培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源(生長(zhǎng)因子)等。(1)碳源:能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無(wú)機(jī)碳源;糖類、石油、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。(2)氮源:能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N2、NH3、NO3-、NH4+(無(wú)機(jī)氮源)蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有機(jī)氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。培養(yǎng)基還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)PH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性,培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無(wú)氧的條件。培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。遼寧自動(dòng)培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基質(zhì)量測(cè)試:(1)澄清度:水是細(xì)胞培養(yǎng)基的溶劑。細(xì)胞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分只有完全溶解于水才能被細(xì)胞吸收攝取,細(xì)胞才能生長(zhǎng)增殖,因此細(xì)胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用。該項(xiàng)目是通過(guò)對(duì)水溶解后的細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度檢查,判斷細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度。按中國(guó)藥典2005年版二部附錄ⅨB進(jìn)行。(2)pH值:哺乳類動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)需要合適的酸堿度,pH過(guò)高或者過(guò)低都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。pH值的測(cè)定也可以檢查細(xì)胞培養(yǎng)基的批間差。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細(xì)胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。按中國(guó)藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行;加入規(guī)定量的碳酸氫鈉到上述溶液中,按中國(guó)藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行。新疆培養(yǎng)基制備器報(bào)價(jià)培養(yǎng)基是生物制品領(lǐng)域中常用的物質(zhì),在細(xì)菌和細(xì)胞培養(yǎng)中十分必要。
根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來(lái)區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。1)液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒(méi)有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài)。2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分普遍。在實(shí)驗(yàn)室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗(yàn)雜菌、計(jì)數(shù)、保藏、生物測(cè)定等。3)半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來(lái)觀察微生物的動(dòng)力,有時(shí)用來(lái)保藏菌種。
簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,需調(diào)整培養(yǎng)基成分,介質(zhì)中使用的化學(xué)物質(zhì)應(yīng)該是化學(xué)純品,銅鍋或鐵鍋易導(dǎo)致銅、鐵混入培養(yǎng)基,使細(xì)菌難以繁殖。用不銹鋼鍋加熱溶解較為適宜。溶解于水的鍋?zhàn)?,可用溫水加熱,隨時(shí)攪拌,防止結(jié)焦。若發(fā)現(xiàn)結(jié)焦,則不能使用介質(zhì),需重新調(diào)配。在溶解大多數(shù)固體成分之后,用少量熱將其全部溶解,直到沸騰。簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,需調(diào)整培養(yǎng)基的pH值,由于加熱消毒過(guò)程中培養(yǎng)基的pH值會(huì)發(fā)生變化,因此應(yīng)在培養(yǎng)基組分完全溶解后,調(diào)整pH值。舉例來(lái)說(shuō),牛肉汁的pH值下降了0.2左右,而腸浸出物的pH值則明顯上升。所以,在這一步中,操作者要注重不斷探索經(jīng)驗(yàn),掌握培養(yǎng)基的很終pH值,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。在調(diào)整pH值后,要將其煮沸幾分鐘,以利于培養(yǎng)基沉淀。培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂,較好一次完成,不要中斷。
培養(yǎng)基制備器:培養(yǎng)基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個(gè)步驟:用水、稱量、溶解復(fù)水、滅菌、pH測(cè)定、保存。1、必須選用專門(mén)純凈水或者經(jīng)消毒過(guò)后的無(wú)菌水。2、培養(yǎng)基進(jìn)行復(fù)水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長(zhǎng)。3、容器的體積須大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍,預(yù)防出現(xiàn)溢出情況。4、在對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行加熱時(shí),若培養(yǎng)基內(nèi)含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時(shí)間。加熱的過(guò)程中不斷進(jìn)行攪拌防止出現(xiàn)培養(yǎng)基結(jié)底炭化從而造成成分損害。部分培養(yǎng)基則需要使用沸水進(jìn)行加熱,預(yù)防發(fā)生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養(yǎng)基進(jìn)行再融化時(shí)應(yīng)使用沸水浴或流動(dòng)蒸汽進(jìn)行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養(yǎng)基應(yīng)棄去。6、而當(dāng)對(duì)培養(yǎng)基實(shí)施滅菌時(shí),需嚴(yán)格按照說(shuō)明規(guī)范操作。但是也不能盲目按照說(shuō)明的時(shí)間進(jìn)行,需結(jié)合實(shí)際情況,合理調(diào)節(jié)滅菌時(shí)間,防止出現(xiàn)培養(yǎng)基滅菌過(guò)度而造成的成分變性。培養(yǎng)基制備器注意不要過(guò)度干燥。商品化的平板瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)按照廠商提供的說(shuō)明使用。新疆培養(yǎng)基制備器報(bào)價(jià)
全自動(dòng)培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):兩個(gè)存儲(chǔ)器;存儲(chǔ)器高度可選。遼寧自動(dòng)培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1、培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸2、培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行PH的初步調(diào)正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的好終PH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。PH調(diào)整后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。3、培養(yǎng)基的過(guò)濾澄清液體培養(yǎng)基必須較全澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)明顯沉淀,因此,須要采用過(guò)濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾法,濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。遼寧自動(dòng)培養(yǎng)基制備器