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來(lái)源： 發(fā)布時(shí)間：2024-06-24

注意事項(xiàng)：染色時(shí)：①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說(shuō)明書進(jìn)行染色。②在染色過(guò)程中，前一個(gè)染液浸染完成后，在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前，必須徹底充分水洗，使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前，務(wù)必吸干組織上多余的水分，避免多余的水把染液稀釋了，造成染色不佳。④在滴加染液時(shí)，務(wù)必使染液完全覆蓋組織，但不能溢出圈外，避免浪費(fèi)試劑。在染色時(shí)，用有色鉛筆在組織周圍劃一個(gè)圈，這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì)使染液溢出。切取的材料應(yīng)小而薄，便于固定液迅速滲入內(nèi)部。上?？诒玫奶窃旧噭┖心募冶阋?/p>

糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面：PAS染色時(shí)需于暗處加蓋反應(yīng)，染色時(shí)間10～20min（染色時(shí)間長(zhǎng)短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度，SO濃度高，染色時(shí)間適當(dāng)縮短；環(huán)境溫度高，染色時(shí)間也應(yīng)適當(dāng)縮短，反之則需適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間）。染色過(guò)程中不能接觸伊紅，以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時(shí)，較好作消化對(duì)照，即取兩張連續(xù)切片，其中一張脫蠟至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如經(jīng)消化處理的切片染色陰性，不經(jīng)消化處理的切片染色陽(yáng)性，即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉（鉀）溶液配置后，不能保存，因此，必須現(xiàn)配現(xiàn)用，用過(guò)一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。上?？诒玫奶窃旧噭┖心募冶阋死没瘜W(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)。

糖原染色：1、概況PAS染色法（PeriodicAcid-Schiffstain）在組織學(xué)上，主要用來(lái)檢測(cè)組織中的糖類。過(guò)碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過(guò)碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛，再與Schiff氏液的無(wú)色品紅結(jié)合，紅色，定位于胞漿上。3、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍，如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì)，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些的診斷等~

糖元染色試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分普遍,主要包括。①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。②生物膜與細(xì)胞器的研究。③細(xì)胞骨架體系的研究。④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。⑧細(xì)胞工程。PAS染色，全稱過(guò)碘酸雪夫染色（PeriodicAcid-SchiffStain），主要用來(lái)顯示糖原和其他多糖物質(zhì)，因此也稱作糖原染色。另外，此染色方法還可以顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)，以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測(cè)原理在于：過(guò)碘酸（也成為高碘酸）是一種強(qiáng)氧化劑。對(duì)鹽基性染料有親合力，因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。

GUS染色步驟：1.將準(zhǔn)備好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保溫1小時(shí)至過(guò)夜。2.葉片等綠色材料轉(zhuǎn)入70%乙醇中脫色2-3次，至陰性對(duì)照材料呈白色。3.肉眼或顯微鏡下觀察，白色背景上的藍(lán)色小點(diǎn)即為GUS表達(dá)位點(diǎn)。注：用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和部位的不同而異。例如，擬南芥的根、花和葉片以及幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片（1-3mm）。當(dāng)操作大的組織和樣品時(shí)，可以選用真空滲入法來(lái)幫助底物和酶滲入細(xì)胞。在滴加染液時(shí)，務(wù)必使染液完全覆蓋組織，但不能溢出圈外，避免浪費(fèi)試劑。正規(guī)糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)

多糖主要指糖原，它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞、骨骼肌、心肌等處。上?？诒玫奶窃旧噭┖心募冶阋?/p>

糖原染色（PAS）：（1）原理：過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化，生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合，形成紫色化合物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分鐘，流水沖洗，晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘，流水沖洗，晾干。滴加雪夫液作用60分鐘，流水沖洗，晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘，流水沖洗，晾干鏡檢。（4）臨床意義：根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別，還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷上?？诒玫奶窃旧噭┖心募冶阋?/p>

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