植物組織培養(yǎng)基 MS 大量元素與微量元素

培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法？幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求，細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì)，在缺少谷氨酰胺時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20℃ 冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)，應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么？培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I？這個(gè)二肽有多穩(wěn)定？GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽，是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物，其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來(lái)保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽，釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定，即使在121磅滅菌20分鐘，GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎完全降解。硫酸鹽還原菌培養(yǎng)基N 韋榮氏球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ) 依姆歇涅茨基纖維素培養(yǎng)基 奧曼梁斯基培養(yǎng)基 赫奇遜瓊脂培養(yǎng)基。植物組織培養(yǎng)基 MS 大量元素與微量元素

什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。酚紅本身對(duì)生物制品質(zhì)量并不會(huì)產(chǎn)生影響，可以通過(guò)純化技術(shù)去除，但酚紅在無(wú)血清培養(yǎng)基可能帶來(lái)胞內(nèi)鈉/鉀失衡，影響細(xì)胞生長(zhǎng)，當(dāng)然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分，很多國(guó)外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程中都使用無(wú)酚紅培養(yǎng)基。研究表明，酚紅可以模擬固醇類的作用。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí)，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè)，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí)，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。CYS培養(yǎng)基添加劑THB培養(yǎng)基基礎(chǔ) BETA-SSA瓊脂基礎(chǔ) 輕唾桿菌肽瓊脂（MSBA）基礎(chǔ) 屎腸球菌選擇性培養(yǎng)基。

細(xì)菌培養(yǎng)基之牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基：牛肉膏0.3g ，蛋白胨1.0g，氯化鈉0.5g，瓊脂1.5g，水100ml在燒杯內(nèi)加水100ml，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號(hào)后，放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補(bǔ)足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.2-7.6，分裝在各個(gè)試管里，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌：1.05千克每平方厘米、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養(yǎng)基：取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細(xì)細(xì)剁成肉末后，加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號(hào)，煮沸，轉(zhuǎn)用文火燉2小時(shí)。過(guò)濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。

細(xì)菌培養(yǎng)基之面粉瓊脂培養(yǎng)基：面粉60g，瓊脂20g，水1000ml把面粉用水調(diào)成糊狀，加水到500ml，放在文火上煮30分鐘。另取500ml水，放入瓊脂，加熱煮沸到溶解后，把兩液調(diào)勻，補(bǔ)充水分，調(diào)整pH值到7.4，分裝，滅菌，備用。微藻培養(yǎng)基，BG-11培養(yǎng)基：NaNO3 1.5g，K2HPO4 ·3H2O0.04g，MgSO4·7H2O0.075g，CaCl2 ·2H2O0.036g Citric Acid （檸檬酸）0.006g，F(xiàn)erric ammonium citrate（檸檬酸鐵銨0.006g，EDTA (dinatrium-salt) 0.001g，Na2CO3 0.02g，A5 + Co solution * （A5溶液1000×）1ml Distilled Water （蒸餾水）919ml。

李氏瓊脂 Herrold’s 卵黃瓊脂基礎(chǔ) 指示選指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ) 肝浸液肉湯 肝浸液瓊脂 胰膘肉湯 胰膘瓊脂。

培養(yǎng)基分類有哪些？營(yíng)養(yǎng)缺陷型：野生型菌株經(jīng)過(guò)人工誘變或者自然突變失去合成某種營(yíng)養(yǎng)（氨基酸，維生素，核酸等）的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的營(yíng)養(yǎng)因子才能生長(zhǎng)，稱為營(yíng)養(yǎng)缺陷型（auxotroph）。營(yíng)養(yǎng)缺陷型是一種生化突變株，它的出現(xiàn)是由基因突變引起的。遺傳信息的載體是一系列為酶蛋白編碼的核酸系列，如果核酸系列中某堿基發(fā)生突變，由該基因所控制的酶合成受阻，該菌株也因此不能合成某種營(yíng)養(yǎng)因子，使正常代謝失去平衡。NGKG瓊脂基礎(chǔ) 酪蛋白瓊脂 酚紅葡萄糖肉湯 溶菌酶營(yíng)養(yǎng)肉湯基礎(chǔ) 胰酪胨大豆多粘菌素肉湯(TSPB)基礎(chǔ)。蛋白胨氯化鈉溶液

羧甲基纖維素鈉(CMC)培養(yǎng)基 改良斯蒂芬遜培養(yǎng)基 HP培養(yǎng)基基礎(chǔ) 9K培養(yǎng)基 BG11瓊脂培養(yǎng)基。植物組織培養(yǎng)基 MS 大量元素與微量元素

1951年厄爾開(kāi)發(fā)了供動(dòng)物細(xì)胞體外生長(zhǎng)的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知，便于對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代，因此，細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動(dòng)物血清成分復(fù)雜，各種生物大小分子混合在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)很有效，但后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測(cè)造會(huì)成一定困難。另外高質(zhì)量的動(dòng)物血清來(lái)源有限，成本高，限制了它的大量使用。無(wú)血清培養(yǎng)基不加動(dòng)物血清，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長(zhǎng)有效因子等。植物組織培養(yǎng)基 MS 大量元素與微量元素

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