高效液相色譜分離原理液-液分配(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(ChemicallyBondedPhaseChromatography) 流動(dòng)相和固定相都是液體。流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個(gè)明顯的分界面。當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱,溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí),服從于高效液相色譜計(jì)算公式:式中,cs—溶質(zhì)在固定相中濃度;cm—溶質(zhì)在流動(dòng)相中的濃度;Vs—固定相的體積;Vm—流動(dòng)相的體積。LLPC與GPC有相似之處,即分離的順序取決于K,K大的組分保留值大;但也有不同之處,GPC中,流動(dòng)相對(duì)K影響不大,LLPC流動(dòng)相對(duì)K影響較大。a.正相液-液分配色譜法(NormalPhaseliquidChromatography):流動(dòng)相的極性小于固定液的極性。b.反相液-液分配色譜法(ReversePhaseliquidChromatography):流動(dòng)相的極性大于固定液的極性。c.液-液分配色譜法的缺點(diǎn):盡管流動(dòng)相與固定相的極性要求完全不同,但固定液在流動(dòng)相中仍有微量溶解;流動(dòng)相通過色譜柱時(shí)的機(jī)械沖擊力,會(huì)造成固定液流失。上世紀(jì)70年代末發(fā)展的化學(xué)鍵合固定相(見后),可克服上述缺點(diǎn)。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司液相色譜系統(tǒng)獲得眾多用戶的認(rèn)可。徐匯區(qū)進(jìn)口液相色譜系統(tǒng)廠家供應(yīng)
液相色譜類型液相色譜按其分離機(jī)理,可分為四種類型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法分配色譜法這種色譜的流動(dòng)相和固定相都是液體,樣品分子在兩個(gè)液相之間很快達(dá)到平衡分配,利用各組分在兩相中分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離,類似于萃取過程。一般常用的固定液有β,β-氧二丙腈(ODPN)、聚乙二醇(PEG400~4000)、三甲撐乙二醇(TMG)和角鯊?fù)?SQ)。采用與氣相色譜(GC)同樣的方法,將固定液涂漬在多孔的載體表面,但在使用中固定液易流失。目前,應(yīng)用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中,固定液不是涂在載體表面,而是通過化學(xué)反應(yīng)在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機(jī)基團(tuán)。例如,利用氯代十八烷基硅烷與硅膠表面的羥基(-OH)之間的反應(yīng)就可以形成一烷基化表面。這種固定液的優(yōu)點(diǎn)是不易被流動(dòng)相剝蝕。在分配色譜法中,流動(dòng)相可為純?nèi)軇?,也可以采用混合溶劑進(jìn)行梯度淋洗,其極性應(yīng)與固定液差別大一些,以避免兩者之間相溶。通??煞譃檎喾峙浜头聪喾峙?。舟山進(jìn)口液相色譜系統(tǒng)供應(yīng)商上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),歡迎您的來電哦!
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高效液相色譜相關(guān)術(shù)語色譜圖(chromatogram)——樣品流經(jīng)色譜柱和檢測(cè)器,所得到的信號(hào)-時(shí)間曲線,又稱色譜流出曲線(elutionprofile)?;€(baseline)——經(jīng)流動(dòng)相沖洗,柱與流動(dòng)相達(dá)到平衡后,檢測(cè)器測(cè)出一段時(shí)間的流出曲線。一般應(yīng)平行于時(shí)間軸。噪音(noise)——基線信號(hào)的波動(dòng)。通常因電源接觸不良或瞬時(shí)過載、檢測(cè)器不穩(wěn)定、流動(dòng)相含有氣泡或色譜柱被污染所致。漂移(drift)——基線隨時(shí)間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動(dòng)相及流量的不穩(wěn)定所引起,柱內(nèi)的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會(huì)產(chǎn)生漂移。徐匯區(qū)進(jìn)口液相色譜系統(tǒng)廠家供應(yīng)
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