染色的一般原則:1.熒光素產(chǎn)品一般為微量試劑,取用前請離心集液,以及避光保存和使用。建議您在收到產(chǎn)品之后,分裝為小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式細(xì)胞儀只可檢測單細(xì)胞懸液,如使用組織樣本,首先必須制備成單細(xì)胞懸液,細(xì)胞數(shù)量不應(yīng)低于1X106/ml。3.推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測。可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進(jìn)一步的損傷。過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨
糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒簡介糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛與Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。本糖原PAS染色試劑盒的特點(diǎn):采用Leagene特有配方技術(shù),較大增強(qiáng)了染色效果;性能穩(wěn)定,特異性強(qiáng);操作簡捷,需1h左右湖南提供糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)急性單核細(xì)胞白血病原、幼單核細(xì)胞POX染色多呈細(xì)小顆粒弱陽性反應(yīng)。
糖原PAS染色試劑盒用途:區(qū)分黏蛋白和多糖備注:普通PAS染色法無法準(zhǔn)確鑒別黏液物質(zhì)(如黏液物質(zhì)或多糖),本試劑盒在PAS染色之前有糖原消化步驟,需要做陽性對照糖原PAS染色試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:素染色液100mlHE染色屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種,尤其適用于教學(xué)和科研上的核染色質(zhì)染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖),推薦用于骨和軟骨的染色。經(jīng)酸處理過的切片染色以及核的染色、骨和軟骨的染色中推薦采用該試劑。冷凍切片染色效果不佳,成熟時(shí)間2個(gè)月,染色時(shí)間一般15-20分鐘。素染色液500mlHE染色屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種,尤其適用于教學(xué)和科研上的核染色質(zhì)染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖),推薦用于骨和軟骨的染色。經(jīng)酸處理過的切片染色以及核的染色、骨和軟骨的染色推薦采用該試劑。冷凍切片染色效果不佳,成熟時(shí)間2個(gè)月,染色時(shí)間一般15-20分鐘。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,腺細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。
糖原染色臨床意義:1、急性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病、戈謝病的原始細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)或陽性反應(yīng);缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應(yīng);急性粒細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病、良性淋巴細(xì)胞增多癥、尼曼-皮克細(xì)胞呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)。巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血等,幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng)。偶有個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。2、幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞,巨核細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng);霍奇金細(xì)胞呈弱陽性或陰性反應(yīng)。3、幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,腺細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。植物材料在選擇時(shí)須盡可能不損傷植物體或所需要的部分。湖南糖原染色試劑盒哪里買
動(dòng)物材料取用時(shí)需對動(dòng)物施以麻醉,常用的麻醉劑有氯仿和。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨
糖原pas染色液配制及使用方法:1、常規(guī)固定,常采用10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。3、自來水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2次。4、入過碘酸溶液,室溫放置,一般不宜超過10min。5、自來水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室溫陰暗處浸染。7、自來水沖洗10min。8、入蘇木素染色液,染細(xì)胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自來水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗,使其返藍(lán)。11、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨