硫酸多粘菌素B溶液

細(xì)菌培養(yǎng)基之牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基：牛肉膏0.3g ，蛋白胨1.0g，氯化鈉0.5g，瓊脂1.5g，水100ml在燒杯內(nèi)加水100ml，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號后，放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補(bǔ)足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.2-7.6，分裝在各個(gè)試管里，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌：1.05千克每平方厘米、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養(yǎng)基：取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細(xì)細(xì)剁成肉末后，加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號，煮沸，轉(zhuǎn)用文火燉2小時(shí)。過濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。馬鈴薯葡萄糖水（PD水） 馬鈴薯蔗糖瓊脂（PSA） 麥芽浸膏湯 MEA培養(yǎng)基麥芽浸膏瓊脂MEA瓊脂。硫酸多粘菌素B溶液

HBS 和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在 Eagle′s（2.2g/L） 中比在 Hanks′（0.35g/L）中高。碳酸氫鈉需用高水平的 CO2 平衡，以維持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空氣水平的CO2中，溶液會(huì)變堿，Hanks′液在 CO2 培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織，需要用Eagle′s液，如果只是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的組織，用Hanks′液就可以了。由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2-7.4，偏離此范圍可能對細(xì)胞生長將產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對pH的要求也不完全相同，原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對pH變動(dòng)耐受差，無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。但總體來說，細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些。在配制培養(yǎng)用液時(shí)，需要注意一點(diǎn)：新配的培養(yǎng)基在經(jīng)過 0.10um 或 0.22um 濾膜過濾時(shí)，溶液的pH 還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(含卵磷脂)葡萄糖酵母浸粉蛋白胨瓊脂GYP瓊脂 改良M17瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 尿酸瓊脂 MC肉湯不含瓊脂溴甲酚紫牛乳瓊脂培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調(diào)pH至7.2-7.4，若pH值超過7.6或遠(yuǎn)低于6.8，則大多數(shù)細(xì)胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。培養(yǎng)中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體，置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時(shí)間而定，一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制，可選用無血清培養(yǎng)基。

在培養(yǎng)基中加人某種抑制劑和指示劑，抑制某些細(xì)菌生長，促進(jìn)目的菌的繁殖，并使所生長的細(xì)菌菌落具有一定特征，以助鑒別挑選，這類培養(yǎng)基稱為選擇性鑒別培養(yǎng)基。如SS瓊脂，在該培養(yǎng)基配方中含有乳糖(反應(yīng)底物)、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑)、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽性菌及部分大腸埃希菌的生長，而對沙門菌及志賀菌基本無影響，而且大腸埃希菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，使菌落變紅色，沙門菌和志賀菌不發(fā)酵乳糖，其菌落為無色。如細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫，則與檸檬酸鐵銨反應(yīng)生成硫化亞鐵沉淀，菌落中心呈黑色或褐色。以此達(dá)到鑒別的目的。KF鏈球菌瓊脂 Slantez and Bartley培養(yǎng)基 TYC瓊脂培養(yǎng)基 腸球菌推定肉湯（EP肉湯）。

合成培養(yǎng)基(synthetic medium) 由已知化學(xué)成分的營養(yǎng)物質(zhì)組成的培養(yǎng)基。根據(jù)微生物對營養(yǎng)要求的不同，可完全由無機(jī)鹽或化合物組成，如：氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、維生素等，其組成成分已知，只要嚴(yán)格操作，各批次間質(zhì)量可做到穩(wěn)定一致。此培養(yǎng)基可用來檢測某種營養(yǎng)物或藥物對微生物代謝的影響。組織細(xì)胞培養(yǎng)液均屬合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的成本較高，其價(jià)格相當(dāng)于同類天然培養(yǎng)基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無機(jī)鹽的合成培養(yǎng)基，只適用于自養(yǎng)菌的培養(yǎng)，如培養(yǎng)亞硝化細(xì)菌、氧化硫桿菌等的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基大部分成分為已知化學(xué)結(jié)構(gòu)的營養(yǎng)物質(zhì)，其中的個(gè)別或少數(shù)成分為未明化學(xué)成分的必須營養(yǎng)物，成為半合成培養(yǎng)基，如百日咳菌苗生產(chǎn)用的水解酪素培養(yǎng)基。硫酸鹽還原菌培養(yǎng)基N 韋榮氏球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ) 依姆歇涅茨基纖維素培養(yǎng)基 奧曼梁斯基培養(yǎng)基 赫奇遜瓊脂培養(yǎng)基。胰酪胨大豆多粘菌素肉湯添加劑

THB培養(yǎng)基基礎(chǔ) BETA-SSA瓊脂基礎(chǔ) 輕唾桿菌肽瓊脂（MSBA）基礎(chǔ) 屎腸球菌選擇性培養(yǎng)基。硫酸多粘菌素B溶液

天然培養(yǎng)基是指來自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術(shù)建立早期，體外培養(yǎng)細(xì)胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過程復(fù)雜、批間差異大，因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。普遍使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素：一是取材對象，二是取材過程。用于取材的動(dòng)物應(yīng)健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi)，取材過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行，制備出的血清要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。硫酸多粘菌素B溶液

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