糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時(shí)過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉。山東如何使用糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)
特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:染色結(jié)果對比鮮明、結(jié)果易保存、陽性突出的染色方法;突出的陽性結(jié)果在于所選擇方法表達(dá)的色調(diào)及如何進(jìn)行背景的復(fù)染。結(jié)果能夠長時(shí)間保存、不褪色對于后續(xù)的調(diào)閱、科研、論文均較為有利。如顯示淀粉樣物質(zhì),甲基紫染色法雖然流程較為簡單,但結(jié)果不易保存,陽性對比度相對不突出;剛果紅染色法陽性結(jié)果明顯,長時(shí)間保存不褪色,流程簡便,更是實(shí)用的方法。如顯示彈性纖維,地衣紅染色染液雖配制較方便,但結(jié)果對比度相對欠佳,與其他幾個(gè)染色法相比,多不選擇使用。北京哪家提供糖原染色試劑盒單價(jià)組織石蠟切片的染色檢測。
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷
注意事項(xiàng):染色時(shí):①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說明書進(jìn)行染色。②在染色過程中,前一個(gè)染液浸染完成后,在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑。在染色時(shí),用有色鉛筆在組織周圍劃一個(gè)圈,這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì)使染液溢出特殊染色方法及化學(xué)試劑的選擇。
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時(shí)固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能較好地保存糖原,但有使糖原流動(dòng)到細(xì)胞一側(cè)的現(xiàn)象,多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細(xì)胞內(nèi)的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存,是針對糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此較好不單獨(dú)使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。福建品質(zhì)好的糖原染色試劑盒進(jìn)貨價(jià)
加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無色。山東如何使用糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)
糖原染色的參考值及臨床意義:1.慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴肉瘤等惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病,其淋巴細(xì)胞的PSA染色積分值增高;等淋巴細(xì)胞良性增生時(shí),淋巴細(xì)胞積分值正常。醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理故該試驗(yàn)可用于鑒別良性與惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病。2.紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞的PAS染色呈強(qiáng)陽性反應(yīng),積分值增高;溶血性貧血及巨幼細(xì)胞性貧血時(shí),幼紅細(xì)胞的PAS染色積分值在正常范圍內(nèi),故該試驗(yàn)也可用于紅白血病的診斷及鑒別幼紅細(xì)胞增多的性質(zhì)。3.急性粒細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚粒細(xì)胞PAS染色常呈陰性反應(yīng);急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚淋巴細(xì)胞常呈陽性反應(yīng);急性單核細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚單核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽性反應(yīng)。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別山東如何使用糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)