如何使用糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家

糖原染色：細(xì)胞內(nèi)含1，2-乙二醇基的多糖類經(jīng)過碘酸氧化后產(chǎn)生醛基，與特殊染液作用，使無色品紅變成紅色化合物，沉淀于胞質(zhì)之中。紅色的深淺與細(xì)胞中起反應(yīng)的1，2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核細(xì)胞與李—斯細(xì)胞的鑒別，前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性，后者為陰性或弱陽性；用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別，前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性，而后者反應(yīng)為陰性或弱性。正常值正常情況下，紅細(xì)胞系統(tǒng)的原、幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞；粒細(xì)胞系統(tǒng)的原粒細(xì)胞、原單核細(xì)胞和大多數(shù)淋巴細(xì)胞為陰性反應(yīng)。自早幼粒階段以后的粒細(xì)胞和幼單核細(xì)胞可呈弱陽性反應(yīng)?？梢杂^察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細(xì)胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。如何使用糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面：盡可能選取小塊新鮮組織及時固定。糖原易溶于水，在酶的作用下很容易分解葡萄糖，更易溶于水，固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液，宜采用酒精性固定液，如Carnoy液，能較好地保存糖原，但有使糖原流動到細(xì)胞一側(cè)的現(xiàn)象，多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細(xì)胞內(nèi)的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存，是針對糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白，亦能白和糖原沉淀，但仍可溶于水，因此較好不單獨使用乙醇固定，以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳天津哪家提供糖原染色試劑盒直銷價可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止進(jìn)一步的損傷。

糖原染色（PAS）：（1）原理：過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化，生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合，形成紫色化合物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分鐘，流水沖洗，晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘，流水沖洗，晾干。滴加雪夫液作用60分鐘，流水沖洗，晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘，流水沖洗，晾干鏡檢。（4）臨床意義：根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別，還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷。

粘液染色法：粘液一般有以下幾點特性：（1）對鹽基性染料有親合力，因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。（2）對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。（3）遇醋酸發(fā)生沉淀，胃粘蛋白則除外。（4）溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種：1、P．A．S染色法：操作方法同前，結(jié)果；中性粘液性物質(zhì)，某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色，核呈藍(lán)色。2、AB/P.A.S染色法：該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法：（1）切片常規(guī)脫蠟入水。（2）3%醋酸液洗2分鐘，入1%阿利新蘭醋酸液（PH2.5）10-20分鐘。（3）蒸餾水洗。（4）按P.A.S染色程序。（5）蘇木素淡染2-3分鐘，水洗。（6）常規(guī)脫水、封片。待冷卻至50℃過濾，加入當(dāng)量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。

染色試劑盒：GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase)，是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶，屬水解酶類，相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解，以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物，其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此這個基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同，可以選擇三種檢測方法：組織化學(xué)法、分光光度法和熒光法（靈感度為分光光度檢測法較高）。其中較為常用的是組織化學(xué)法擁有針對不同組織的特殊固定液。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)

取材必須新鮮，這一點對于從事細(xì)胞生物學(xué)研究尤為重要。如何使用糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家

GUS染色步驟：1.將準(zhǔn)備好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保溫1小時至過夜。2.葉片等綠色材料轉(zhuǎn)入70%乙醇中脫色2-3次，至陰性對照材料呈白色。3.肉眼或顯微鏡下觀察，白色背景上的藍(lán)色小點即為GUS表達(dá)位點。注：用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和部位的不同而異。例如，擬南芥的根、花和葉片以及幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片（1-3mm）。當(dāng)操作大的組織和樣品時，可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。如何使用糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家