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來源: 發(fā)布時間:2022-04-12

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本篇文章我們來介紹Tris緩沖液的配制方法。Tris-HCl緩沖液的兩種配置方法第一種方法是分別配制0.05mol/LTris和0.05mol/LHCl溶液,然后按常用表中所列體積混合即可。但是由于標準濃度的稀鹽酸不易配制,所以常用另一種方法:以配置1L0.1mol/L的Tris-HCl緩沖液為例:先稱12.11gTris堿溶于950mL~970mL去離子水中,邊攪拌邊滴加4NHCl,用pH計測定溶液pH值至所需的pH值,然后再加水補足到1L。詳情可參考AVT官網(wǎng)發(fā)布的文章,了解更多相關(guān)資訊陜西現(xiàn)貨TRIS現(xiàn)貨供應(yīng)了解更多tris相關(guān)資訊,敬請關(guān)注AVT!

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使用Tris緩沖液時的注意事項:1.Tris緩沖液的pH值受溫度和濃度影響很大,因此在配制過程中要考慮使用環(huán)境;2.Tris在一定程度上與各種分子反應(yīng),包括RNA酶抑制劑,醛,酶,DNA以及常見金屬如Cr3+,F(xiàn)e3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,可以和重金屬一起作用,但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用;3.易吸收空氣中的CO2,配制的緩沖液要注意蓋嚴密封;4.對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,需使用與Tris緩沖溶液具有兼容性的電極;5.Tris不適用于二喹啉甲酸(BCA)測定;6.吸入,攝入,皮膚吸收可造成傷害,操作時需戴好手套和護目鏡。除了Tris-HCl之外,Tris還有多種衍生緩沖液:TBS=Tris-HCl+NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的組織或WesternBlotting中的蛋白印跡膜等;TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做WesternBlotting中常用的一種洗膜緩沖液;TE=Tris-HCl+EDTA,對DNA的堿基有保護性,常被用于DNA的穩(wěn)定和儲存;TAE=Trisbase+乙酸+EDTA,是大片段DNA短時間電泳時***使用的緩沖系統(tǒng);TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,適用于長時間DNA電泳,對較小片段分離效果較好。

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Tris是三(羥甲基)氨基甲烷的縮寫,這是一種常用于鹽水中的化合物,因為它是等滲且無毒的,pKa為8.1,pH值介于7和9之間,因此Tris緩沖溶液也常用于一系列化學分析和生物研究中,包括DNA提取。重要的是要知道tris緩沖溶液中的pH值會隨溶液溫度而變化。步驟1、首先確定您想要制作的Tris緩沖液的濃度(摩爾濃度)和體積。例如,用于生理鹽水的Tris緩沖溶液從10到100mM不等。根據(jù)實驗需求,通過將緩沖液的摩爾濃度乘以正在制作的緩沖液的體積來計算所需的Tris的摩爾數(shù)。(Tris的摩爾數(shù)=mol/LxL)2、接下來,通過將摩爾數(shù)乘以Tris的分子量(121.14g/mol)來確定這是多少克Tris的克數(shù)=(摩爾)x(121.14g/mol)3、將Tris溶解到蒸餾去離子水中,達到所需**終體積的1/3到1/2。4、混入HCl(例如1MHCl),直到pH計為您的Tris緩沖溶液提供所需的pH。5、用水稀釋緩沖液以達到所需的**終溶液量。獲取更多三(羥甲基)氨基甲烷相關(guān)資訊,敬請關(guān)注AVT!遼寧有登記號TRIS現(xiàn)貨供應(yīng)

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