培養(yǎng)基的安全分裝:無(wú)菌補(bǔ)料:通過(guò)分裝口可以定量添加無(wú)菌添加劑。大尺寸的分裝口帶有安全鎖。通過(guò)使用一個(gè)瓶子將添加劑添加到分裝開(kāi)口或通過(guò)一個(gè)septum膜,使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無(wú)菌添加。無(wú)菌分裝:培養(yǎng)基制備器的分裝口可以在分裝的時(shí)候打開(kāi),用于無(wú)菌分裝培養(yǎng)基。硅膠管是使用分裝接頭連接到分裝口。為了確保培養(yǎng)基的無(wú)菌分裝,硅膠管和分裝接頭必須提前在滅菌器中滅菌。培養(yǎng)基可以通過(guò)集成的空壓機(jī)產(chǎn)生的無(wú)菌空氣壓力分裝或通過(guò)連接到常見(jiàn)的蠕動(dòng)泵或其他集成成泵的裝置,來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)基的分裝。分裝選項(xiàng):制備和滅菌過(guò)的培養(yǎng)基可以通過(guò)一個(gè)軟管進(jìn)行分裝。在每次滅菌進(jìn)程中,內(nèi)吸管和分裝口也通過(guò)進(jìn)入的蒸汽進(jìn)行了滅菌。分裝軟管和連接到該軟管的分裝接頭必須使用合適的蒸汽滅菌工藝預(yù)先滅菌,并且必須在無(wú)菌條件下連接到分裝口。培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。山東瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基中血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素:一是取材對(duì)象,二是取材過(guò)程。用于取材的動(dòng)物應(yīng)健康無(wú)病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi),取材過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定?!队脛?dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求:牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國(guó)家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。有些國(guó)家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。證明所用牛血清中不含對(duì)所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌,保證無(wú)菌。無(wú)細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國(guó)家要求無(wú)細(xì)菌噬菌體污染。對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器品牌培養(yǎng)基制備器利用各種動(dòng)、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。
購(gòu)買(mǎi)的培養(yǎng)基到貨后,應(yīng)有專人做好接受和驗(yàn)收工作,應(yīng)仔細(xì)核對(duì)生產(chǎn)企業(yè)提供的資料、培養(yǎng)基名稱、規(guī)格數(shù)量、外觀特征、批號(hào)、保質(zhì)期是否符合要求。每批培養(yǎng)基到貨后都應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基的質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè),滿足檢測(cè)方法規(guī)定的要求后方可投入使用。培養(yǎng)基的儲(chǔ)存:干粉培養(yǎng)基應(yīng)保存在陰涼干燥處,要避免陽(yáng)光直射;未開(kāi)瓶的培養(yǎng)基在室溫下的保存期限以廠家提供為準(zhǔn),開(kāi)瓶后的干粉培養(yǎng)基易吸濕,應(yīng)注意防潮并盡快用完。應(yīng)定期對(duì)儲(chǔ)存中的培養(yǎng)基進(jìn)行常規(guī)檢查,如容器密閉性復(fù)查、開(kāi)封日期、內(nèi)容物的感官檢查,如果培養(yǎng)基發(fā)生結(jié)塊、顏色異常和其他變質(zhì)跡象就不能再使用。
制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):用過(guò)的玻璃器皿:凡確無(wú)病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時(shí)沖洗,吸取過(guò)化學(xué)試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數(shù)量后再集中進(jìn)行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經(jīng)過(guò)適當(dāng)消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿,可用洗液浸泡適當(dāng)時(shí)間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸,其作用是將有機(jī)物氧化成可溶性物質(zhì),以便沖洗。洗液有很強(qiáng)的腐蝕作用,使用時(shí)應(yīng)特別小心,避免濺到衣服、身體和其他物品上。培養(yǎng)基制備器都是微處理器控制的,而且滅菌之后保持的溫度是可以預(yù)設(shè)的。
加棉塞:分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過(guò)濾空氣,避免污染。棉塞應(yīng)采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無(wú)法使用。制作棉塞時(shí),要根據(jù)棉塞大小將棉花鋪展成適當(dāng)厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時(shí)左手食指與姆指稍稍緊握,就會(huì)形成1個(gè)長(zhǎng)棒形的棉塞。棉塞作成后,應(yīng)迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過(guò)緊過(guò)松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)或瓶?jī)?nèi),上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上厚紙用繩捆札,準(zhǔn)備滅菌。培養(yǎng)基制備器保證了配制和滅菌的培養(yǎng)基具有更高的質(zhì)量,整個(gè)過(guò)程,在一個(gè)設(shè)定溫度內(nèi)。瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器品牌
低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養(yǎng)基時(shí)要掌握營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度。山東瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配置原則:控制pH條件,培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類(lèi)型微生物的生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類(lèi)微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的很適pH條件各不相同,一般來(lái)講,細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長(zhǎng),酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長(zhǎng)。值得注意的是,在微生物生長(zhǎng)繁殖和代謝過(guò)程中,由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對(duì)培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制,往往導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對(duì)恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8。山東瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器