根據培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。1)液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養(yǎng)基在實際中用得十分普遍。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。3)半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。固體培養(yǎng)基根據性質又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。河北培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
簡單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個主要步驟:需要對其進行消毒處理,普通介質使用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。本發(fā)明適用于各種介質的制備,如無特殊要求,可用于滅菌。一些熱成分,如碳水化合物,應該單獨制備20%或更多的濃縮液,過濾或間斷殺菌,然后通過無菌操作技術加入到培養(yǎng)液中。在低溫下,明膠培養(yǎng)基也能殺菌。血、體液及素應經無菌處理后,加至約50℃冷卻培養(yǎng)基中。需要對培養(yǎng)基的質量進行檢測。每次處理完培養(yǎng)基,都要仔細檢查,如破損、浸漬、顏色異常、棉塞污染等,要進行篩選和棄置,才能確定pH值。培養(yǎng)基培養(yǎng)一晚,若有細菌生長,培養(yǎng)基將被丟棄。常規(guī)菌株接種1×2管或瓶培養(yǎng)基,24h培養(yǎng),對生長不良或無菌的菌株進行培養(yǎng),追蹤其產生原因,并反復接種。如不發(fā)生變化,應丟棄培養(yǎng)基,禁止使用。上海Systec培養(yǎng)基制備器制備培養(yǎng)基的操作要點:液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的。
制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基:(1)方法步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)倒平板操作的步驟:①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固,大約需5~10min。然后,將平板倒過來放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了。
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1.培養(yǎng)塞pH的初步調整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養(yǎng)基的較終pH,保證培養(yǎng)基的質量。pH調正后,還應將培養(yǎng)基煮沸數分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。2.培養(yǎng)基的過濾澄清液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。在發(fā)酵工業(yè)中,培養(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經濟價值。
培養(yǎng)基的分類:培養(yǎng)基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。培養(yǎng)基制備器全自動程序,無人值守;分裝過程無需人工干預。內蒙古培養(yǎng)基制備器價格
有的培養(yǎng)基還含有素和色素,用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。河北培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的儲存:干粉培養(yǎng)基應保存在陰涼干燥處,要避免陽光直射;未開瓶的培養(yǎng)基在室溫下的較長保存2年,開瓶后的干粉培養(yǎng)基易吸濕,應注意防潮并在6個月內用完。應定期對儲存中的培養(yǎng)基進行常規(guī)檢查,如容器密閉性復查、一次開封日期、內容物的感官檢查,如果培養(yǎng)基發(fā)生結塊、顏色異常和其他變質跡象就不能再使用。培養(yǎng)基的制備和使用是微生物實驗室檢測工作的重要環(huán)節(jié),培養(yǎng)基自身質量的優(yōu)劣、保存是否得當、配制使用是否正確等都直接影響到檢測結果的準確性。河北培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器