膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)

以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ)，向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL，微量元素100×母液20mL，鐵鹽100×母液20mL，維生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL，甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培養(yǎng)基后，再加入0.5mg·L-1的BA8mL，0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水，加入40g蔗糖后攪拌使其溶化，用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂，將鋁鍋置于電爐上，攪拌加熱使瓊脂完全溶化，然后用蒸餾水定容至終體積2L，繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。孟德爾-韋伯利法可以計算培養(yǎng)基的可利用能量。膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)

長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子（特別是鈣、鎂、鐵離子）結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀，因此，在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時，常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑，避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀，常用的螯合劑為乙二胺四乙酸（EDTA）。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌，然后再混合，避免形成沉淀；高壓蒸汽滅菌后，培養(yǎng)基pH會發(fā)生改變（一般使pH降低），可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求，在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。BCG牛乳培養(yǎng)基LB培養(yǎng)基是普遍使用的通用培養(yǎng)基，適用于大多數(shù)腸道菌和非腸道菌的培養(yǎng)。

要獲得微生物純培養(yǎng)，必須避免雜菌污染，因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言，更是要進行嚴格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌，一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2，121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中，長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖，因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2，112.6℃15-30分鐘進行滅菌，某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基，可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合。

培養(yǎng)基按成分分類有哪些？上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹，根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分，可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩大類。天然培養(yǎng)基(native medium) 含有不完全明了化學(xué)成分的天然物質(zhì)。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米漿、血液、馬鈴薯等。用此類材料配成的培養(yǎng)基很難做到不同批號之間質(zhì)量的穩(wěn)定一致，因此在選用原料時務(wù)必注明其商品名稱、生產(chǎn)廠家及批號，對不同來源的原料應(yīng)先做小樣試驗。此種培養(yǎng)基成本較低，細菌繁殖較好，一般細菌培養(yǎng)以選用天然培養(yǎng)基為主。細胞類培養(yǎng)基則可分為無血清培養(yǎng)基和含血清培養(yǎng)基兩類。

按培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分是否完全區(qū)分：1.基本培養(yǎng)基，亦稱“較低限度培養(yǎng)基”。只能滿足微生物野生型菌株生長需要的培養(yǎng)基，稱為基本培養(yǎng)基，是含有營養(yǎng)要求較低成分的合成培養(yǎng)基，常用“[-]”表示。這種培養(yǎng)基往往缺少某些生長因子，所以經(jīng)過誘變過的營養(yǎng)缺陷型菌株不能生長。2.完全培養(yǎng)基，基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加血清等物質(zhì)后，叫完全培養(yǎng)基，也叫（血清）細胞培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基可用來滿足微生物的各種營養(yǎng)缺陷型菌株的生長需要，常以“[+]”表示。3.補充培養(yǎng)基，凡是只能滿足相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型生長需要的組合培養(yǎng)基，稱為補充培養(yǎng)基，它是在基本培養(yǎng)基中加入該菌株不能合成的營養(yǎng)因子而組成的。根據(jù)在基本培養(yǎng)基中加入的是A或B等營養(yǎng)因子代謝物而分別用[A]或[B]等來表示。細菌類培養(yǎng)基則包括馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥芽瓊脂培養(yǎng)基等等。BCG牛乳培養(yǎng)基

常見的培養(yǎng)基有LB培養(yǎng)基，YPD培養(yǎng)基，M9培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基等。膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)

細胞培養(yǎng)過程中，細胞培養(yǎng)基是不可或缺的，細胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細胞中供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。通常細胞體外培養(yǎng)時需要加入血清，以維持細胞的生長和存活。而除了血清之外，部分細胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇（β-mercaptoethanol）等成分來維持細胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細胞需要額外添加胰島素，而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細胞則需要添加β-巰基乙醇，不同細胞加入量會有差異，需根據(jù)細胞類型判斷。膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)

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