高效液相色譜的歷史1903年俄國(guó)植物化學(xué)家茨維特(Tswett)***提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法chromatography來(lái)描述他的彩色試驗(yàn)。1930年以后,相繼出現(xiàn)了紙色譜、離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù)。1952年,英國(guó)學(xué)者M(jìn)artin和Synge基于他們?cè)诜峙渖V方面的研究工作,提出了關(guān)于氣-液分配色譜的比較完整的理論和方法,把色譜技術(shù)向前推進(jìn)了一大步,這是氣相色譜在此后的十多年間發(fā)展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,離子交換色譜的儀器化導(dǎo)致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),這是近代液相色譜的一個(gè)重要嘗試,但分離效率尚不理想。1960年中后期,氣相色譜理論和實(shí)踐發(fā)展,以及機(jī)械、光學(xué)、電子等技術(shù)上的進(jìn)步,液相色譜又開(kāi)始活躍。到60年代末期把高壓泵和化學(xué)鍵合固定相用于液相色譜就出現(xiàn)了HPLC。1970年中期以后,微處理機(jī)技術(shù)用于液相色譜,進(jìn)一步提高了儀器的自動(dòng)化水平和分析精度。1990年以后,生物工程和生命科學(xué)在國(guó)際和國(guó)內(nèi)的迅速發(fā)展,為高效液相色譜技術(shù)提出了更多、更新的分離、純化、制備的課題,如人類(lèi)基因組計(jì)劃,蛋白質(zhì)組學(xué)有HPLC作預(yù)分離等。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),有想法可以來(lái)我司咨詢(xún)。廣東Vanquish液相色譜系統(tǒng)咨詢(xún)報(bào)價(jià)
液相色譜類(lèi)型液相色譜按其分離機(jī)理,可分為四種類(lèi)型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法分配色譜法這種色譜的流動(dòng)相和固定相都是液體,樣品分子在兩個(gè)液相之間很快達(dá)到平衡分配,利用各組分在兩相中分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離,類(lèi)似于萃取過(guò)程。一般常用的固定液有β,β-氧二丙腈(ODPN)、聚乙二醇(PEG400~4000)、三甲撐乙二醇(TMG)和角鯊?fù)?SQ)。采用與氣相色譜(GC)同樣的方法,將固定液涂漬在多孔的載體表面,但在使用中固定液易流失。目前,應(yīng)用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中,固定液不是涂在載體表面,而是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機(jī)基團(tuán)。例如,利用氯代十八烷基硅烷與硅膠表面的羥基(-OH)之間的反應(yīng)就可以形成一烷基化表面。這種固定液的優(yōu)點(diǎn)是不易被流動(dòng)相剝蝕。在分配色譜法中,流動(dòng)相可為純?nèi)軇部梢圆捎没旌先軇┻M(jìn)行梯度淋洗,其極性應(yīng)與固定液差別大一些,以避免兩者之間相溶。通??煞譃檎喾峙浜头聪喾峙?。廣東Vanquish液相色譜系統(tǒng)咨詢(xún)報(bào)價(jià)液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,用戶(hù)的信賴(lài)之選,歡迎新老客戶(hù)來(lái)電!
高效液相色譜相關(guān)術(shù)語(yǔ)色譜峰(peak)——組分流經(jīng)檢測(cè)器時(shí)響應(yīng)的連續(xù)信號(hào)產(chǎn)生的曲線(xiàn)。流出曲線(xiàn)上的突起部分。正常色譜峰近似于對(duì)稱(chēng)形正態(tài)分布曲線(xiàn)(高斯Gauss曲線(xiàn))。不對(duì)稱(chēng)色譜峰有兩種:前延峰(leadingpeak)和拖尾峰(tailingpeak)。前者少見(jiàn)。峰底—基線(xiàn)上峰的起點(diǎn)至終點(diǎn)的距離。峰高(peakheight,h)—峰的比較高點(diǎn)至峰底的距離。峰寬(peakwidth,W)—峰兩側(cè)拐點(diǎn)處所作兩條切線(xiàn)與基線(xiàn)的兩個(gè)交點(diǎn)間的距離。W=4σ半峰寬(peakwidthathalf-height,Wh/2)—峰高一半處的峰寬。Wh/2=2.355σ
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高效液相色譜法介紹----高效液相色譜儀的構(gòu)造:高效液相色譜系統(tǒng)主要是由流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和記錄儀組成的,高效液相色譜系統(tǒng)的整體組成類(lèi)似于氣相色譜,但是針對(duì)高效液相色譜系統(tǒng)流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出很多的調(diào)整。高效液相色譜的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn),進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利、切換嚴(yán)密。同時(shí),由于液體流動(dòng)相黏度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,為了減低柱壓,高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長(zhǎng)度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),歡迎新老客戶(hù)來(lái)電!進(jìn)口高效液相色譜系統(tǒng)哪家好
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