微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基溶化,將中海培養(yǎng)基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,則不需要對培養(yǎng)基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。待培養(yǎng)基完全溶解后再加入適量的水攪拌均勻。如準備的北京中海培養(yǎng)基較多,在不銹鋼鍋中融化加熱,可以用溫水加熱,需不停攪拌,防止焦化。如果不小心出現(xiàn)焦化現(xiàn)象,則制備好的培養(yǎng)基將無法使用,必須重新配制中海生物培養(yǎng)基。不要使用銅或鐵容器溶解制備培養(yǎng)基,因為銅或鐵容器可能會導致容器內(nèi)培養(yǎng)基中銅、鐵超標,影響實驗結(jié)果,其中培養(yǎng)基中銅含量大于0.3毫克每升,細菌不適宜生長。鐵含量超過0.14毫克每升,防止細菌產(chǎn)生有毒的。容易發(fā)生反應和沉淀的藥物應單獨溶解,然后加入培養(yǎng)基中,如磷酸氫二鉀和硫酸鎂。培養(yǎng)基制備器血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器售后
配制培養(yǎng)基的原則:調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh)各種微生物對培養(yǎng)基的Eh要求不同。適宜好氧微生物生長的Eh值一般為+0.3~+0.4V,厭氧微生物只能在+0.1V以下生長,因此,培養(yǎng)好氧微生物必須保證氧的供應,可在培養(yǎng)基中加入氧化劑提高Eh值。調(diào)節(jié)滲透壓多數(shù)微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化。培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度過大,會使?jié)B透壓過高,使細胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長。低滲溶液則使細胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養(yǎng)基時要掌握營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。常在培養(yǎng)基中加人適量的Nacl以提高滲透壓。原料來源的選擇力求節(jié)約:配制培養(yǎng)基還應遵循力求節(jié)約的原則,盡量選用價格便宜、來源方便的原料。特別是在工業(yè)發(fā)酵中,培養(yǎng)基用量大,更應注意利用低成本的原料,降低產(chǎn)品成本。天津大容量 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的不正確制備會導致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。
培養(yǎng)基配置原則:原料來源的選擇,在配制培養(yǎng)基時應盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分,特別是在發(fā)酵工業(yè)中,培養(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟價值。例如,在微生物單細胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中,常常利用糖蜜(制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液)、乳清(乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液)、豆制品工業(yè)廢液及黑廢液(造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿)等都可作為培養(yǎng)基的原料。再如,工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水、廢渣作原料,而在我國農(nóng)村,已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料。另外,大量的農(nóng)副產(chǎn)品或制品,如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是常用的發(fā)酵工業(yè)原料。
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規(guī)定進行配制外.一般均應盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對.再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源。2.培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應有記錄,包括培養(yǎng)推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。好終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,復制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基制備器完全滅菌后用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定,一般都是在無菌狀態(tài)下儲存,定量使用的。
制備培養(yǎng)基的小技巧1.培養(yǎng)基可按制備也可使用按生產(chǎn)的符合規(guī)定的商品化成品培養(yǎng)基,脫水培養(yǎng)基除附有和使用說明外還應注明有效期、貯存條件、適用性試驗的質(zhì)控菌株和用途。配制時應按使用說明上的要求操作,受潮結(jié)塊不能使用,以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求。2.配制培養(yǎng)基使用的容器應是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角燒瓶、刻度吸管、試管、培養(yǎng)皿等。使用的器皿應洗凈,用蒸餾水沖凈,烘干后方可使用。禁用金屬容器如鐵、銅、鋁容器,避免金屬離子與培養(yǎng)基成分結(jié)合,生成有害物質(zhì),影響細菌生長。液體培養(yǎng)基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。廣西培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌。不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基的分裝:大批量配制時使用的自動分配器須經(jīng)校準和確認。每次使用前后,均要對分配器的管道系統(tǒng)進行沖洗,在分裝無菌培養(yǎng)基前,則要采用無菌硅膠管。固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌后根據(jù)需要分裝平皿或試管。平皿:傾注平皿,應在無菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發(fā)。斜面:制備低層斜面分裝于試管,約占容積1/5,滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基,如沾有培養(yǎng)基應用布抹去,以避免污染。不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器售后