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培養(yǎng)基的稱量和溶解:小心稱量所需量的脫水合成培養(yǎng)基(必要時(shí)佩戴口罩或在通風(fēng)柜中操作,以防吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末),先加入適量的水,充分混合(注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊),然后加水至所需的量后適當(dāng)加熱,并重復(fù)或連續(xù)攪拌使其快速分散,必要時(shí)應(yīng)完全溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱前應(yīng)浸泡幾分鐘。注意:培養(yǎng)基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)攪動(dòng)、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時(shí)嚴(yán)格滅菌。黑龍江培養(yǎng)基制備儀品牌
培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無(wú)特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。某些熱敏成分,如糖類,應(yīng)另行配成20%或更高的濃液,以過(guò)濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無(wú)菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體液和等則應(yīng)以無(wú)菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出,冷至55℃-60℃時(shí),擺置成適當(dāng)斜面,待其自然凝固。廣東培養(yǎng)基制備儀售后液體培養(yǎng)基在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周圍,形成透過(guò)養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。
培養(yǎng)基滅菌方法有哪五種類型:1、輻射滅菌原理方法:輻射滅菌原理:是用高能電磁輻射和細(xì)菌核酸的光化學(xué)反應(yīng)引起細(xì)菌死亡。常用的是紫外線,X射線和伽馬射線。主要用于室內(nèi)空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法:干熱滅菌原理:是采用高溫氧化微生物,使蛋白質(zhì)變性并濃縮電解質(zhì)以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法,化藥滅菌原理:使用化藥與微生物細(xì)胞中的成分發(fā)生反應(yīng),從而使蛋白質(zhì)變性酶失活。4、過(guò)濾滅菌原理方法:過(guò)濾滅菌原理:是使用不能滲透的微生物濾膜進(jìn)行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細(xì)孔濾膜對(duì)壓縮空氣,酶溶液和其他對(duì)熱不穩(wěn)定的復(fù)合溶液進(jìn)行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法:在工業(yè)生產(chǎn)中,用于滅菌對(duì)于培養(yǎng)基,管道和設(shè)備,通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時(shí)間,這稱為濕熱滅菌。濕熱滅菌原理:是直接用蒸汽進(jìn)行滅菌。蒸汽冷凝后會(huì)釋放出大量潛熱。蒸汽具有強(qiáng)大的穿透力,破壞細(xì)菌蛋白質(zhì)和核酸的化學(xué)鍵,使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物。培養(yǎng)基長(zhǎng)時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。
培養(yǎng)基的重要性:培養(yǎng)基的質(zhì)量是微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的基礎(chǔ),事關(guān)檢測(cè)工作的準(zhǔn)確性、可靠性,在微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作中舉足輕重。如果在工作中忽視任何一個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量問(wèn)題,都將導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果科學(xué)性、客觀性的偏離。因此,加強(qiáng)培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制,認(rèn)真地做好培養(yǎng)基的質(zhì)控工作,不斷完善和提高培養(yǎng)基的質(zhì)控水平,才能為微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室提供高質(zhì)量的培養(yǎng)基。滅菌,一般培養(yǎng)基采用濕熱滅菌,即高壓蒸汽滅菌。第五,pH測(cè)定,微生物必須在適宜的pH范圍內(nèi)才能正常生長(zhǎng)繁殖或體現(xiàn)其生物特性。調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh)各種微生物對(duì)培養(yǎng)基的Eh要求不同。河北不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備儀
在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)稱為液中培養(yǎng)、液體培養(yǎng)或液內(nèi)培養(yǎng)。黑龍江培養(yǎng)基制備儀品牌
培養(yǎng)基的類型-根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來(lái)區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。1)液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒(méi)有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài)。2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分多方面。在實(shí)驗(yàn)室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗(yàn)雜菌、計(jì)數(shù)、保藏、生物測(cè)定等。3)半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來(lái)觀察微生物的動(dòng)力,有時(shí)用來(lái)保藏菌種。黑龍江培養(yǎng)基制備儀品牌
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