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高效液相色譜分離原理液-液分配(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化學鍵合相色譜(ChemicallyBondedPhaseChromatography) 流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進行分配。達到平衡時，服從于高效液相色譜計算公式：式中，cs—溶質(zhì)在固定相中濃度；cm—溶質(zhì)在流動相中的濃度；Vs—固定相的體積；Vm—流動相的體積。LLPC與GPC有相似之處，即分離的順序取決于K，K大的組分保留值大；但也有不同之處，GPC中，流動相對K影響不大，LLPC流動相對K影響較大。a.正相液-液分配色譜法(NormalPhaseliquidChromatography):流動相的極性小于固定液的極性。b.反相液-液分配色譜法(ReversePhaseliquidChromatography):流動相的極性大于固定液的極性。c.液-液分配色譜法的缺點：盡管流動相與固定相的極性要求完全不同，但固定液在流動相中仍有微量溶解；流動相通過色譜柱時的機械沖擊力，會造成固定液流失。上世紀70年代末發(fā)展的化學鍵合固定相（見后），可克服上述缺點。上海禹重實業(yè)有限公司是一家專業(yè)提供液相色譜系統(tǒng)的公司，有需求可以來電咨詢！紹興賽默飛世爾液相色譜系統(tǒng)廠家直銷

高效液相色譜綜述HPLC的出現(xiàn)不過三十多年的時間，但這種分離分析技術的發(fā)展十分迅猛，應用十分。其儀器結(jié)構(gòu)和流程多種多樣。典型的高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)和流程可用下列方框圖表示(SeeFig.3-4)。高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置（用雙泵）、進樣器、色譜柱、檢測器、恒溫器、記錄儀等主要部件。高效液相色譜更適宜于分離、分析高沸點、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對分子量比較大的物質(zhì)，因而廣泛應用于核酸、肽類、內(nèi)酯、稠環(huán)芳烴、高聚物、藥物、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑，抗氧化劑、殺蟲劑、除銹劑的分析等物質(zhì)的分析。紹興賽默飛Vanquish液相色譜系統(tǒng)供應商上海禹重實業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng)，有需要可以聯(lián)系我司哦！

高效液相色譜相關術語峰面積(peakarea，A)—峰與峰底所包圍的面積。保留時間(retentiontime，tR)——從進樣開始到某個組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值的時間。理論塔板數(shù)(theoreticalplatenumber，N)——用于定量表示色譜柱的分離效率（簡稱柱效）。分離度(resolution，R)——相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率，表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5稱為完全分離?！吨袊幍洹芬?guī)定R應大于1.5。拖尾因子(tailingfactor，T)——T=，用以衡量色譜峰的對稱性。也稱為對稱因子(symmetryfactor)或不對稱因子(asymmetryfactor)?！吨袊幍洹芬?guī)定T應為0.95~1.05。T1.05為拖尾峰。

液相色譜理論發(fā)展簡況液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相，稱為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時間長（常有幾個小時）。高效液相色譜法(HighperformanceLiquidChromatography，HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜法(HighPressureLiquidChromatography，HPLC)。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法(HighSpeedLiquidChromatography，HSLP)。也稱現(xiàn)代液相色譜。上海禹重實業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng)，有需要可以聯(lián)系我司哦！

高效液相色譜相關術語色譜圖(chromatogram)——樣品流經(jīng)色譜柱和檢測器，所得到的信號-時間曲線，又稱色譜流出曲線(elutionprofile)?；€(baseline)——經(jīng)流動相沖洗，柱與流動相達到平衡后，檢測器測出一段時間的流出曲線。一般應平行于時間軸。噪音(noise)——基線信號的波動。通常因電源接觸不良或瞬時過載、檢測器不穩(wěn)定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致。漂移(drift)——基線隨時間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩(wěn)定所引起，柱內(nèi)的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產(chǎn)生漂移。上海禹重實業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng)，歡迎您的來電！六安進口Vanquish液相色譜系統(tǒng)供應商

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高效液相色譜分離原理離子交換(Ion-exchangeChromatography)IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流動相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進行可逆交換，依據(jù)這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例，其交換過程可表示如下：X-（溶劑中）(樹脂-R4NCl-)===（樹脂-R4NX-)Cl-（溶劑中）當交換達平衡時：KX=[-R4NX-][Cl-]/[-R4NCl-][X-]分配系數(shù)為：DX=[-R4NX-]/[X-]=KX[-R4NCl-]/[Cl-][討論：DX與保留值的關系]凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法來進行分離。紹興賽默飛世爾液相色譜系統(tǒng)廠家直銷

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