高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱高壓液相色譜。使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,通過檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),通過分析比對(duì)這些信號(hào)來判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,***地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),竭誠(chéng)為您服務(wù)。衢州高效液相色譜系統(tǒng)怎么樣
雙LC的VanquishDuo系統(tǒng)更多細(xì)節(jié)VanquishDuo系統(tǒng)可采用多種分析檢測(cè)器,包括質(zhì)譜(MS)、二極管陣列檢測(cè)(DAD)、電霧式檢(CAD)、可變波長(zhǎng)檢測(cè)(VWD)和熒光檢測(cè)(FLD)。多功能檢測(cè)性能從小分子到復(fù)雜生物大分子,根據(jù)分析物的分子特征不同,需要采用多種檢測(cè)器。雙LC的VanquishDuo系統(tǒng)可同時(shí)采用MS、DAD、VWD、FLD和CAD等大量檢測(cè)器產(chǎn)品中的任意兩種檢測(cè)器。多功能色譜柱管理更大的色譜柱容量(每個(gè)柱溫箱內(nèi)安裝兩個(gè)30cm色譜柱或多個(gè)更短的色譜柱)以及的溫度范圍和溫度穩(wěn)定性。浦東新區(qū)化學(xué)分離液相色譜系統(tǒng)咨詢報(bào)價(jià)上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),歡迎您的來電哦!
高效液相色譜的歷史1903年俄國(guó)植物化學(xué)家茨維特(Tswett)提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法chromatography來描述他的彩色試驗(yàn)。1930年以后,相繼出現(xiàn)了紙色譜、離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù)。1952年,英國(guó)學(xué)者M(jìn)artin和Synge基于他們?cè)诜峙渖V方面的研究工作,提出了關(guān)于氣-液分配色譜的比較完整的理論和方法,把色譜技術(shù)向前推進(jìn)了一大步,這是氣相色譜在此后的十多年間發(fā)展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,離子交換色譜的儀器化導(dǎo)致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),這是近代液相色譜的一個(gè)重要嘗試,但分離效率尚不理想。1960年中后期,氣相色譜理論和實(shí)踐發(fā)展,以及機(jī)械、光學(xué)、電子等技術(shù)上的進(jìn)步,液相色譜又開始活躍。到60年代末期把高壓泵和化學(xué)鍵合固定相用于液相色譜就出現(xiàn)了HPLC。1970年中期以后,微處理機(jī)技術(shù)用于液相色譜,進(jìn)一步提高了儀器的自動(dòng)化水平和分析精度。1990年以后,生物工程和生命科學(xué)在國(guó)際和國(guó)內(nèi)的迅速發(fā)展,為高效液相色譜技術(shù)提出了更多、更新的分離、純化、制備的課題,如人類基因組計(jì)劃,蛋白質(zhì)組學(xué)有HPLC作預(yù)分離等。
液相色譜與氣相色譜的比較液相色譜所用基本概念:保留值、塔板數(shù)、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論:塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致,但由于在液相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動(dòng)相,而液體和氣體的性質(zhì)不相同。此外,液相色譜所用的儀器設(shè)備和操作條件也與氣相色譜不同,所以,液相色譜與氣相色譜有一定的差別。主要有以下幾力‘面:①操作條件及應(yīng)用范圍不同②液相色譜能完成難度較高的分離工作③由于液體的擴(kuò)散性比氣體的小105倍,因此,溶質(zhì)在液相中的傳質(zhì)速率慢,柱外效應(yīng)就顯得特別重要;而在氣相色譜中,由色譜柱外區(qū)域引起的擴(kuò)張可以忽略不計(jì)。④液相色譜中,制備樣品簡(jiǎn)單,回收樣品也比較容易,而且回收是定量的,適合于大量制備,但液相色譜尚缺乏通用的檢測(cè)器,一起比較復(fù)雜,價(jià)格昂貴。在實(shí)際應(yīng)用中,這兩種技術(shù)是相互補(bǔ)充的。綜上所述,液相色譜具有柱效高,選擇性高,靈敏性**析速度快,重復(fù)性好,應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn),該法已成為現(xiàn)代分析技術(shù)的主要手段之一。目前在化學(xué),化工,醫(yī)藥,生化,環(huán)保,農(nóng)業(yè)等科學(xué)領(lǐng)域獲得***的應(yīng)用。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),有想法可以來我司咨詢。
高效液相色譜分離原理離子交換(Ion-exchangeChromatography)IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進(jìn)行可逆交換,依據(jù)這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例,其交換過程可表示如下:X-(溶劑中)(樹脂-R4NCl-)===(樹脂-R4NX-)Cl-(溶劑中)當(dāng)交換達(dá)平衡時(shí):KX=[-R4NX-][Cl-]/[-R4NCl-][X-]分配系數(shù)為:DX=[-R4NX-]/[X-]=KX[-R4NCl-]/[Cl-][討論:DX與保留值的關(guān)系]凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法來進(jìn)行分離。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng)。安徽化學(xué)液相色譜系統(tǒng)多少錢
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高效液相色譜綜述HPLC的出現(xiàn)不過三十多年的時(shí)間,但這種分離分析技術(shù)的發(fā)展十分迅猛,應(yīng)用十分。其儀器結(jié)構(gòu)和流程多種多樣。典型的高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)和流程可用下列方框圖表示(SeeFig.3-4)。高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、恒溫器、記錄儀等主要部件。高效液相色譜更適宜于分離、分析高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對(duì)分子量比較大的物質(zhì),因而廣泛應(yīng)用于核酸、肽類、內(nèi)酯、稠環(huán)芳烴、高聚物、藥物、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲劑、除銹劑的分析等物質(zhì)的分析。衢州高效液相色譜系統(tǒng)怎么樣
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