遼寧培養(yǎng)基制備器定制

來源: 發(fā)布時間:2024-07-07

微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基分裝,準備好的中.海培養(yǎng)基根據用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。分液量不超過容器體積的三分之二。三角瓶不要超過體積的二分之一;瓊脂斜面不要超過試管長度的五分之一。滅菌后斜面應為培養(yǎng)基量的三分之一,底層應為培養(yǎng)基量的三分之二;半固態(tài)瓊脂的體積為三分之一;用于接種或保護細菌的高級瓊脂,分裝試管長度的三分之一和四分之一,接種厭氧菌的量應達到三分之二;瓊脂平板90毫米內徑13~15毫升,內徑70毫米8~10毫升。如果瓊脂平板表面較水,可將平板倒置,置于37℃培養(yǎng)箱中三十分鐘,晾干后使用。每批培養(yǎng)基分裝在二十毫升左右的小玻璃瓶中,與該批培養(yǎng)基同時滅菌,在以確定這批培養(yǎng)基的很終pH值。培養(yǎng)基制備器利用與外部水連接的盤狀熱交換器,能夠使內部迅速冷卻。遼寧培養(yǎng)基制備器定制

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配制培養(yǎng)基的原則:滅菌處理:為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時嚴格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養(yǎng)基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。長時間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培養(yǎng)基常用0.05MPa(110℃)滅菌20~30min某些對糖類要求更高的培養(yǎng)基,可先將糖過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。長時間高溫滅菌也會使磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽離子形成難溶性化合物而產生沉淀。為了防止這類沉淀發(fā)生,可將這些物質分別滅菌,冷卻后再混合;也可在培養(yǎng)基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸,即EDTA)使金屬離子形成可溶性絡合物,防止沉淀的產生。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基pH降低,應在配制培養(yǎng)基時加以調節(jié)。觸摸屏培養(yǎng)基制備器價格一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。

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培養(yǎng)基配置原則:控制pH條件,當培養(yǎng)基中酸性物質積累導致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高。但KH2PO4和K2HPO4緩沖系統(tǒng)只能在一定的pH范圍內(6.4-7.2)起調節(jié)作用。有些微生物,如乳酸菌能大量產酸,上述緩沖系統(tǒng)就難以起到緩沖作用,此時可在培養(yǎng)基中添加難溶的碳酸鹽(如CaCO3)來進行調節(jié),CaCO3難溶于水,不會使培養(yǎng)基pH過度升高,但它可以不斷中和微生物產生的酸,同時釋放出CO2,將培養(yǎng)基pH控制在一定范圍內。在培養(yǎng)基中還存在一些天然的緩沖系統(tǒng),如氨基酸、肽、蛋白質都屬于兩性電解質,也可起到緩沖劑的作用。

培養(yǎng)基的實驗室制備:1.水:除特定要求,實驗室用水的電導率在25℃下應不高于25uS/cm(相當于電阻率≥0.4MΩcm)。微生物污染應不超過103CFU/mL,較好低于102CFU/mL。應根GB/T5750.12或其他有效方法,定期檢驗微生物的污染。2.稱量和復水:稱量所需量的脫水培養(yǎng)基(注意防止吸入粉末,尤其是含有有害物質的培養(yǎng)基粉末),先加入少量水,充分混合(注意避免培養(yǎng)基結塊)后再加水至所需的量。3.溶解和分裝:脫水培養(yǎng)基加水后適當加熱,并不攪拌使其快速溶解,必要時,重新溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱溶解前應浸泡幾分鐘。培養(yǎng)基制備器微生物細胞組成元素的調查或分析,是設計培養(yǎng)基時的重要參考依據。

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血清培養(yǎng)基主要問題:血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌有毒的等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。動物個體不同,血清產地、批號不同,每批質量差異甚大,其成分不能保持一致。取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產生潛在影響,可能導致實驗失敗或實驗結果不可靠性。大規(guī)模生產中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構成動物細胞培養(yǎng)對生產成本的主要部分之一。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基pH降低,應在配制培養(yǎng)基時加以調節(jié)。貴州瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑。遼寧培養(yǎng)基制備器定制

培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多,根據配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據培養(yǎng)功能可分為基礎培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調節(jié)pH,還須進行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質,易被污染或變質。配好后不宜久置,很好現(xiàn)配現(xiàn)用。遼寧培養(yǎng)基制備器定制