與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能。RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補配對原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達,是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過程中的橋梁。在此過程中,轉(zhuǎn)運RNA是攜帶與三聯(lián)體密碼子對應(yīng)的氨基酸殘基與正在進行翻譯的mRNA結(jié)合,而后核糖體RNA將各個氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子。有些生物,例如一些病菌,也直接使用RNA作為遺傳信息的載體,而不是DNA。血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的。珠海正規(guī)RNA提取試劑進貨價
rRNA是細胞內(nèi)的一種基本RNA,與r蛋白一起構(gòu)成蛋白質(zhì)合成的場所—核糖體。隨著rRNA基因序列越來越了解,其在生物研究中也的得到了更普遍的應(yīng)用,主要表現(xiàn)在生物進化研究和分子流行病研究。(1)rRNA在生物進化上的研究。rRNA具有高度保守性,且普遍存在于各種生物中,rRNA提供了足夠的序列信息?,F(xiàn)在還可用于在細菌分類、細菌鑒定等方面。(2)rRNA在分子流行病上的研究。目前,人們已經(jīng)把rRNA在進化上的普遍差異應(yīng)用到了流行病學(xué)研究方面,通過對不同細菌進行鑒定分類,從而明確病因,追蹤傳染源,進一步控制及預(yù)防疾病。寧波RNA提取試劑哪里買RNA提取試劑注意事項:TRIReagent抽提總RNA的同時,理論上也可抽提蛋白和DNA。
拭子RNA提取試劑的選擇?1、產(chǎn)品價格。價格也是選購產(chǎn)品的重要考量因素。對于絕大多數(shù)實驗如Northern雜交、RT-PCR、RealTimeRT-PCR、cDNA文庫構(gòu)建等,國產(chǎn)試劑盒都能滿足質(zhì)量要求。與國外有名品牌相比,國產(chǎn)試劑盒的價格較為便宜,價格還不到國外品牌價格的30%,性價比較高。因而,對于以上實驗建議選用國產(chǎn)試劑盒。一些經(jīng)費不是很多的課題研究或樣本量較大的臨床檢測項目,特別適合選用國產(chǎn)試劑盒。2、與國外有名品牌相比,國產(chǎn)試劑盒在拭子RNA提取純度上略有不足,但不影響大多數(shù)實驗,特別是下游需要PCR擴增的實驗和分子雜交類實驗。在提取得率上,國內(nèi)試劑盒與國外品牌差別不大,而在價格方面,國產(chǎn)試劑盒具有比較明顯的優(yōu)勢。如果經(jīng)費充足,RNA純度要求特別高,可考慮選擇Q等國外有名品牌。如果經(jīng)費不多或下游主要做PCR或分子雜交等實驗,可考慮選擇性價比較高的國產(chǎn)品牌。
RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時,使用Takara公司的樣品保護劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,同時也可以有效解決組織、細胞樣品的短時間保存及運輸問題。此外,如果將不同時期收集的樣品都預(yù)先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達的時序變化,減少實驗組間的誤差RNA提取試劑注意事項:需自備氯仿,異丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。
RNA提取:預(yù)備工作RNA酶(Rnase)是導(dǎo)致RNA降解較主要的物質(zhì)。此酶非常穩(wěn)定,在一些極端的條件下只可暫時失活,但限制因素去除后又迅速恢復(fù)活性。常規(guī)高溫高壓滅菌方法和蛋白壓制劑不能使所有的Rnase完全失活。1.它普遍存在于人的皮膚上,因此制備RNA時必須戴手套。2.RNase的又一污染源是取液器。根據(jù)取液器制造商的要求對取液器進行處理。一般情況下采用以DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的內(nèi)部和外部,可基本達到要求。3.塑料制品、玻璃和金屬物品的處理。拭子RNA提取試劑的選擇?對離心柱法而言,拭子核酸得率的高低。貴陽RNA提取試劑
RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。珠海正規(guī)RNA提取試劑進貨價
酵母RNA的提取方法:稀堿法是屬化學(xué)破壁法,其方法是在一定堿濃度下,使構(gòu)成細胞壁的蛋白質(zhì)、脂肪及糖的化合物得到水解,從而破壞細胞壁,此法對堿的濃度及提取溫度要求比較嚴(yán)格,堿的濃度不可過濃,應(yīng)控制在1%,并且對提取溫度也有一定的要求,提取時間短。因為在過分劇烈的條件下,容易使核糖核酸分子內(nèi)的酯鍵斷裂,使核糖核酸降解而影響收得率。酵母菌作為重要的模式生物,是遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究材料。由于酵母菌的細胞壁成分復(fù)雜,且較原核生物厚,難于破碎,因此酵母菌總RNA的抽提純化要比原核生物總RNA的抽提純化困難的多。如何有效地破碎細胞壁并保證RNA的完整性,是獲得高質(zhì)量酵母菌總RNA的關(guān)鍵問題??俁NA的提取方法還有很多,如Trizol法、異硫氰酸胍法、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法、尿素法、十二烷基硫酸鈉(SDS)法、熱硼酸鹽法等,這些方法各有優(yōu)缺點,不同的方法適用于不同類型的材料。珠海正規(guī)RNA提取試劑進貨價