細(xì)胞凍存液常見問題:1.從繁衍期到產(chǎn)生高密度的單層細(xì)胞之前的塑造體細(xì)胞都能夠用以凍存,但較好是為多數(shù)成長期體細(xì)胞。在凍存前一日較好是換一次細(xì)胞培養(yǎng)液;2.將凍存管放進(jìn)液氮容器或從這當(dāng)中取下時(shí),要搞好安全防護(hù)工作中,以防凍壞;3.凍存和再生較好用新配置的細(xì)胞培養(yǎng)液。細(xì)胞凍存的基本原理:細(xì)胞代謝過程需要各種蛋白酶的參與,而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時(shí)會(huì)集體不工作,低溫貯藏的目的是通過較低溫使細(xì)胞代謝活動(dòng)近乎停止。細(xì)胞因此進(jìn)入休眠狀態(tài),使細(xì)胞“不會(huì)老”,所以可以長期保存。因?yàn)閮鋈谶^程對(duì)所有細(xì)胞和組織都是有一定傷害的,因此,需要開發(fā)出有效的技術(shù)來防止細(xì)胞死亡和損傷。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。廈門正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液平均價(jià)格
無血清細(xì)胞凍存液:解凍解凍后,應(yīng)該立即鋪板在預(yù)先包被好的培養(yǎng)皿中。上述凍存的一管細(xì)胞可以成功的鋪板到6孔板的 1 - 2孔。1. 開始之前,提前準(zhǔn)備好以下材料:試管,恢復(fù)至室溫的培養(yǎng)基,預(yù)先包被的培養(yǎng)板,確保整個(gè)解凍復(fù)蘇程序可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成。注意:不要在37°C水浴中加熱培養(yǎng)基。2. 在37°C水浴中快速解凍,持續(xù)溫和的在水中晃動(dòng)凍存管,直到剩余少量細(xì)胞還處于凍存狀態(tài)。3. 水浴中取出凍存管,用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。4. 用2 mL的血清移液管把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到一個(gè)15 mL的錐形試管。注意:用2 mL的血清移液管代替1 mL的頭可以減少細(xì)胞聚集體的分解。廈門廣州無血清細(xì)胞凍存液同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞。
無血清細(xì)胞凍存液的使用方法及注意事項(xiàng):無血清細(xì)胞凍存液:含多種保護(hù)劑成分,一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶 液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,我公司無血清細(xì)胞凍存 液,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),較大提高了細(xì)胞復(fù) 蘇存活率。 【產(chǎn)品用途】 1.用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ)。 2.細(xì)胞保藏中心,用于細(xì)胞株的長期保存。 3.科研高校,細(xì)胞株凍存。 4.醫(yī)院樣本庫細(xì)胞樣本保存。 【使用方法】 1、細(xì)胞凍存前準(zhǔn)備 (1)要求凍存的細(xì)胞在對(duì)數(shù)生長期,且活率大于90%。 (2)計(jì)算細(xì)胞密度,一般要求密度在1-3x10 cells/mL,不同細(xì)胞系 請(qǐng)參照附表。 2、細(xì)胞凍存過程 (1)將要凍存的細(xì)胞懸液,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)后離心,800 3min即可。 度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細(xì)胞沉淀中,根據(jù)密度調(diào)整細(xì)胞凍存 液用量。 (3)反復(fù)吹吸混勻后,分裝于細(xì)胞凍存管中,每管500ul-1000ul, (建議500ul/管)。
無血清凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長期保存(>5年)。配方成分明確,不含動(dòng)物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營養(yǎng)成分,提高細(xì)胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。該產(chǎn)品添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑,可延緩細(xì)胞在凍存過程中的沉降速率,防止細(xì)胞互相擠壓,影響細(xì)胞凍存效果。另外,添加了細(xì)胞膜保護(hù)劑、滲透性細(xì)胞膜內(nèi)保護(hù)劑、非滲透性細(xì)胞保護(hù)劑等多種冷凍保護(hù)劑,這些成分在溶液中同水分子結(jié)合,發(fā)生水合作用,弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而少冰晶的形成,能較大降低細(xì)胞在凍存過程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷,有效提高細(xì)胞復(fù)蘇存活率。該產(chǎn)品配方成分明確,不含血清、不含動(dòng)物源性蛋白,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全;不光適用于常規(guī)細(xì)胞系、原代細(xì)胞,同時(shí)亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。將融化后的含細(xì)胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻。
細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):凍存細(xì)胞的效果好壞要看細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。細(xì)胞凍存時(shí),細(xì)胞內(nèi)部會(huì)產(chǎn)生晶體,水凝固形成的高濃度溶質(zhì)會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷,所以在凍存過程中要盡可能降低晶體的產(chǎn)生。為了提高復(fù)蘇存活率,可通過以下方法完成:a)降溫的速度不能太快,讓細(xì)胞內(nèi)的水分緩慢離開細(xì)胞;b)在低溫環(huán)境下凍存細(xì)胞可以降低高濃度鹽對(duì)細(xì)胞中蛋白質(zhì)的影響;c)凍存試劑要采用親水的低溫保護(hù)劑;d)復(fù)蘇時(shí)的速度要快,這樣可以減少細(xì)胞內(nèi)部冰晶溶解時(shí)產(chǎn)生的某些可溶性成分。開蓋之前,用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。昆明無血清細(xì)胞凍存液價(jià)格
無血清凍存液用途:置于-20℃保存,有效期為3年。廈門正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液平均價(jià)格
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇實(shí)驗(yàn):一般來說,細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)移和保存,較佳的策略是進(jìn)行低溫保存(-70℃~-196℃),而細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均已停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故而可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程,在此溫度范圍內(nèi),冰晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。經(jīng)過前人的長期試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇基本原則是慢凍速融,這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。廈門正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液平均價(jià)格