平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)標(biāo)準(zhǔn)方法瓊脂(SA)

天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低，除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外，也適于用來(lái)進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如。高氏1號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方，配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng)，但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高，微生物在其中生長(zhǎng)速度較慢，一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來(lái)進(jìn)行有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測(cè)定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。Hugh-Leifson培養(yǎng)基（O/F試驗(yàn)用）HL培養(yǎng)基 葡萄糖銨培養(yǎng)基 營(yíng)養(yǎng)半固體瓊脂（NSA） Rustigian氏尿素培養(yǎng)液。平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)標(biāo)準(zhǔn)方法瓊脂(SA)

培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長(zhǎng)良好，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低時(shí)不能滿足微生物正常生長(zhǎng)所需，濃度過(guò)高時(shí)則可能對(duì)微生物生長(zhǎng)起抑制作用，例如高濃度糖類物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、重金屬離子等不只不能維持和促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)，反而起到抑菌或殺菌作用。另外，培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累，其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴(yán)格地講，碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值，有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。例如，在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過(guò)程中，培養(yǎng)基碳氮比為4/1時(shí)，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少；當(dāng)培養(yǎng)基碳氮比為3/1時(shí)，菌體繁殖受到抑制，谷氨酸產(chǎn)量則大量增加。再如，在維生素發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程中，可以通過(guò)控制培養(yǎng)基中碳源與遲效氮(或碳)源之間的比例來(lái)控制菌體生長(zhǎng)與維生素的合成協(xié)調(diào)。B5培養(yǎng)基（不含蔗糖和瓊脂）如果細(xì)菌的生長(zhǎng)受到限制，可以嘗試調(diào)整培養(yǎng)基的成分或添加輔助物質(zhì)，例如控制培養(yǎng)基中氧氣的含量。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：含有基礎(chǔ)生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng)成分，較常用的是肉浸液，俗稱肉湯，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨?；A(chǔ)培養(yǎng)基普遍用于細(xì)菌的增菌、檢驗(yàn)，也是制備其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中可加入葡萄糖、血液、生長(zhǎng)因子等特殊成分，供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌和需要特殊生長(zhǎng)因子的細(xì)菌生長(zhǎng)。較常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。特殊培養(yǎng)基：包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基，除含營(yíng)養(yǎng)成分外，還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢(shì)，如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對(duì)細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型，由于胞內(nèi)滲透壓較高，故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。

對(duì)于已經(jīng)購(gòu)買來(lái)的預(yù)裝培養(yǎng)基，其內(nèi)部較初的狀態(tài)已經(jīng)是無(wú)菌的。因此，在通常情況下，我們不需要對(duì)新的預(yù)裝培養(yǎng)基進(jìn)行任何形式的消毒處理。只需要在使用之前，檢查預(yù)裝培養(yǎng)基瓶口是否無(wú)菌，便可以直接使用。在使用過(guò)程中，應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范，避免外界微生物的污染。對(duì)于需要自制的培養(yǎng)基而言，其情況也不盡相同。如果自制的培養(yǎng)基中包含天然成分，那么在自制之后就需要進(jìn)行消毒處理，以殺死培養(yǎng)基中可能存在的微生物。在消毒處理之后，再將培養(yǎng)基裝入瓶中，就可以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)使用。同時(shí)，在使用自制的預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí)，需要嚴(yán)格控制其培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間、以及實(shí)驗(yàn)環(huán)境等參數(shù)，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。培養(yǎng)基的配方也會(huì)受到環(huán)境、藥物和其他外部壓力的影響，因此，在實(shí)際應(yīng)用中需要不斷進(jìn)行調(diào)整和改進(jìn)。

干粉培養(yǎng)基的保存和注意事項(xiàng)：干粉培養(yǎng)基的儲(chǔ)存條件應(yīng)保持干燥、防潮、防曬，并存放于陰涼干燥處，避免受到光線、溫度、濕度等外界環(huán)境的影響。一旦開封，干粉培養(yǎng)基應(yīng)立即密封并放回原包裝中，以免受到環(huán)境中的污染和變質(zhì)。在使用干粉培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)注意其有效期和使用方法。有效期是指干粉培養(yǎng)基在儲(chǔ)存條件下能夠保持理想品質(zhì)的時(shí)間，一般為 2 年至數(shù)年不等。在該期限內(nèi)使用的干粉培養(yǎng)基能夠保證培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的有效性和可重復(fù)性。同時(shí)，使用干粉培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)遵循無(wú)菌操作的原則，注意消毒、凈化和防止污染，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確和可靠。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養(yǎng)基為營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基。胰蛋白胨酵母浸粉肉湯

培養(yǎng)基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無(wú)菌技術(shù)，避免細(xì)菌交叉污染。平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)標(biāo)準(zhǔn)方法瓊脂(SA)

對(duì)于預(yù)裝培養(yǎng)基的儲(chǔ)存溫度應(yīng)該是在 4℃ 到 8℃ 的范圍內(nèi)。這是因?yàn)轭A(yù)裝培養(yǎng)基中含有大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，這些物質(zhì)在常溫下很容易被微生物利用，從而失去營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。同時(shí)，4℃ 到 8℃ 的溫度可以有效地防止微生物的生長(zhǎng)和繁殖，從而保證培養(yǎng)基的質(zhì)量和效果。對(duì)于預(yù)裝培養(yǎng)基的儲(chǔ)存條件應(yīng)該是“干燥、陰涼、避光和密封”。這是因?yàn)轭A(yù)裝培養(yǎng)基中含有一定比例的水分，如果儲(chǔ)存條件不當(dāng)，就會(huì)導(dǎo)致微生物的生長(zhǎng)和繁殖，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，我們需要選擇干燥、陰涼、避光和密封的地方進(jìn)行存儲(chǔ)。在存儲(chǔ)時(shí)，應(yīng)該避免陽(yáng)光直射、潮濕和高溫的環(huán)境，以免影響預(yù)裝培養(yǎng)基的質(zhì)量和穩(wěn)定性。同時(shí)，在儲(chǔ)存過(guò)程中，應(yīng)該注意避免磕碰和摔落，提高預(yù)裝培養(yǎng)基的存儲(chǔ)安全性。平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)標(biāo)準(zhǔn)方法瓊脂(SA)