糖原染色(過(guò)碘酸-雪夫反應(yīng))原理多糖中乙二醇基經(jīng)過(guò)碘酸氧化成二醛基與無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結(jié)果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽(yáng)性。無(wú)紅色顆粒為陰性_x005f_x000c_臨床意義1、正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)粒系:原粒細(xì)胞糖原含量很低,隨著細(xì)胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細(xì)胞:糖原常凝聚成顆粒或塊狀。巨核細(xì)胞-血小板系統(tǒng):PAS反應(yīng)呈粗大的紫色顆?;驁F(tuán)塊。正常紅系:陰性。對(duì)疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細(xì)胞白血病:原始粒細(xì)胞呈陰性或弱陽(yáng)性反應(yīng),以彌散性為主;急性淋巴細(xì)胞白血病原、幼淋巴細(xì)胞多呈粗顆粒、塊狀陽(yáng)性反應(yīng)~對(duì)某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。浙江咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過(guò)碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時(shí)過(guò)濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無(wú)色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過(guò)濾使成無(wú)色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過(guò)碘酸水溶液:過(guò)碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個(gè)月,變黃則失效安徽正規(guī)糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)糖原染色試劑盒的作用是什么?
染色的一般原則:1.熒光素產(chǎn)品一般為微量試劑,取用前請(qǐng)離心集液,以及避光保存和使用。建議您在收到產(chǎn)品之后,分裝為小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式細(xì)胞儀只可檢測(cè)單細(xì)胞懸液,如使用組織樣本,首先必須制備成單細(xì)胞懸液,細(xì)胞數(shù)量不應(yīng)低于1X106/ml。3.推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽(yáng)性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測(cè)??蓪⒁让赶蠹?xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進(jìn)一步的損傷。
特染的應(yīng)用價(jià)值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴,對(duì)于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無(wú)需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡(jiǎn)單的優(yōu)勢(shì),在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。比如,當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來(lái)很簡(jiǎn)單,所以組織化學(xué)技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)~適用于教學(xué)和科研上的核染色質(zhì)染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖)。
糖原D-PAS染色液:使用方法:1、兩張相同切片,二甲苯脫蠟,梯度乙醇入水。2、一張切片入37℃淀粉酶溶液處理1h。另一張不用淀粉酶溶液處理,入水中1h作為對(duì)照。3、流水沖洗兩張切片各5~10min。4、入過(guò)碘酸溶液,室溫放置5~8min,一般不宜超過(guò)10min。5、自來(lái)水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室溫陰暗處浸染10~20min。7、自來(lái)水沖洗10min。8、入Mayer蘇木素染色液,染細(xì)胞核1~2min。9、(可選)酸性乙醇分化液分化2~5s。10、自來(lái)水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗使其返藍(lán)。11、二甲苯透明,中性樹膠封固。本試劑盒適用于骨髓細(xì)胞涂片,血液細(xì)胞涂片。安徽正規(guī)糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進(jìn)一步的損傷。浙江咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷
染色的原理和臨床意義:在同一張涂片上進(jìn)行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色等。反應(yīng)的原理基本上同各自的染色原理,同一張涂片上的細(xì)胞要分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時(shí)間,較后復(fù)染、顯微鏡觀察。酯酶雙染色可同時(shí)觀察兩種不同的白血病細(xì)胞,因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項(xiàng)染色。急性粒-單核細(xì)胞白血病該染色法在急性粒-單核細(xì)胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽(yáng)性反應(yīng)的細(xì)胞,甚至少數(shù)病例在單個(gè)細(xì)胞內(nèi)同時(shí)出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽(yáng)性反應(yīng),因此酯酶雙染色反應(yīng)在急性粒-單核細(xì)胞白血病的診斷上具有獨(dú)特價(jià)值。浙江咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷