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Todd-Hewitt肉湯(THB)是一種專為培養(yǎng)鏈球菌屬細(xì)菌設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,尤其適合于肺炎鏈球菌和B群鏈球菌的培養(yǎng)。以下是Todd-Hewitt肉湯的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**成分**:Todd-Hewitt肉湯的主要成分包括牛肉浸粉、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉、碳酸氫鈉和磷酸氫二鈉。這些成分為細(xì)菌提供氮源、碳源、維生素和生長因子,同時(shí)維持細(xì)胞滲透壓和培養(yǎng)基的pH值。2.**pH緩沖**:培養(yǎng)基通過碳酸氫鈉和磷酸氫二鈉進(jìn)行緩沖,以中和葡萄糖發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酸性物質(zhì),保持適宜的pH環(huán)境。3.**應(yīng)用**:它常用于血清學(xué)分型前的鏈球菌培養(yǎng),以及制備抗原性鏈球菌溶血素。此外,它也適用于β-溶血素的制備,特別是用于金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)。4.**制備方法**:通常將Todd-Hewitt肉湯的干粉與蒸餾水混合,加熱煮沸至完全溶解,調(diào)整pH至7.8±0.2,然后進(jìn)行高壓滅菌,以確保無菌。5.**質(zhì)量控制**:在使用Todd-Hewitt肉湯時(shí),會(huì)進(jìn)行質(zhì)量控制以確保培養(yǎng)基支持目標(biāo)微生物的生長。例如,對(duì)于肺炎鏈球菌和B群鏈球菌,培養(yǎng)后應(yīng)觀察到良好的生長表現(xiàn)。6.**儲(chǔ)存條件**:未開封的Todd-Hewitt肉湯干粉通常在常溫下保存,保質(zhì)期為三年。
CAS培養(yǎng)基,也稱為ChromeAzurolS(CAS)檢測(cè)培養(yǎng)基,主要用于檢測(cè)微生物是否產(chǎn)生鐵載體(siderophore)。鐵載體是一類能特異性結(jié)合鐵離子并供給微生物細(xì)胞的低分子量物質(zhì),對(duì)于微生物在缺鐵環(huán)境中的生長至關(guān)重要。CAS培養(yǎng)基的特點(diǎn)主要包括:1.**成分**:CAS培養(yǎng)基包含鉻天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化銨(HDTMA)、鐵離子等成分,這些成分與微生物分泌的鐵載體反應(yīng),產(chǎn)生顏色變化,從而可以判斷微生物是否產(chǎn)生鐵載體。此外,培養(yǎng)基中還包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸鎂、氯化鈣等,提供微生物生長所需的碳源、氮源和其他生長因子。2.**顏色變化**:當(dāng)微生物產(chǎn)生的鐵載體與CAS培養(yǎng)基中的復(fù)合物結(jié)合后,會(huì)奪走鐵離子,使培養(yǎng)基顏色由藍(lán)色變?yōu)殚冱S色,出現(xiàn)鐵載體分泌圈,這有助于判斷細(xì)菌是否產(chǎn)生鐵載體。3.**pH值**:CAS培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.8±0.1(25℃),以保證微生物的生長和鐵載體的活性。4.**配制方法**:CAS培養(yǎng)基的配制方法相對(duì)復(fù)雜,但一些產(chǎn)品如Coolaber改良的CAS瓊脂培養(yǎng)基已經(jīng)進(jìn)行了改良,減少了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備時(shí)間。該產(chǎn)品分為培養(yǎng)基基礎(chǔ)、已滅菌的緩沖劑和已滅菌的CAS檢測(cè)液三個(gè)部分,使用時(shí)只需將這些組分按說明混合即可。小牛浸液瓊脂對(duì)細(xì)菌的糖發(fā)酵能力和硫化氫產(chǎn)生能力進(jìn)行測(cè)試,這是 TSI 培養(yǎng)基的重要作用。
霉菌分離培養(yǎng)基的pH值對(duì)霉菌的生長有影響。不同的霉菌種類對(duì)pH值的適應(yīng)性各有差異,大多數(shù)霉菌可以在pH值4.5—5.5范圍內(nèi)生長良好。例如,黑曲霉在pH值為8.0時(shí)生長狀況比較好,形成的菌絲球直徑較大且均勻。而當(dāng)pH值偏離這個(gè)范圍時(shí),霉菌的生長可能會(huì)受到抑制。pH值會(huì)影響細(xì)胞質(zhì)膜的穩(wěn)定性和透性以及營養(yǎng)物質(zhì)的溶解性,進(jìn)而影響霉菌對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收,同時(shí)pH值還會(huì)影響霉菌體內(nèi)酶促反應(yīng)的速率。因此,培養(yǎng)基的pH值對(duì)霉菌的生長速率、菌落形態(tài)和孢子形成等都有重要作用。在實(shí)際應(yīng)用中,通過調(diào)整培養(yǎng)基的pH值可以優(yōu)化霉菌的生長條件,也可以用于選擇性地分離特定的霉菌種類。在實(shí)驗(yàn)室中,可以通過配制不同pH值的培養(yǎng)基來培養(yǎng)不同的霉菌或選擇性地分離某種霉菌。例如,通過調(diào)整pH值可以抑制某些競(jìng)爭性微生物的生長,從而促進(jìn)目標(biāo)霉菌的生長。此外,了解霉菌對(duì)pH值的適應(yīng)性也有助于控制霉菌的生長,防止其在食品和其他行業(yè)中造成問題。
腦心浸出液肉湯(BrainHeartInfusionBroth,簡稱BHI)是一種使用的微生物培養(yǎng)基,其特點(diǎn)如下:1.**營養(yǎng)豐富**:BHI培養(yǎng)基含有牛心浸粉、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉和磷酸氫二鈉等成分,為多種微生物提供碳源、氮源、維生素和生長因子。這種培養(yǎng)基特別適合培養(yǎng)苛養(yǎng)型致病微生物,如鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌等。2.**pH穩(wěn)定**:BHI培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.4±0.2(25℃),這為微生物的生長提供了適宜的酸堿環(huán)境。3.**非選擇性**:BHI培養(yǎng)基是非選擇性的,意味著它能夠支持細(xì)菌、霉菌和酵母菌等多種微生物的生長。4.**應(yīng)用廣**:BHI培養(yǎng)基可用于從臨床標(biāo)本中進(jìn)行需氧細(xì)菌的初步分離,也可用于培養(yǎng)單增李斯特菌、葡萄球菌等,以及進(jìn)行血漿凝固酶試驗(yàn)和藥敏實(shí)驗(yàn)。5.**制備方法**:將BHI培養(yǎng)基的干粉加入到蒸餾水中,加熱煮沸以完全溶解,然后在121°C條件下高壓蒸汽滅菌15分鐘。6.**儲(chǔ)存條件**:BHI培養(yǎng)基通常在避光、干燥的條件下保存,未開封的保質(zhì)期可達(dá)三年。7.**質(zhì)量控制**:使用特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行生長測(cè)試,確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn),如糞腸球菌ATCC29212、金黃色葡萄球菌ATCC6538等。KI培養(yǎng)基中含有葡萄糖和乳糖,以及硫酸亞鐵作為指示劑。硫酸亞鐵與硫化氫反應(yīng),生成黑色的硫化亞鐵沉淀。
Preston肉湯基礎(chǔ)是一種專門用于培養(yǎng)空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)的選擇性增菌培養(yǎng)基。其特點(diǎn)和應(yīng)用如下:1.**成分**:Preston肉湯基礎(chǔ)包含牛肉浸粉、蛋白胨、氯化鈉、木酮酸鈉、焦亞硫酸鈉和硫酸亞鐵等成分,這些成分為細(xì)菌提供碳氮源、維生素和生長因子,同時(shí)維持細(xì)菌平衡的滲透壓,并提供細(xì)菌生長需要的金屬離子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0±0.2(25℃)。3.**選擇性添加劑**:Preston肉湯基礎(chǔ)通常需要添加特定的添加劑,如多粘菌素B、利福平和甲氧芐啶,這些添加劑能夠抑制其他細(xì)菌的生長,而放線菌酮?jiǎng)t用于抑制菌生長。4.**制備方法**:稱取Preston肉湯基礎(chǔ)25.75g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,每瓶200ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時(shí),每瓶加入一支Preston肉湯添加劑和10ml無菌裂解馬血,混勻,分裝試管,備用。5.**注意事項(xiàng)**:培養(yǎng)基中含少量硫酸亞鐵,滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀。6.**應(yīng)用**:Preston肉湯基礎(chǔ)用于空腸彎曲桿菌的選擇性增菌培養(yǎng),特別適用于從食品和臨床樣本中分離和增菌空腸彎曲桿菌。LB瓊脂主要由胰蛋白胨(10g/L)、酵母提取物(5g/L)、氯化鈉(10g/L)和瓊脂(15-20g/L)組成。巴氏芽孢桿菌固體培養(yǎng)基
LB瓊脂(Miller)是一種用于細(xì)菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E. coli)等革蘭氏陰性菌的培養(yǎng)。硝酸鐵瓊脂
尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測(cè)細(xì)菌是否具有尿素酶活性的微生物培養(yǎng)基。其特點(diǎn)主要包括:1.**成分**:尿素培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、氯化鈉、磷酸二氫鉀、尿素、葡萄糖、酚紅指示劑和瓊脂等。蛋白胨提供碳源和氮源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀作為緩沖劑;尿素作為底物檢測(cè)細(xì)菌是否具有尿素酶活性;酚紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保證微生物的生長環(huán)境和酶活性的發(fā)揮。3.**尿素酶檢測(cè)**:某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶,將尿素分解產(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅指示劑在pH升高時(shí)變色(通常為粉紅色),通過觀察顏色變化來判斷細(xì)菌是否具有尿素酶活性。4.**配制方法**:將除尿素和瓊脂以外的成分配好,并校正pH,加入瓊脂,加熱溶化并分裝。高壓滅菌后,冷至50~55℃,加入經(jīng)除菌過濾的尿素溶液,pH應(yīng)為7.2±0.1。分裝于滅菌試管內(nèi),放成斜面?zhèn)溆谩?.**應(yīng)用**:尿素培養(yǎng)基主要用于鑒定革蘭氏陰性菌中的尿素酶活性,如用于腸桿菌科細(xì)菌的鑒定,例如大腸埃希菌和奇異變形桿菌等細(xì)菌具有尿素酶活性,而鮑曼不動(dòng)桿菌則不具備尿素酶活性。硝酸鐵瓊脂