高效液相色譜綜述HPLC的出現(xiàn)不過三十多年的時間,但這種分離分析技術(shù)的發(fā)展十分迅猛,應(yīng)用十分***。其儀器結(jié)構(gòu)和流程多種多樣。典型的高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)和流程可用下列方框圖表示(SeeFig.3-4)。高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進樣器、色譜柱、檢測器、恒溫器、記錄儀等主要部件。高效液相色譜更適宜于分離、分析高沸點、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對分子量比較大的物質(zhì),因而廣泛應(yīng)用于核酸、肽類、內(nèi)酯、稠環(huán)芳烴、高聚物、藥物、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲劑、除銹劑的分析等物質(zhì)的分析。上海禹重實業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),有需要可以聯(lián)系我司哦!賽默飛世爾液相色譜系統(tǒng)廠家供應(yīng)
液相色譜理論發(fā)展簡況液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。高效液相色譜法(HighperformanceLiquidChromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜法(HighPressureLiquidChromatography,HPLC)。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法(HighSpeedLiquidChromatography,HSLP)。也稱現(xiàn)代液相色譜。北京液相色譜系統(tǒng)供應(yīng)商上海禹重實業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),有想法的可以來電咨詢!
高效液相色譜相關(guān)術(shù)語峰面積(peakarea,A)—峰與峰底所包圍的面積。保留時間(retentiontime,tR)——從進樣開始到某個組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值的時間。理論塔板數(shù)(theoreticalplatenumber,N)——用于定量表示色譜柱的分離效率(簡稱柱效)。分離度(resolution,R)——相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5稱為完全分離。《中國藥典》規(guī)定R應(yīng)大于1.5。拖尾因子(tailingfactor,T)——T=,用以衡量色譜峰的對稱性。也稱為對稱因子(symmetryfactor)或不對稱因子(asymmetryfactor)?!吨袊幍洹芬?guī)定T應(yīng)為0.95~1.05。T1.05為拖尾峰。
正反色譜正相色譜法采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相);流動相為相對非極性的疏水性溶劑(烷烴類如正已烷、環(huán)已烷),常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調(diào)節(jié)組分的保留時間。常用于分離中等極性和極性較強的化合物(如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等)。反相色譜法一般用非極性固定相(如C18、C8);流動相為水或緩沖液,常加入甲醇、乙腈、異丙醇、**、四氫呋喃等與水互溶的有機溶劑以調(diào)節(jié)保留時間。適用于分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現(xiàn)代液相色譜中應(yīng)用**為***,據(jù)統(tǒng)計,它占整個HPLC應(yīng)用的80%左右。液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實業(yè)有限公司,讓您滿意,歡迎新老客戶來電!
高效液相色譜相關(guān)術(shù)語色譜圖(chromatogram)——樣品流經(jīng)色譜柱和檢測器,所得到的信號-時間曲線,又稱色譜流出曲線(elutionprofile)。基線(baseline)——經(jīng)流動相沖洗,柱與流動相達到平衡后,檢測器測出一段時間的流出曲線。一般應(yīng)平行于時間軸。噪音(noise)——基線信號的波動。通常因電源接觸不良或瞬時過載、檢測器不穩(wěn)定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致。漂移(drift)——基線隨時間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩(wěn)定所引起,柱內(nèi)的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產(chǎn)生漂移。上海禹重實業(yè)有限公司是一家專業(yè)提供液相色譜系統(tǒng)的公司,歡迎新老客戶來電!安徽專業(yè)高效液相色譜系統(tǒng)價格
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高效液相色譜分離原理離子(IonChromatography)用離子交換樹脂為固定相,電解質(zhì)溶液為流動相。以電導(dǎo)檢測器為通用檢測器,為消除流動相中強電解質(zhì)背景離子對電導(dǎo)檢測器的干擾,設(shè)置了***柱。試樣組分在分離柱和***柱上的反應(yīng)原理與離子交換色譜法相同。以陰離子交換樹脂(R-OH)作固定相,分離陰離子(如Br-)為例。當(dāng)待測陰離子Br-隨流動相(NaOH)進入色譜柱時,發(fā)生如下交換反應(yīng)(洗脫反應(yīng)為交換反應(yīng)的逆過程):***柱上發(fā)生的反應(yīng):R-HNaOH-===R-NaH2OR-HNaBr-===R-NaHBr-可見,通過***柱將洗脫液轉(zhuǎn)變成了電導(dǎo)值很小的水,消除了本底電導(dǎo)的影響;試樣陰離子Br-則被轉(zhuǎn)化成了相應(yīng)的酸HBr-,可用電導(dǎo)法靈敏的檢測。離子色譜法是溶液中陰離子分析的比較好方法。也可用于陽離子分析。賽默飛世爾液相色譜系統(tǒng)廠家供應(yīng)