氯化鈣溶液

來源: 發(fā)布時間:2023-05-15

L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細胞生長的必須氨基酸,可作為培養(yǎng)細胞的能量來源,參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中狀態(tài)不穩(wěn)定,它的降解速率隨保存時間,保存溫度及保存環(huán)境pH值等變化而變化。L-丙胺酰-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)是細胞培養(yǎng)中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品,其在水溶液中穩(wěn)定性高,即可保持長時間穩(wěn)定的營養(yǎng)供給,也降低了分解產物造成的細胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液(L-alanyl-L-glutamineslution)可作為哺乳動物貼壁細胞或懸浮細胞培養(yǎng)添加劑。與谷氨酰胺相比,L-丙胺酰-谷氨酰胺不會自行降解成氨而導致細胞毒性,作為添加物培養(yǎng)條件更加可控,可有效提高細胞活力。酵母培養(yǎng)基通常包含酵母營養(yǎng)素、碳水化合物和氮源。氯化鈣溶液

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基的分類有幾種呢?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)區(qū)分:1.液體培養(yǎng)基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。2.固體培養(yǎng)基,一類配制成的固體狀態(tài)的基質。根據(jù)性質又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。3.半固體培養(yǎng)基,指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4.脫水培養(yǎng)基,又稱預制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。改良McBride瓊脂添加劑液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類。

氯化鈣溶液,培養(yǎng)基

培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質濃度合適時微生物才能生長良好,營養(yǎng)物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用,例如高濃度糖類物質、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑菌或殺菌作用。另外,培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講,碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質的量比值,有時也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發(fā)酵生產谷氨酸的過程中,培養(yǎng)基碳氮比為4/1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當培養(yǎng)基碳氮比為3/1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產量則大量增加。

選擇性培養(yǎng)基(selective media) 選擇性培養(yǎng)基含有營養(yǎng)物(增菌劑)和抑菌劑(選擇劑),標本接種于此類培養(yǎng)基后,由于抑菌劑的選擇性抑制作用,使非目的菌受到不同程度的抑制,更有利于目的菌的增殖或分離。利用選擇性培養(yǎng)基經(jīng)過一定時間的增菌培養(yǎng),再接種于選擇性鑒別培養(yǎng)基,可以提高目的菌的陽性檢出率。抑菌劑的種類很多,常用的有孔雀綠、燦爛綠、亞硒酸鈉、去氧膽酸鈉、膽鹽、四硫磺酸鈉等。抑菌劑的加入量要適宜、準確,有的劇毒,有的不耐高熱,配制時須特別注意。自制培養(yǎng)基需要小心配比,防止成分誤差或者污染。

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在培養(yǎng)基中加人某種抑制劑和指示劑,抑制某些細菌生長,促進目的菌的繁殖,并使所生長的細菌菌落具有一定特征,以助鑒別挑選,這類培養(yǎng)基稱為選擇性鑒別培養(yǎng)基。如SS瓊脂,在該培養(yǎng)基配方中含有乳糖(反應底物)、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑)、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽性菌及部分大腸埃希菌的生長,而對沙門菌及志賀菌基本無影響,而且大腸埃希菌能發(fā)酵乳糖產酸,使菌落變紅色,沙門菌和志賀菌不發(fā)酵乳糖,其菌落為無色。如細菌產生硫化氫,則與檸檬酸鐵銨反應生成硫化亞鐵沉淀,菌落中心呈黑色或褐色。以此達到鑒別的目的。細菌類培養(yǎng)基則包括馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥芽瓊脂培養(yǎng)基等等。MFC肉湯 GB

孟德爾-韋伯利法可以計算培養(yǎng)基的可利用能量。氯化鈣溶液

培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的較適pH條件各不相同,一般來講,細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養(yǎng)物質被分解利用和代謝產物的形成與積累,會導致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對培養(yǎng)基pH條件進行控制,往往導致微生物生長速度下降或(和)代謝產物產量下降。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質的等量混合溶液的pH為6.8。當培養(yǎng)基中酸性物質積累導致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高。氯化鈣溶液

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