重慶RNA提取試劑

來源: 發(fā)布時間:2023-03-08

細菌RNA快速提取試劑盒:該產(chǎn)品基于獨特的裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶,然后用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后,總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的去蛋白、漂洗的步驟將細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的RNaseFreeH2O將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。該產(chǎn)品可在30min內(nèi)完成樣品RNA的提取,提取的總RNA完整性好,無蛋白和基因組DNA污染。注意事項:初次使用前請先在漂洗液RW瓶加入指定量無水乙醇,加入后請及時打鉤標記已加入乙醇,以免多次加入!裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作時要戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時,要用大量清水或者生理鹽水沖洗。所有離心操作步驟,均可在室溫(15-25℃)下進行。提取細菌RNA需先配制加了溶菌酶或者Lysostaphin的TE(10mMTris-HCl,1mMEDTA),TE中已加入溶菌酶或者Lysostaphin,濃度為1mg/mL。tRNA是mRNA上遺傳密碼的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運者。重慶RNA提取試劑

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細胞RNA提取的方法:實驗提取步驟:標準Trizol提取步驟為液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心。將細胞培養(yǎng)皿置于冰上,加入Trizol裂解5-10分鐘,用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進口EP管中。加入1/5體積的氯仿,上下混勻液體,4度靜置10-15分鐘。(氯仿為有機溶劑,有效的使有機相和無機相迅速分離。有機相中主要是酚和蛋白結(jié)合,從而使得蛋白和RNA脫離,RNA進入水相)。4度離心15分鐘,一定注意選擇低溫離心。離心后分成三層,RNA在上清里,從離心機輕輕拿出EP管,以免管內(nèi)物質(zhì)震蕩導致下層沉淀激起。吸取上清的時候一定要動作輕柔,切忌吸取太多,一般吸到400-500ul,避免吸到下層沉淀,將液體置于新的EP管中。加入等體積異丙醇,4度靜置10min,然后12000rpm離心10min。開封正規(guī)RNA提取試劑報價異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質(zhì)變性劑,可溶解蛋白質(zhì)。

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功能的區(qū)別:1、RNA的功能:mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運者;rRNA是組成核糖體的部分,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的機械。細胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,可調(diào)節(jié)基因表達。而其他如I、II型內(nèi)含子、RNaseP、HDV、核糖體RNA等等都有催化生化反應(yīng)過程的活性,即具有酶的活性,這類RNA被稱為核酶。2、DNA的功能:DNA有傳遞遺傳信息的功能,而蛋白質(zhì)則是由DNA的指令合成的。鑒定親子關(guān)系用得較多的是DNA分型鑒定。人的血液、毛發(fā)、唾液、口腔細胞等都可以用于用親子鑒定,十分方便。DNA是人身體內(nèi)細胞的原子物質(zhì)。每個原子有46個染色體,另外,男性的精子細胞和女性的卵子,各有23個染色體,當精子和卵子結(jié)合的時候。這46個原子染色體就制造一個生命,因此,每人從生父處繼承一半的分子物質(zhì),而另一半則從生母處獲得。

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉(zhuǎn)移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質(zhì)。可以用260nm波長分光測定RNA濃度,OD值為1相當于大約40μg/ml的單鏈RNA。

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安德魯·法爾稱:“克雷格和我的工作是研究為什么一些基因會停止運行,我們試圖去控制它們,我們發(fā)現(xiàn)了一些東西可以有效地中止它們。這些基因并不能告訴你它們能做什么,所以如果你能中止它們,你就可以開始了解它們能做什么。不過,較初發(fā)現(xiàn)RNA現(xiàn)象的是一位華人學者,非??上В麤]有進一步弄清這是為什么。”二人發(fā)現(xiàn)的是一個有關(guān)控制基因信息流程的關(guān)鍵機制。人們的基因組通過從細胞核里的DNA向蛋白質(zhì)的合成機制發(fā)出生產(chǎn)蛋白質(zhì)的指令,這些指令通過mRNA傳送。他們發(fā)現(xiàn)一種可以用特定基因降解mRNA的方式,在這種RNA干擾現(xiàn)象中,雙鏈RNA以一種非常明確的方式壓制了基因表達。這項技術(shù)被用于全球的實驗室來確定在各種病癥中哪種基因起到了重要作用。細胞質(zhì)和細胞核RNA提取試劑盒特點:有效分離和提取細胞質(zhì)RNA,與細胞核RNA。廈門正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹

RNase主要來自樣品的細胞。重慶RNA提取試劑

RNA提取試劑盒原理:該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,簡單,經(jīng)濟有效的方法,可從全血,哺乳動物細胞,細菌細胞和菌類細胞中分離總RNA。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上,同時使污染物通過柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫,不用酚提取或醇沉淀。RNA提取試劑盒特點:1、快速程序在25-40分鐘內(nèi)提供高質(zhì)量的總RNA。2、即用型RNA,可在絕大多數(shù)下游應(yīng)用,例如RT-PCR,cDNA合成,NorthernBlotting,Differentialdisplay,PrimerExtension,mRNAselection。3、適用樣品:全血,哺乳動物細胞,細菌細胞和菌類細胞(樣品起始量:300μl全血,10^7個哺乳動物細胞,10^9個細菌細胞和10^8個菌類細胞??偣部梢允褂迷撛噭┖羞M行50次標準提取??俁NA的產(chǎn)量可達30μg。產(chǎn)量可能因樣品類型而異。)重慶RNA提取試劑

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