染色的原理和臨床意義:在同一張涂片上進(jìn)行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色等。反應(yīng)的原理基本上同各自的染色原理,同一張涂片上的細(xì)胞要分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時(shí)間,較后復(fù)染、顯微鏡觀察。酯酶雙染色可同時(shí)觀察兩種不同的白血病細(xì)胞,因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項(xiàng)染色。急性粒-單核細(xì)胞白血病該染色法在急性粒-單核細(xì)胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽性反應(yīng)的細(xì)胞,甚至少數(shù)病例在單個(gè)細(xì)胞內(nèi)同時(shí)出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽性反應(yīng),因此酯酶雙染色反應(yīng)在急性粒-單核細(xì)胞白血病的診斷上具有獨(dú)特價(jià)值。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。浙江哪家提供糖原染色試劑盒平均價(jià)格
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時(shí)過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個(gè)月,變黃則失效天津口碑好的糖原染色試劑盒哪家便宜在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑。
染色的一般原則:1.熒光素產(chǎn)品一般為微量試劑,取用前請離心集液,以及避光保存和使用。建議您在收到產(chǎn)品之后,分裝為小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式細(xì)胞儀只可檢測單細(xì)胞懸液,如使用組織樣本,首先必須制備成單細(xì)胞懸液,細(xì)胞數(shù)量不應(yīng)低于1X106/ml。3.推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測??蓪⒁让赶蠹?xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進(jìn)一步的損傷。
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。操作簡單方便,1h內(nèi)即可完成反應(yīng)。
糖原染色試劑盒(1)急性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病、戈謝病的原始細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)或陽性反應(yīng);缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應(yīng);急性粒細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病、良性淋巴細(xì)胞增多癥、尼曼-皮克細(xì)胞呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)。巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血等,幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng)。偶有個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。(2)幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞,巨核細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng);霍奇金細(xì)胞呈弱陽性或陰性反應(yīng)。(3)幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,腺細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。浙江哪家提供糖原染色試劑盒平均價(jià)格
推薦用于骨和軟骨的染色。浙江哪家提供糖原染色試劑盒平均價(jià)格
粘液染色法:粘液一般有以下幾點(diǎn)特性:(1)對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結(jié)果;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍(lán)色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點(diǎn)是能同時(shí)顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規(guī)脫水、封片。浙江哪家提供糖原染色試劑盒平均價(jià)格