溶化:培養(yǎng)基放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養(yǎng)基中不含有瓊脂,培養(yǎng)基不需要加熱;如果含有瓊脂,則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸,完全溶解后,再補齊所需水,并攪拌均勻。如果配置的培養(yǎng)基量很大,可用不銹鋼鍋加熱溶化,可先用溫水加熱并隨時攪動,防止焦化,如有焦化現象,配制的培養(yǎng)基就不能使用,要重新配制。配制培養(yǎng)基時不可用銅或鐵的容器溶化,因銅或鐵制容器可能會使培養(yǎng)基中的銅和鐵的含量超標,影響實驗(培養(yǎng)基中銅含量大于0.3mg/L,細菌不宜生長,鐵含量超過0.14mg/L,妨礙細菌產有害)。對容易發(fā)生反應,產生沉淀的藥品,要分開溶解,較后加入培養(yǎng)基,如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。培養(yǎng)基pH值的調正:pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化。黑龍江瓊脂培養(yǎng)基制備器
根據培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。a.液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。b.固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂好為常用。固體培養(yǎng)基在實際中用得十分較廣。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。c.半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。黑龍江瓊脂培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進去。
制備培養(yǎng)基的操作要點:用過的玻璃器皿:凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時沖洗,吸取過化學試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經過適當消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿,可用洗液浸泡適當時間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸,其作用是將有機物氧化成可溶性物質,以便沖洗。洗液有很強的腐蝕作用,使用時應特別小心,避免濺到衣服、身體和其他物品上。
培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。對一些需嚴格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內。
培養(yǎng)基滅菌方法有哪五種類型:1、輻射滅菌原理方法:輻射滅菌原理:是用高能電磁輻射和細菌核酸的光化學反應引起細菌死亡。常用的是紫外線,X射線和伽馬射線。主要用于室內空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法:干熱滅菌原理:是采用高溫氧化微生物,使蛋白質變性并濃縮電解質以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法,化藥滅菌原理:使用化藥與微生物細胞中的成分發(fā)生反應,從而使蛋白質變性酶失活。4、過濾滅菌原理方法:過濾滅菌原理:是使用不能滲透的微生物濾膜進行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細孔濾膜對壓縮空氣,酶溶液和其他對熱不穩(wěn)定的復合溶液進行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法:在工業(yè)生產中,用于滅菌對于培養(yǎng)基,管道和設備,通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時間,這稱為濕熱滅菌。濕熱滅菌原理:是直接用蒸汽進行滅菌。蒸汽冷凝后會釋放出大量潛熱。蒸汽具有強大的穿透力,破壞細菌蛋白質和核酸的化學鍵,使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物。培養(yǎng)基制備器一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形。云南培養(yǎng)基制備器售后
高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基pH降低,應在配制培養(yǎng)基時加以調節(jié)。黑龍江瓊脂培養(yǎng)基制備器
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:調培養(yǎng)基pH,雖然中海培養(yǎng)基中含有緩沖物質,可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標準范圍內,但如果配制的培養(yǎng)基不能要求,則必須進行必要的調整。如果您有校準過的pH計,則可以使用pH計。如果沒有,可以使用精確的pH試紙,然后根據需要使用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸進行微調。使用0.1氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸進行調整至所需的pH值。培養(yǎng)基有酸性或堿性,pH值一般為7.4~7.6。對于需要用氫氧化鈉高壓滅菌的介質,將pH調至比要求值高0.1~0.2個單位,因為用氫氧化鈉調節(jié)時,高壓滅菌后介質的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培養(yǎng)基中含有碳酸鈣,則無需調整pH值。黑龍江瓊脂培養(yǎng)基制備器