PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h自早幼粒階段以后的粒細(xì)胞和幼單核細(xì)胞可呈弱陽性反應(yīng)。安徽正規(guī)糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差~江西咨詢糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)本試劑盒適用于骨髓細(xì)胞涂片,血液細(xì)胞涂片。
糖元染色試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分普遍,主要包括。①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。②生物膜與細(xì)胞器的研究。③細(xì)胞骨架體系的研究。④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。⑧細(xì)胞工程。PAS染色,全稱過碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用來顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。另外,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測原理在于:過碘酸(也成為高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑
染色流程相對簡便、染液易配制的染色方法;選擇染色流程簡便的方法,無論對于量較多的整批次染色,還是較少量的染色均能夠節(jié)省時間、更為便捷。選擇染液易配制的方法,對自配染液(尤其是保存較短的染液)是較為重要的選擇,不容易造成因染液配制問題而影響染色結(jié)果。如顯示彈性纖維。醛品紅染色法無論是從染色流程,還是染液配制都要比鐵蘇木精、間苯二酚堿性品紅等染色方法要簡單方便、省時,同時陽性著染對比度也很明顯。特異性高、傳統(tǒng)或經(jīng)典的染色方法;特異、傳統(tǒng)/經(jīng)典的一些染色法在特殊染色方法的選擇中往往作為選擇。如顯示淀粉樣物質(zhì)。該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。
糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:純酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精配制1)過碘酸酒清夜配法:過碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml)5ml蒸餾水10ml保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周.2)Schiff氏液:0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時時搖動三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時,然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒**配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml純酒精23ml4)亞硫酸水1%偏重亞硫酸蒸餾水180ml的樹膠溶解~通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。北京品質(zhì)好的糖原染色試劑盒直銷價
冷凍切片染色效果不佳,成熟時間2個月,染色時間一般15-20分鐘。安徽正規(guī)糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
可以通過pas染色計(jì)算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì). 具體現(xiàn)象例舉:陽性反應(yīng),胞漿呈紅色,陰性反應(yīng),胞漿呈無色;在正常血片中RBC不染色; PLT染成深紅色;中性粒細(xì)胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細(xì)胞有陽性顆粒;單核細(xì)胞的胞漿染成淡紅色,可含有細(xì)小或粗大陽性顆粒;少數(shù)淋巴細(xì)胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;正常骨髓的幼稚細(xì)胞和有核RBC都不染色;巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色. 巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色. 顏色深淺與濃度相關(guān)安徽正規(guī)糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家