Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ)

長(zhǎng)時(shí)間高溫還會(huì)引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽(yáng)離子（特別是鈣、鎂、鐵離子）結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀，因此，在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長(zhǎng)狀況的合成培養(yǎng)基時(shí)，常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑，避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀，常用的螯合劑為乙二胺四乙酸（EDTA）。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進(jìn)行滅菌，然后再混合，避免形成沉淀；高壓蒸汽滅菌后，培養(yǎng)基pH會(huì)發(fā)生改變（一般使pH降低），可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求，在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中，常常需要調(diào)整培養(yǎng)基的組成和配方，以優(yōu)化細(xì)胞或微生物的生長(zhǎng)和功能表現(xiàn)。Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ)

鑒別培養(yǎng)基(differential media) 在培養(yǎng)基中加入某一反應(yīng)底物和指示劑，以區(qū)別某些微生物的特性從而鑒別之。又分一般鑒別培養(yǎng)基和選擇性鑒別培養(yǎng)基。只用于區(qū)別不同微生物種類的培養(yǎng)基稱為-般鑒別培養(yǎng)基，此類培養(yǎng)基中一般不加抑菌劑而只含指示劑，如克氏雙糖鐵培養(yǎng)基，含有葡萄糖及乳糖，以酚紅作為指示劑，觀察培養(yǎng)基底層與斜面的顏色變化判定細(xì)菌對(duì)葡萄糖和乳糖的發(fā)酵能力，加人檸檬酸鐵銨，培養(yǎng)后觀察是否產(chǎn)生黑色沉著以判定細(xì)菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫；又如伊紅-美藍(lán)瓊脂，含有乳糖(反應(yīng)底物)、伊紅-美藍(lán)(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌、腸道病原菌和其他雜菌。一般鑒別培養(yǎng)基的特點(diǎn)是在配方中都含有指示劑，并可用于區(qū)別不同種類的微生物，有些鑒別培養(yǎng)基也可同時(shí)作為細(xì)菌的特殊需要用來(lái)分離培養(yǎng)某些細(xì)菌，如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂。麥芽浸粉瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)某些培養(yǎng)基會(huì)在特定環(huán)境下產(chǎn)生特定的表型變化，例如MacConkey培養(yǎng)基生成紅色菌落表示腸道桿菌的存在。

選擇性培養(yǎng)基(selective media) 選擇性培養(yǎng)基含有營(yíng)養(yǎng)物(增菌劑)和抑菌劑(選擇劑)，標(biāo)本接種于此類培養(yǎng)基后，由于抑菌劑的選擇性抑制作用，使非目的菌受到不同程度的抑制，更有利于目的菌的增殖或分離。利用選擇性培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的增菌培養(yǎng)，再接種于選擇性鑒別培養(yǎng)基，可以提高目的菌的陽(yáng)性檢出率。抑菌劑的種類很多，常用的有孔雀綠、燦爛綠、亞硒酸鈉、去氧膽酸鈉、膽鹽、四硫磺酸鈉等。抑菌劑的加入量要適宜、準(zhǔn)確，有的劇毒，有的不耐高熱，配制時(shí)須特別注意。

bFGF是一個(gè)肝素結(jié)合的多膚類絲裂源，普遍分布于各種組織中。bFGF 是一種重要的細(xì)胞增殖分化調(diào)節(jié)劑，可刺激多種細(xì)胞的增殖。有研究發(fā)現(xiàn)它對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞也有促增殖作用。bFGF 主要是與細(xì)胞膜上FGF受體結(jié)合發(fā)揮作用，刺激與增殖有關(guān)的基因表達(dá)。Thomson 等認(rèn)為，像其他體外培養(yǎng)的人體細(xì)胞一樣，hES 細(xì)胞要求 bFGF 的存在以促進(jìn)增殖。同理EGF（上皮生長(zhǎng)因子） , 是人體內(nèi)的一種活性物質(zhì)，由53個(gè)氨基組成的活細(xì)胞，藉由刺激表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體之酪氨酸磷酸化，達(dá)到修補(bǔ)增生肌膚表層細(xì)胞，據(jù)說(shuō)對(duì)受傷、受損之表皮肌膚擁有很好的療效，其較大特點(diǎn)是能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖分化。所以加入它們都是促進(jìn)細(xì)胞增殖的。常見(jiàn)的細(xì)菌類培養(yǎng)基包括營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、大腸桿菌培養(yǎng)基、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基等等。

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的，細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要加入血清，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活。而除了血清之外，部分細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇（β-mercaptoethanol）等成分來(lái)維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素，而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇，不同細(xì)胞加入量會(huì)有差異，需根據(jù)細(xì)胞類型判斷。雜質(zhì)會(huì)影響培養(yǎng)基的成分，因此制備培養(yǎng)基時(shí)需要進(jìn)行滅菌。CW瓊脂基礎(chǔ)（含卡那霉素） 日本

常見(jiàn)的培養(yǎng)基有LB培養(yǎng)基，YPD培養(yǎng)基，M9培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基等。Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ)

不同類型微生物生長(zhǎng)對(duì)氧化還原電位（F）的要求不一樣，一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時(shí)可正常生長(zhǎng)，一般以+0.3—+0.4V為宜，厭氧性微生物只能在F值低于+0.1V條件下生長(zhǎng)，兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時(shí)進(jìn)行好氧呼吸，在+0.1V以下時(shí)進(jìn)行發(fā)酵。F值與氧分壓和pH有關(guān)，也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。在pH相對(duì)穩(wěn)定的條件下，可通過(guò)增加通氣量（如振蕩培養(yǎng)、攪拌）提高培養(yǎng)基的氧分壓，或加入氧化劑，從而增加F值；在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值。Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ)

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