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培養(yǎng)基中血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素:一是取材對(duì)象,二是取材過(guò)程。用于取材的動(dòng)物應(yīng)健康無(wú)病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi),取材過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定?!队脛?dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求:牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國(guó)家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。有些國(guó)家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。證明所用牛血清中不含對(duì)所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌,保證無(wú)菌。無(wú)細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國(guó)家要求無(wú)細(xì)菌噬菌體污染。對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內(nèi)。江西培養(yǎng)基制備器多少錢(qián)
培養(yǎng)基制備的九個(gè)步驟關(guān)注要點(diǎn):步驟一:稱(chēng)取數(shù)量:用1/100的電子天平稱(chēng)出培養(yǎng)基所需的藥物。首先參照配方計(jì)算出配制相應(yīng)培養(yǎng)基需要各成分的數(shù)量,然后用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)取重量。步驟二:培養(yǎng)基溶化:將培養(yǎng)基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,則不需要對(duì)培養(yǎng)基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。步驟三:調(diào)培養(yǎng)基pH:雖然培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì),可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi),但如果配制的培養(yǎng)基不能要求,則必須進(jìn)行必要的調(diào)整。如果您有校準(zhǔn)過(guò)的pH計(jì),則可以使用pH計(jì)。步驟四:培養(yǎng)基過(guò)濾:如果對(duì)配制的培養(yǎng)基沒(méi)有特殊要求,這一步可以省略。步驟五:培養(yǎng)基分裝:準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動(dòng)分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。確定這批培養(yǎng)基的較終pH值。步驟六:培養(yǎng)基滅菌處理:分裝完成的培養(yǎng)基應(yīng)馬上滅菌。廣西培養(yǎng)基制備器多少錢(qián)在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)稱(chēng)為液中培養(yǎng)、液體培養(yǎng)或液內(nèi)培養(yǎng)。
培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長(zhǎng)繁殖的,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類(lèi)物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類(lèi)很多,根據(jù)配制原料的來(lái)源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線(xiàn)菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié)pH,還須進(jìn)行滅菌,通常有高溫滅菌和過(guò)濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。配好后不宜久置,很好現(xiàn)配現(xiàn)用。
簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個(gè)主要步驟:需要選擇培養(yǎng)基配方,同一種培養(yǎng)基,其表達(dá)方式往往存在著差異。所以,除了應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)方法的規(guī)定編制之外,我們一般應(yīng)盡可能收集有關(guān)數(shù)據(jù),加以比較和核對(duì),然后根據(jù)自己的目的選擇和記錄數(shù)據(jù)來(lái)源。需記錄培養(yǎng)基的制備,培養(yǎng)基的制備記錄包括培養(yǎng)基的名稱(chēng)、配方及其來(lái)源、pH值、滅菌溫度、時(shí)間、配制日期、制備人等,并且要復(fù)印記錄和保存原始記錄備查。對(duì)副本的記錄應(yīng)該和培養(yǎng)基一起保存,以防出現(xiàn)混亂。需稱(chēng)重培養(yǎng)基的成分,培養(yǎng)基成分要準(zhǔn)確稱(chēng)量,并注意防止混淆。每一種成分稱(chēng)量完畢后,都要在分裝的一面打上記號(hào),然后將分裝的藥物一起放在左邊。每一個(gè)成分稱(chēng)量完之后,都會(huì)向右移動(dòng)。全部稱(chēng)量完畢,應(yīng)再次檢查。。液體培養(yǎng)基是培養(yǎng)基物理分類(lèi)一種,是相對(duì)固體培養(yǎng)基而言的,是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被較廣用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x中起重要作用,如SeO3、硒等。液體培養(yǎng)基具有進(jìn)行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。貴州培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試
培養(yǎng)基長(zhǎng)時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞,如使糖類(lèi)物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。江西培養(yǎng)基制備器多少錢(qián)
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:1.水:除特定要求,實(shí)驗(yàn)室用水的電導(dǎo)率在25℃下應(yīng)不高于25uS/cm(相當(dāng)于電阻率≥0.4MΩcm)。微生物污染應(yīng)不超過(guò)103CFU/mL,較好低于102CFU/mL。應(yīng)根GB/T5750.12或其他有效方法,定期檢驗(yàn)微生物的污染。2.稱(chēng)量和復(fù)水:稱(chēng)量所需量的脫水培養(yǎng)基(注意防止吸入粉末,尤其是含有有害物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末),先加入少量水,充分混合(注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊)后再加水至所需的量。3.溶解和分裝:脫水培養(yǎng)基加水后適當(dāng)加熱,并不攪拌使其快速溶解,必要時(shí),重新溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱溶解前應(yīng)浸泡幾分鐘。江西培養(yǎng)基制備器多少錢(qián)
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