高通量篩選技術(shù),是目前藥物篩選領(lǐng)域研究的重要課題,近年來,對它的研究應(yīng)用雖然已取得了長足的發(fā)展,但仍然存在許多難題,如體外模型的篩選結(jié)果與整體藥理作用的關(guān)系;對高通量篩選模型的評價標(biāo)準(zhǔn)以及新的藥物作用靶點的研究和發(fā)現(xiàn)等。隨著醫(yī)藥學(xué)的進(jìn)步,高通量篩選技術(shù)在創(chuàng)新藥物的研發(fā)中,一定會開拓出更廣闊的空間。高通量篩選時每天要對數(shù)以千萬的樣品進(jìn)行檢測,工作枯燥,步驟單一,操作人員容易疲勞、出錯。自動化操作系統(tǒng)由計算機(jī)及其操作軟件、自動化加樣設(shè)備、溫孵離心設(shè)備和堆棧4個部分組成。自動化操作系統(tǒng)代替人工操作顯然有諸多優(yōu)勢,它利用計算機(jī)通過操作軟件控制整個實驗過程,編程過程簡潔明了。高通量篩選技術(shù)的應(yīng)用。北京細(xì)胞水平高通量篩選
離子通道是目前藥物發(fā)現(xiàn)的重要靶點。例如在心血管疾病中,離子通道檢測可以應(yīng)用于原發(fā)性電障礙(長QT綜合癥、短QT綜合癥、Brugada綜合癥)等方面的藥物篩選。以NovelKCNQ2channelactivatorsdiscoveredusingfluorescence-basedandautomatedpatch-clamp-basedhigh-throughputscreeningtechniques一文為例,通過一種改進(jìn)的高通量篩選技術(shù),篩選新型KCNQ2通道劑。在這篇文獻(xiàn)中,作者團(tuán)隊以ZTZ240(KCNQ2通道劑)作為陽性對照,通過鉈通量測定法從80000種化合物篩選出了565個比ZTZ240更強活性的化合物。然后使用384孔自動化膜片鉗,進(jìn)一步篩選出了38個KCNQ2通道劑。,使用傳統(tǒng)的膜片鉗表征劑,得到ZG1732和ZG2083(EC50分別為1.04μM和1.37μM)。北京細(xì)胞水平高通量篩選細(xì)胞水平高通量篩選。
環(huán)特生物是一家以斑馬魚生物技術(shù)應(yīng)用為的國家高新生物科技企業(yè)。作為行業(yè)獨一家同時獲得國家CNAS認(rèn)可、CMA資質(zhì)認(rèn)定、AAALAC國際實驗動物認(rèn)證的斑馬魚科技公司,多項技術(shù)成果先后榮獲德國紐倫堡國際發(fā)明金獎、英國國際發(fā)明展金獎及杰出創(chuàng)新獎和中國發(fā)明協(xié)會發(fā)明創(chuàng)業(yè)獎項目獎金獎等多項發(fā)明類國內(nèi)外大獎。高通量篩選(High throughput screening,HTS)技術(shù)是指以分子水平和細(xì)胞水平的實驗方法為基礎(chǔ),以微板形式作為實驗工具載體,以自動化操作系統(tǒng)執(zhí)行試驗過程,以靈敏快速的檢測儀器采集實驗結(jié)果數(shù)據(jù),以計算機(jī)分析處理實驗數(shù)據(jù),在同一時間檢測數(shù)以千萬的樣品,并以得到的相應(yīng)數(shù)據(jù)庫支持運轉(zhuǎn)的技術(shù)體系,它具有微量、快速、靈敏和準(zhǔn)確等特點。簡言之就是可以通過一次實驗獲得大量的信息,并從中找到有價值的信息。
熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)是指在兩個不同的熒光基團(tuán)中,如果一個熒光基團(tuán)(供體Donor)的發(fā)射光譜與另一個基團(tuán)(受體Acceptor)的吸收光譜有一定的重疊,當(dāng)這兩個熒光基團(tuán)間的距離合適時,就可觀察到熒光能量由供體向受體轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象,即以前一種基團(tuán)的激發(fā)波長激發(fā)時,可觀察到后一個基團(tuán)發(fā)射的熒光。常見的供體-受體對之間的有效距離通常為2-6nm,適用于許多蛋白質(zhì)相互作用。染料通常是有機(jī)分子,如與蛋白質(zhì)偶聯(lián)的熒光素和羅丹明,或與感興趣的蛋白質(zhì)融合的熒光蛋白。高通量篩選菌種是什么。
然而傳統(tǒng)的針對單一靶點的研究方法已經(jīng)難以適應(yīng)一些多基因疾病和病毒等相關(guān)藥物的研究。而基于細(xì)胞水平的高內(nèi)涵篩選(high content screening, HCS)技術(shù)實現(xiàn)了對化合物多靶點多參數(shù)的同時檢測,從疾病相關(guān)基因調(diào)控通路和網(wǎng)絡(luò)水平上研究藥物的作用機(jī)制、代謝途徑和潛在毒性等,也使在細(xì)胞水平評價活性化合物的成成為可能。從篩選載體上看,HCS和HTS并沒有的區(qū)別,它的檢測體積并未因檢測指標(biāo)增加而增高,操作步驟同樣簡單可行、可自動化。故HCS在新藥研發(fā)中發(fā)揮越來越重要的作用。高通量篩選是什么技術(shù)。寧夏菌株高通量篩選
通過高通量篩選得到的藥物。北京細(xì)胞水平高通量篩選
高通量篩選時每天要對數(shù)以千萬的樣品進(jìn)行檢測,工作枯燥,步驟單一,操作人員容易疲勞、出錯。自動化操作系統(tǒng)由計算機(jī)及其操作軟件、自動化加樣設(shè)備、溫孵離心設(shè)備和堆棧4個部分組成。自動化操作系統(tǒng)代替人工操作顯然有諸多優(yōu)勢,它利用計算機(jī)通過操作軟件控制整個實驗過程,編程過程簡潔明了。微量篩選系統(tǒng) 由于高通量篩選采用的是細(xì)胞、分子水平的篩選模型.樣品用量一般在微克級(μg),節(jié)省了樣品資源,奠定了“一藥多篩”的物質(zhì)基礎(chǔ),同時節(jié)省了實驗材料,降低了單藥篩選成本。北京細(xì)胞水平高通量篩選