培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器

來源: 發(fā)布時間:2024-04-01

培養(yǎng)基防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養(yǎng)基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對無毒區(qū)應保持相對負壓,防止病毒對培養(yǎng)細胞(尤其是細胞庫)的污染。制備培養(yǎng)基的操作要點:固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器

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如何避免沉淀物的產生:在使用血清的時候,注意下列的操作:①解凍血清時,請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),非常容易產生沉淀物。②解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。③勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。④血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。⑤若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。內蒙古培養(yǎng)基制備器價格在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑。

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微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基分裝,準備好的中.海培養(yǎng)基根據用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。分液量不超過容器體積的三分之二。三角瓶不要超過體積的二分之一;瓊脂斜面不要超過試管長度的五分之一。滅菌后斜面應為培養(yǎng)基量的三分之一,底層應為培養(yǎng)基量的三分之二;半固態(tài)瓊脂的體積為三分之一;用于接種或保護細菌的高級瓊脂,分裝試管長度的三分之一和四分之一,接種厭氧菌的量應達到三分之二;瓊脂平板90毫米內徑13~15毫升,內徑70毫米8~10毫升。如果瓊脂平板表面較水,可將平板倒置,置于37℃培養(yǎng)箱中三十分鐘,晾干后使用。每批培養(yǎng)基分裝在二十毫升左右的小玻璃瓶中,與該批培養(yǎng)基同時滅菌,在以確定這批培養(yǎng)基的很終pH值。

配制培養(yǎng)基的原則:根據培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營養(yǎng)物質。由于微生物營養(yǎng)類型復雜,不同微生物有不同的營養(yǎng)要求。因此,要根據不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質,配制針對性強的培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物有較強的合成能力,能以簡單的無機物如co2和無機鹽合成復雜的細胞物質。因此,培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應由簡單的無機物組成。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱,不能以CO2作為碳源或主要碳源,故應在培養(yǎng)基中至少添加一種有機物。注意營養(yǎng)物質的濃度與配比要合適:微生物只有在營養(yǎng)物質濃度及其比例合適時才能良好生長。營養(yǎng)物質濃度過低不能滿足現(xiàn)生長需要,過高又抑制其生長。例如,適量的蔗糖是異養(yǎng)微生物的良好碳源和能源,但高濃度蔗糖則抑制菌體生長。金屬離子是微生物生長所不可缺少的礦質養(yǎng)分,但濃度擴大,尤其是重金屬離子,反而抑制其生長,甚至產生殺菌作用。低滲溶液則使細胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養(yǎng)基時要掌握營養(yǎng)物質的濃度。

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培養(yǎng)基的分類:培養(yǎng)基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。培養(yǎng)基制備器滅菌之后保持的溫度是可以預設的。殺菌劑裝入口寬大,并附有保險鎖。內蒙古瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器

制備培養(yǎng)基的操作要點:體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻。培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器

制備培養(yǎng)基有什么要求:1、根據培養(yǎng)基配方的成分按量稱取,然后溶于蒸餾水中,在使用前對應用的試劑藥品應進行質量檢驗。2、PH測定及調節(jié):PH測定要在培養(yǎng)基冷至室溫時進行,因在熱或冷的情況下,其PH有一定差異,當測定好時,按計算量加入堿或酸混勻后應再測試一次。培養(yǎng)基PH值一定要準確,否則會影響微生物的生長或影響結果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高,故不宜滅菌壓力過高或次數(shù)太多,以免影響培養(yǎng)基的質量,指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調完PH后再加入培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器