醫(yī)院檢驗中心糖原染色操作規(guī)程:1.雪夫氏試劑:400m1蒸餾水煮沸除去C02,逐漸加堿性品紅2.08溶解后,待冷卻至60℃,加1mm01兒HCl40ml,再加偏重亞硫酸鈉(NaHSO:)4g,次日加活性碳1.5g,放置半天后過濾。配好后液體為無色透明,保存于4℃冰箱中。2.過碘酸作用液:過碘酸1g溶于蒸餾水100ml中,或取過碘酸鉀(1tI04)0。698加蒸餾水100ml,微加熱使溶解,再加濃硝酸0.3m1,置冰箱中保存。3.固定液:95%乙醇90ml與甲醛10m1混勻。4.20g/l甲基綠:甲基綠2g溶于100m1蒸餾水。[操作]_x005f_x005f_x005f_x000c_(1)新鮮或陳舊血片、骨髓片于固定液內10分鐘。(2)水洗數(shù)次后,對照片先用唾液消化30分鐘,也可在同一片,在其中間用蠟筆劃界,一半做對照,另一半做測定。(3)水洗后,滴加過碘酸數(shù)滴于涂片上,作用10分鐘后,再水洗數(shù)次。通過顯微鏡對組織內的生物化學成分進行定性、定位、定量研究。北京品質好的糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細胞內的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合,形成紫色化合物,定位于細胞質中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細胞白血病和急性非淋巴細胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷浙江哪家生產糖原染色試劑盒服務電話特殊染色是為了顯示與確定組織或細胞中的正常結構或病理過程中出現(xiàn)的異常物質。
糖元染色試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。細胞生物學的研究內容十分普遍,主要包括。①細胞核、染色體以及基因表達的研究。②生物膜與細胞器的研究。③細胞骨架體系的研究。④細胞增殖及其調控。⑤細胞分化及其調控。⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細胞的起源與進化。⑧細胞工程。PAS染色,全稱過碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用來顯示糖原和其他多糖物質,因此也稱作糖原染色。另外,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質和某些酸性物質,以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測原理在于:過碘酸(也成為高碘酸)是一種強氧化劑
PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應用PAS技術之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,不主張應用唾液。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學染色,在臨床病理診斷上占著相當重要的位置。腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性。
彈力染色應用:(1)動靜脈的辨認:在血管病變時是動脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認時,彈力纖維染色有助于辨認。有彈力板者為動脈,有彈力纖維構成血管輪廓者為血管。彈力纖維抗損傷能力較強,故彈力性纖維構成血管輪廓不易損壞。(2)彈力纖維瘤的診斷:彈力纖維染色可見瘤樣病變內有大量彈力纖維增生,非真性。(3)心血管先天性彈力組織增生,這組疾病有先天性內膜炎及冠狀動脈的彈力纖維組織增生。彈力纖維染色有助于診斷。(4)彈力纖維損傷性疾?。哼@組疾病有肺氣腫、、大動脈中層炎癥等,彈力纖維染色有助于這些疾病的觀察診斷糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變。北京品質好的糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨
可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進一步的損傷。北京品質好的糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨
染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,相當穩(wěn)定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯類物質為底物,其反應產物可用多種方法檢測出來。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個基因被普遍應用于基因調控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同,可以選擇三種檢測方法:組織化學法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法較高)。其中較為常用的是組織化學法。北京品質好的糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨