xiàn)狀2015年10月10日瀏覽量:2384次評論(0)來源:杭州環(huán)特發(fā)布者:杭州環(huán)特斑馬魚早在20世紀(jì)30年代就在歐洲用于環(huán)境檢測研究,但普遍認(rèn)為斑馬魚正式作為一種模式生物應(yīng)用于科學(xué)研究始于1972年,美國GeorgeStreisinge教授在該年開始了斑馬魚發(fā)育生物學(xué)研究和模式動物建系工作。1989年,GeorgeStreisinge教授的同事MonteWesterfield教授出版***本斑馬魚研究專著TheZebrafishBook***版。1994年,“斑馬魚發(fā)育和遺傳”主題會議在冷泉港實(shí)驗(yàn)室召開,斑馬魚模型開始被學(xué)術(shù)界接受。1998年,發(fā)生了多件斑馬魚技術(shù)發(fā)展的大事件,美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)在該年開始大力度支持斑馬魚基因組資源開發(fā),全球較早斑馬魚模式生物數(shù)據(jù)庫ZFIN在該年成立,而全球***家斑馬魚藥物研發(fā)服務(wù)外包公司也是在這一年成立。2000年,歐洲Sanger中心啟動斑馬魚全基因組測序工作,并于2年后發(fā)布了***個斑馬魚全基因組序列拼接ZV1。2004年,斑馬魚國際資源中心(ZIRC)在俄勒岡大學(xué)成立。2009年,斑馬魚藥物毒理學(xué)評價技術(shù)***通過FDA和EMA的GLP認(rèn)證。上海斑馬魚實(shí)驗(yàn)室斑馬魚為模式生物的研究進(jìn)入到一個新的階段。
斑馬魚基因敲除品系制備服務(wù)簡介1.基因敲除(GeneKnockout)根據(jù)給定GeneID或Genename,分析基因保守結(jié)構(gòu)域,在保守結(jié)構(gòu)域或客戶指定區(qū)域設(shè)計(jì)靶點(diǎn)并制備靶點(diǎn)gRNA,gRNA和Cas9共注射使基因產(chǎn)生移碼突變,通過PCR篩選得到穩(wěn)定遺傳品系。2.基因敲除技術(shù)特點(diǎn)2.1通過將基因敲除斑馬魚品系與野生型相比較,研究者可以揭示特定基因的功能。2.2在基因組水平上將目標(biāo)基因敲除,遺傳背景干凈清晰,是研究基因功能的金標(biāo)準(zhǔn)。服務(wù)流程▲根據(jù)客戶提供的GeneID或Genename進(jìn)行基因分析——▲cas9mRNA和多個gRNA靶點(diǎn)的設(shè)計(jì)及合成——▲高效gRNA靶點(diǎn)的篩選及效率驗(yàn)證——▲F0代斑馬魚的可遺傳性篩選——▲雜合子F1代斑馬魚的基因型鑒定環(huán)特生物優(yōu)勢成熟的基因敲除技術(shù)快速獲得穩(wěn)定品系;多靶點(diǎn)共注射F0代驗(yàn)證基因功能。
斑馬魚是功能基因組是科學(xué)研究中比較重要的模式生物之一,已經(jīng)推動了遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)和疾病研究等多個領(lǐng)域的研究與應(yīng)用發(fā)展。斑馬魚具有胚胎透明、體外發(fā)育等特點(diǎn),在受精后48小時內(nèi)基本形成,所有發(fā)育階段的胚胎均可在顯微鏡下操作和觀測,不但可以直接觀察和追蹤基因和細(xì)胞在發(fā)育中的行為,而且易于在整體動物模型中研究其調(diào)控機(jī)制。斑馬魚個體小,易于低成本地在實(shí)驗(yàn)室大量養(yǎng)殖,遺傳學(xué)和胚胎學(xué)操作比小鼠等哺乳動物模型更易于掌握,適合多種疾病模型的建立。另外,斑馬魚胚胎產(chǎn)量高,可以用高通量方法篩選與基因和細(xì)胞功能相關(guān)的小分子化合物。斑馬魚實(shí)驗(yàn)提高藥物研發(fā)效率。
斑馬魚敲除品系成功案例1、基因分析分析目的基因的保守結(jié)構(gòu)域;2、靶點(diǎn)篩選設(shè)計(jì)4個gRNA靶點(diǎn),PCR檢測包含靶點(diǎn)的區(qū)域真實(shí)序列,顯微注射驗(yàn)證靶點(diǎn)效率;3、大規(guī)模注射養(yǎng)殖F0Cas9pro+gRNA共注射,共養(yǎng)殖F0約80條用于后期Founder篩選;4、Founder篩選F0代斑馬魚與野生型外交,收集48hpf的F1胚胎抽取基因組,PCR鑒定,測序結(jié)果在靶點(diǎn)位置出現(xiàn)雙峰的認(rèn)為產(chǎn)生突變,然后TAclone驗(yàn)證其可能產(chǎn)生的突變方式;5、F1代篩選F1代斑馬魚剪尾篩選,TAclone驗(yàn)證突變方式:斑馬魚肝毒性評價模型。江西斑馬魚實(shí)驗(yàn)抗體
斑馬魚實(shí)驗(yàn)環(huán)境毒理學(xué)評價。湖南斑馬魚實(shí)驗(yàn)研究價值
斑馬魚CRISPR基因編輯技術(shù)服務(wù),含基因敲入品系制備、基因敲入品系制備、轉(zhuǎn)基因品系制備等。斑馬魚基因敲入品系制備服務(wù)簡介:1.基因敲入(Knockin)非同源依賴的DNA修復(fù)技術(shù),在斑馬魚基因組定點(diǎn)插入外源DNA(熒光蛋白、PA等)。2.基因敲入技術(shù)特點(diǎn)2.1定點(diǎn)插入;2.2敲入效率較低。服務(wù)流程:根據(jù)客戶基因敲入要求進(jìn)行基因分析;cas9mRNA和多個gRNA靶點(diǎn)的設(shè)計(jì)及合成;高效gRNA靶點(diǎn)的篩選及效率驗(yàn)證;敲入載體設(shè)計(jì)及構(gòu)建;斑馬魚胚胎的顯微注射和敲入驗(yàn)證;F0代斑馬魚的可遺傳性篩選;雜合子F1代斑馬魚的基因型鑒定。環(huán)特生物優(yōu)勢:國際前列的斑馬魚敲入技術(shù)以及上百例的成功經(jīng)驗(yàn);特有的高效篩選方法。湖南斑馬魚實(shí)驗(yàn)研究價值